اختبار تثبيت المتمم

اختبار تثبيت المتممة هو اختبار طبي مناعي يُستخدم للكشف عن وجود أجسام مضادة أو مستضدات محددة في مصل المريض ، وذلك بناءً على حدوث تثبيت المتممة . وقد استُخدم على نطاق واسع لتشخيص العدوى، لا سيما تلك التي تُسببها الميكروبات التي يصعب الكشف عنها بطرق الزرع، وفي الأمراض الروماتيزمية. إلا أنه في مختبرات التشخيص السريري، حلت محله إلى حد كبير طرق مصلية أخرى مثل اختبار ELISA، وطرق الكشف عن مسببات الأمراض القائمة على الحمض النووي، وخاصةً تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) .

نظام المتممة هو نظام من بروتينات المصل التي تتفاعل مع معقدات المستضد-المضاد. إذا حدث هذا التفاعل على سطح الخلية، فسيؤدي إلى تكوين ثقوب عبر الغشاء وبالتالي تدمير الخلية. الخطوات الأساسية لاختبار تثبيت المتممة هي كما يلي: ^{[ 1 ]}

1. يتم فصل المصل عن المريض.
2. تختلف مستويات بروتينات المتممة في مصل دم المرضى بشكل طبيعي. ولتجنب أي تأثير محتمل لهذا الاختلاف على نتائج الاختبار، يجب تدمير بروتينات المتممة الموجودة في مصل دم المريض واستبدالها بكمية معروفة من بروتينات المتممة المعيارية.
   1. يُسخّن المصل بطريقة تؤدي إلى تدمير جميع بروتينات المتممة الموجودة فيه، دون تدمير أي من الأجسام المضادة. (وهذا ممكن لأن بروتينات المتممة أكثر عرضة للتلف بفعل الحرارة من الأجسام المضادة).
   2. تُضاف كمية معروفة من بروتينات المتممة القياسية إلى المصل. (غالباً ما يتم الحصول على هذه البروتينات من مصل خنزير غينيا).
3. يُضاف المستضد المطلوب إلى المصل.
4. تُضاف خلايا الدم الحمراء للأغنام ( sRBCs ) ^{[ 2 ]} ، المرتبطة مسبقًا بأضداد sRBC، إلى المصل. يُعتبر الاختبار سلبيًا إذا تحول لون المحلول إلى الوردي (أي، يحدث انحلال للدم ) في هذه المرحلة، وإيجابيًا في غير ذلك.

إذا احتوى مصل المريض على أجسام مضادة ضد المستضد المطلوب، فإنها سترتبط به في الخطوة 3 لتكوين معقدات مستضد-جسم مضاد. ستتفاعل بروتينات المتممة مع هذه المعقدات وتُستنفد. وبالتالي، عند إضافة معقدات كريات الدم الحمراء المُخَزَّنة مع الأجسام المضادة في الخطوة 4، لن يتبقى أي متممة في المصل. أما إذا لم تكن هناك أجسام مضادة ضد المستضد المطلوب، فلن تُستنفد المتممة، بل ستتفاعل مع معقدات كريات الدم الحمراء المُخَزَّنة مع الأجسام المضادة المضافة في الخطوة 4، مما يؤدي إلى تحلل كريات الدم الحمراء المُخَزَّنة وتسرب محتوياتها إلى المحلول، وبالتالي تحول لون المحلول إلى اللون الوردي. ^{[ 1 ]}

على الرغم من أن الكشف عن الأجسام المضادة هو الشكل الأكثر شيوعًا للاختبار، إلا أنه من الممكن أيضًا اختبار وجود المستضد. في هذه الحالة، يُضاف إلى مصل المريض أجسام مضادة نوعية لتحفيز تكوين المركبات؛ وتُضاف المتممة وخلايا الدم الحمراء المؤشرة كما في السابق.

يمكن جعل الاختبار كميًا عن طريق تحضير سلسلة من تخفيفات مصل المريض وتحديد أعلى عامل تخفيف يُعطي نتيجة إيجابية لاختبار تثبيت المتممة. يتوافق عامل التخفيف هذا مع العيار .

• اختبارات التثبيت التكميلي في رؤوس الموضوعات الطبية (MeSH) التابعة للمكتبة الوطنية الأمريكية للطب