الكواغلاز

📅 آخر تحديث: ٢٦ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٦ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 2 صور
الموسوعة الحرة
تستخدم بكتيريا المكورات العنقودية الذهبية إنزيم الكواغلاز لتكوين غلاف من الفيبرين من الفيبرينوجين الموجود في مجرى الدم. وهذا يساعد البكتيريا على التهرب من الكشف عنها وابتلاعها بواسطة الجهاز المناعي.

الكواغلاز هو إنزيم بروتيني تنتجه العديد من الكائنات الدقيقة، وهو يُمكّن من تحويل الفيبرينوجين إلى فيبرين . يُستخدم في المختبر للتمييز بين أنواع مختلفة من عزلات المكورات العنقودية . ومن المهم ذكره أن المكورات العنقودية الذهبية (S. aureus) عادةً ما تكون إيجابية لاختبار الكواغلاز، مما يعني أن نتيجة الاختبار الإيجابية تشير إلى وجود المكورات العنقودية الذهبية أو أي من أنواع المكورات العنقودية الأخرى الإحدى عشرة الإيجابية لاختبار الكواغلاز . [ 1 ] أما نتيجة الاختبار السلبية فتشير إلى وجود كائنات سلبية لاختبار الكواغلاز، مثل المكورات العنقودية البشروية (Staphylococcus epidermidis) أو المكورات العنقودية الرمية (Staphylococcus saprophyticus) . ومع ذلك، من المعروف الآن أن ليس كل المكورات العنقودية الذهبية إيجابية لاختبار الكواغلاز. [ 2 ] [ 3 ] في حين أن المكورات العنقودية الموجبة للكواغلاز عادة ما تكون ممرضة ، فإن المكورات العنقودية السالبة للكواغلاز ترتبط في أغلب الأحيان بالعدوى الانتهازية . [ 4 ]   

كما يتم إنتاجه بواسطة بكتيريا يرسينيا الطاعونية . [ 5 ]

يتفاعل إنزيم الكواغلاز مع البروثرومبين في الدم. يُسمى المركب الناتج ستافيلوثرومبين ، والذي يمكّن الإنزيم من العمل كبروتياز لتحويل الفيبرينوجين، وهو بروتين بلازما يُنتجه الكبد، إلى فيبرين. ينتج عن ذلك تجلط الدم. يرتبط الكواغلاز بقوة بسطح بكتيريا المكورات العنقودية الذهبية  ، ويمكنه تغطية سطحها بالفيبرين عند ملامسته للدم. قد تحمي جلطة الفيبرين البكتيريا من البلعمة وتعزلها عن دفاعات الجسم الأخرى. [ 6 ] وبالتالي، قد تجعل طبقة الفيبرين البكتيريا أكثر ضراوة. يُعد الكواغلاز المرتبط جزءًا من عائلة بروتينات الالتصاق MSCRAMM .

اختبار الكواغلاز

يُستخدم اختبار الكواغلاز تقليديًا للتمييز بين المكورات العنقودية الذهبية والمكورات العنقودية سلبية الكواغلاز . تُنتج المكورات العنقودية الذهبية نوعين من الكواغلاز (الكواغلاز المرتبط والكواغلاز الحر). يُمكن الكشف عن الكواغلاز المرتبط، المعروف أيضًا باسم "عامل التكتل" ، بإجراء اختبار الكواغلاز على شريحة، بينما يُمكن الكشف عن الكواغلاز الحر باستخدام اختبار الكواغلاز الأنبوبي.

اختبار الانزلاق

يُجرى اختبار التخثر على الشريحة مع عينة تحكم سلبية لاستبعاد التراص الذاتي. توضع قطرتان من المحلول الملحي على الشريحة المُعَلَّمة برقم العينة، الاختبار (T) والتحكم (C). تُستحلب قطرتا المحلول الملحي مع الكائن الحي المراد اختباره باستخدام حلقة سلكية أو سلك مستقيم أو عود خشبي. توضع قطرة من البلازما ( يُوصى باستخدام بلازما الأرانب المُضادة للتخثر بـ EDTA ) [ 7 ] على قطرة المحلول الملحي المُلقَّحة المُطابقة للاختبار، وتُخلط جيدًا، ثم تُرج الشريحة برفق لمدة 10 ثوانٍ تقريبًا.

  • في حالة "الإيجابية"، سيتم ملاحظة تكتل كبير في البلازما في غضون 10 ثوانٍ، مع عدم وجود تكتل في قطرة المحلول الملحي.
  • إذا كانت النتيجة "سلبية"، فلن يتم ملاحظة أي تكتل.

