إبرة التلقيح

إبرة التلقيح هي أداة مخبرية تُستخدم في مجال علم الأحياء الدقيقة لنقل وتلقيح الكائنات الحية الدقيقة . [ 1 ] وهي من أكثر الأدوات المخبرية البيولوجية شيوعًا، ويمكن أن تكون للاستخدام لمرة واحدة أو قابلة لإعادة الاستخدام. [ 1 ] تُصنع إبرة التلقيح القياسية القابلة لإعادة الاستخدام من سلك نيكروم أو بلاتيني مثبت على مقبض معدني. [ 2 ] [ 3 ] أما إبرة التلقيح التي تُستخدم لمرة واحدة، فغالبًا ما تُصنع من راتنج بلاستيكي. قاعدة الإبرة غير حادة، مما ينتج عنه طرف غير مدبب. [ 2 ] [ 3 ]
الاستخدامات
تُستخدم إبر التلقيح بشكل أساسي في علم الأحياء الدقيقة لدراسة البكتيريا والفطريات على أوساط شبه صلبة. وقد تستخدم مجالات التقنية الحيوية ، وعلم الأحياء الخلوي ، وعلم المناعة أيضًا طرق الاستزراع المعتمدة على الإبر. [ 2 ] [ 4 ] [ 5 ]
يركز استخدام إبر التلقيح على تلقيح وعزل مناطق محددة بدقة من المزارع، مع مراعاة الحد الأدنى من التداخل بين مستعمرتين ميكروبيتين متقاربتين. [ 5 ] كما يمكن استخدامها في عملية التلقيح تحت المجهر ذي التكبير المنخفض . [ 6 ]
يمكن إجراء التخطيط على أطباق التخطيط، وتلقيح مزارع الأنابيب المائلة باستخدام ذيل السمكة، وتلقيح مزارع الأنابيب باستخدام إبرة التلقيح. [ 1 ] [ 7 ] تتطلب مزارع الأنابيب تحديدًا إبرة التلقيح، وتُستخدم لدراسة حركة الخلايا، واحتياجات الميكروبات من الأكسجين باستخدام مزارع الثيوغليكولات ، وتسييل البكتيريا بالجيلاتين. [ 2 ] [ 3 ] [ 4 ]
عملية
تعقيم

تُعقّم إبرة التلقيح باستخدام تقنية التعقيم . [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ] [ 7 ] يُستخدم لهب مكشوف من محرقة نفايات، أو موقد بنسن ، أو موقد كحول، لتسخين طرف الإبرة وطولها الذي سيلامس اللقاح (أو البادئ ) . [ 2 ] [ 3 ] ولتسهيل التعامل معها، يُنصح عادةً بمسك الإبرة باليد المسيطرة كما لو كنت تمسك قلم رصاص. تُسخّن الإبرة بزاوية مائلة للأسفل عبر المخروط الداخلي للهب حتى تحمرّ. [ 1 ] تُقلّل هذه الزاوية المائلة للأسفل من كمية الرذاذ الميكروبي المتكوّن. [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ]
يجب تعقيم إبر التلقيح قبل وبعد ملامستها للكائنات الحية الدقيقة لضمان عدم تلوث المزرعة، والأوساط المعقمة، والبيئة المحيطة. [ 1 ]
تحويل
في عملية التلقيح، تُستخدم إبرة التلقيح أولاً لنقل الكائنات الحية الدقيقة من المزرعة إلى الإبرة لاستخدامها في إجراءات التلقيح اللاحقة. تشمل مصادر اللقاح مزارع المرق، والمزارع المائلة، ومزارع الأطباق. [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ] [ 5 ]
- ثقافة التدخين
تُستخدم إبرة التلقيح لنقل الكائنات الدقيقة من مزرعة سائلة، وذلك باستخدام جهاز الخلط الدوامي أولاً لضمان تعليق متجانس للكائنات الدقيقة داخل المرق. [ 1 ] ثم تُطبق تقنية التعقيم على الإبرة. بعد تعقيم الإبرة باللهب، يُزال غطاء المرق يدويًا. يُعقم الطرف المفتوح للمرق باللهب لتقليل خطر التلوث وتكوّن الرذاذ. [ 2 ] [ 3 ]
مع تثبيت موضع الإبرة، يُنقل مرق الاستنبات إلى أعلى الإبرة حتى تغمر طرفها. [ 3 ] أثناء سحب مرق الاستنبات، يجب عدم تحريك الإبرة أو ذراعها لتجنب ارتدادها. [ 3 ] [ 5 ] تنتهي عملية النقل من المرق إلى الإبرة بتعقيم الطرف المفتوح لمرق الاستنبات باللهب وإغلاق الغطاء مع تثبيت ذراع الإبرة.
- ثقافة مائلة
في عملية نقل المزارع المائلة، تُعقّم إبرة التلقيح أولاً بتقنية التعقيم باللهب. ثم يُزال غطاء المزرعة المائلة ويُثبّت باليد التي تحمل الإبرة. يمنع تعقيم الطرف المفتوح للمزرعة المائلة التلوث وتكوّن الرذاذ. [ 2 ] [ 3 ]
تتم عملية النقل بمجرد ملامسة طرف إبرة التلقيح لسطح الآجار في المستنبت المائل. يجب تثبيت إبرة التلقيح أثناء هذه العملية. يُرفع مستنبت الآجار المائل إلى الإبرة لمنع اهتزازها. [ 1 ] [ 3 ] بعد اكتمال النقل من المستنبت المائل إلى الإبرة، تُعالج الفتحة الخارجية للمستنبت باللهب، ثم يُعاد وضع الغطاء.
- ثقافة الأطباق
تُستخدم إبرة التلقيح لنقل الكائنات الحية الدقيقة من طبق الزراعة إلى الإبرة، وذلك بتعقيم الإبرة أولاً لمنع التلوث. ثم يُزال غطاء طبق الزراعة الآغاري للسماح للإبرة بالوصول إلى الكائنات الحية الدقيقة المزروعة على الطبق. ويُعلق الغطاء فوق طبق الزراعة لمنع التلوث من البيئة المحيطة. [ 1 ]
تُبرّد إبرة التلقيح بعد حرقها على منطقة غير ملقّحة من طبق الآجار. [ 1 ] الحرارة الزائدة ستقتل اللقاح عند ملامستها المباشرة لإبرة التلقيح المحروقة. [ 1 ] تُسحب إبرة التلقيح من طبق الآجار بعد الحصول على مستعمرة صغيرة، ثم يُعاد غطاء طبق الآجار.
التلقيح

