مخزن مؤقت TBE

TBE أو Tris/Borate/EDTA هو محلول منظم يحتوي على خليط من قاعدة Tris وحمض البوريك و EDTA .

في علم الأحياء الجزيئي، تُستخدم محاليل TBE و TAE بشكل شائع في الإجراءات التي تتضمن الأحماض النووية ، وأكثرها شيوعًا هو الفصل الكهربائي . تُعد محاليل Tris- حمضية محاليل فعالة للظروف القاعدية الخفيفة، حيث تحافظ على الحمض النووي DNA منزوع البروتونات وقابلًا للذوبان في الماء. يعمل EDTA كعامل مخلب للأيونات ثنائية التكافؤ ، وخاصة أيونات المغنيسيوم (Mg²⁺ ⁾ . ولأن هذه الأيونات عوامل مساعدة ضرورية للعديد من الإنزيمات، بما في ذلك النيوكليازات الملوثة ، فإن دور EDTA هو حماية الأحماض النووية من التحلل الإنزيمي. ولكن نظرًا لأن Mg²⁺ ^هو أيضًا عامل مساعد للعديد من الإنزيمات المفيدة لتعديل الحمض النووي DNA، مثل إنزيمات التقييد وبوليميراز الحمض النووي DNA ، فإن تركيزه في محاليل TBE أو TAE يُحافظ عليه منخفضًا بشكل عام (عادةً حوالي 1 ملي مولار ).

وفقًا لدراسات برودي وكيرن، يُعد حمض البوريك الصوديوم ^{[ أ ]} وسيطًا موصلًا أفضل وأرخص لمعظم تطبيقات الفصل الكهربائي للهلام الحمض النووي . ^{[ 1 ] [ 2 ]}

• 54 غرام من قاعدة Tris (CAS# 77-86-1، قاعدة حرة)
• 27.5 غرام من حمض البوريك (CAS# 10043-35-3)
• 20 مل من EDTA 0.5 مولار (CAS# 60-00-4) ( الأس الهيدروجيني 8.0)

اضبط درجة الحموضة إلى 8.3 باستخدام حمض الهيدروكلوريك. ^{[ 3 ]}

يمكن تخفيف محلول TBE إلى تركيز 1X قبل استخدامه في عملية الفصل الكهربائي، كما أن تركيز 0.5x مقبول أيضاً. أما التركيزات الأعلى فستؤدي إلى نتائج ضعيفة بسبب توليد حرارة زائدة.

• محلول منظم LB ، محلول منظم بورات الليثيوم، محلول منظم مشابه يحتوي على أيونات الليثيوم بدلاً من التريس
• محلول TAE المنظم ، وهو محلول منظم مشابه يحتوي على حمض الأسيتيك بدلاً من حمض البوريك