إذا كانت نتيجة اختبار الكواغلاز على الشريحة سلبية، يُجرى اختبار أنبوبي للتأكيد. يشير التكتل في كلتا القطرتين إلى التراص الذاتي، لذا يجب إجراء الاختبار الأنبوبي. لا يُجرى هذا الاختبار في جميع المؤسسات، ولكن تعتمد معظم النتائج على نتائج زراعة الدم المخبرية.

اختبار الأنبوب

جلطة الفيبرين التي تتشكل في أنبوب الاختبار بواسطة تفاعل الكواغلاز

يستخدم اختبار الأنبوب بلازما الأرانب الملقحة بمستعمرة من المكورات العنقودية (أي المكورات موجبة الغرام التي تتفاعل إيجابياً مع الكاتالاز ). ثم يُحضن الأنبوب عند درجة حرارة 37  درجة مئوية لمدة ساعة ونصف. إذا كانت النتيجة سلبية، يُستمر في التحضين لمدة تصل إلى 18 ساعة.

  • إذا كانت النتيجة "إيجابية" (على سبيل المثال، المستعمرة المشتبه بها هي S.  aureus )، فسوف تتخثر البلازما، [ 8 ] مما يؤدي إلى تكوين جلطة (في بعض الأحيان تكون الجلطة واضحة لدرجة أن السائل سيتصلب تمامًا).
  • في حال كانت النتيجة سلبية، يبقى البلازما سائلاً. قد تشير النتيجة السلبية إلى وجود بكتيريا المكورات العنقودية البشروية  ، ولكن لا يمكن تأكيد ذلك إلا من خلال اختبار تحديد أكثر دقة، باستخدام الاختبارات البيوكيميائية كما في طرق اختبار مؤشر الملف التحليلي . قد تُعتبر النتيجة سلبية خاطئة إذا لم تُترك العينة لتبرد لمدة 30 دقيقة تقريبًا في درجة حرارة الغرفة أو 10 دقائق في المُجمد، نظرًا لأن المصل قد يذوب. أما إذا كانت النتيجة سلبية بالفعل، فسيبقى المصل سائلاً بعد التبريد.
  • قائمة المكورات العنقودية إيجابية التخثر: المكورات العنقودية الذهبية subsp. اللاهوائية ، S. aureus subsp. aureus ، S. delphini ، S. hyicus ، S. intermedius ، S. lutrae ، and Staphylococcus schleiferi subsp. التخثر .
  • قائمة المكورات العنقودية سلبية التخثر ذات الأهمية السريرية: S.  saprophyticus ، S.cohnii subsp. كوهني ، S. كوهني subsp. اليوريا الحالة , S. captitus subsp. captitus ، وS.warneri ، وS.hominis ، و S.epidermidis ، و S. caprae ، و S.  lugdunensis

مراجع

  1. ↑ بيكر وآخرون، 2014. PMID 25278577
  2. ↑ رايان كيه جيه، راي سي جي (محرران) (2004). شيريس في علم الأحياء الدقيقة الطبية (الطبعة الرابعة). ماكجرو هيل. ISBN 0-8385-8529-9.
  3. ↑ اختبار ما قبل الجراحة، الطبعة الثانية عشرة، صفحة 88
  4. ↑ غونزاليس-مارتن م، سواريز-بونيه أ، تيجيدور-جونكو م ت (2020). "عوامل الضراوة في المكورات العنقودية الموجبة للكواغلاز ذات الأهمية البيطرية بخلاف المكورات العنقودية الذهبية" . المجلة البيطرية الفصلية . 40 (1): 118-131 . doi : 10.1080/01652176.2020.1748253 . PMC 7178840. PMID 32223696 .  
  5. ↑ "إنزيم التخثر" في قاموس دورلاند الطبي
  6. ↑ تورتورا، جيرارد جيه؛ فونك، بيرديل آر؛ كيس، كريستين إل. (2013). علم الأحياء الدقيقة: مقدمة ( الطبعة الحادية عشرة). غلينفيو، إلينوي: بيرسون إديوكيشن إنك. ص 434. ISBN   978-0-321-73360-3.
  7. ↑ أ. فوربس، بيتي؛ ​​دانيال ف. ساهام؛ أليس س. وايسفيلد (1998). علم الأحياء الدقيقة التشخيصي لبيلي وسكوت ( الطبعة العاشرة). دون لاديج. الصفحات 430-431 . ISBN   0-8151-2535-6.
  8. ↑ "اختبار التخثر" في قاموس دورلاند الطبي