يتم تلقيح الكائنات الدقيقة مباشرةً بعد نقلها من المزرعة إلى إبرة التلقيح. ويُستخدم اللقاح عادةً في مزارع المرق، والمزارع المائلة، ومزارع الأطباق، ومزارع الطعن. [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ] [ 4 ] [ 5 ] [ 7 ]
- ثقافة التدخين
تُستخدم إبرة التلقيح في تلقيح مزرعة مرق معقمة. يُحافظ على تعقيم المرق بتسخين طرفه المفتوح باللهب. يُنقل المرق إلى الإبرة بحيث تُغمر طرفها مع الحفاظ على وضعها الأصلي. [ 1 ] يُمكن تحريك الإبرة بحركة دائرية خفيفة للمساعدة في نقل الكائن الحي الدقيق من الإبرة إلى المرق المعقم. [ 1 ]
ثم تُزال مزرعة المرق الملقحة من الإبرة. وتُطبق تقنية التعقيم على الطرف المفتوح لمزرعة المرق لمنع التلوث، وتُعقم الإبرة باللهب.
- ثقافة مائلة
تُستخدم إبرة التلقيح لتلقيح مزرعة مائلة بتقنية التلقيح بذيل السمكة. [ 1 ] بعد نقل الكائنات الدقيقة من المزرعة الميكروبية الأصلية إلى إبرة التلقيح، تُفتح المزرعة المائلة المعقمة. ثم يُعقّم طرفها المفتوح باللهب. تُوضع المزرعة المائلة بحيث تتحرك لأعلى الإبرة حتى تلامس طرف إبرة التلقيح سطح قاعدة الوسط المعقم برفق. [ 1 ] [ 2 ] [ 4 ] تُلقّح إبرة التلقيح الآجار المعقم عن طريق تحريك الوسط بحيث يلامس طرف الإبرة سطح الآجار بنمط متعرج. [ 1 ] ثم تُطبّق تقنية التعقيم على إبرة التلقيح المسحوبة.
- ثقافة الأطباق
تُجرى عملية تلقيح طبق الآجار بتقنية التخطيط لإنتاج طبق تخطيطي. [ 1 ] [ 2 ] [ 4 ] بعد رفع الغطاء بحيث يحوم فوق طبق الآجار المعقم، تُمرر إبرة التلقيح عبر الطبق في اتجاهات محددة. [ 1 ] يمكن توليد رذاذ ميكروبي من خلال اصطدام طرف إبرة التلقيح بجوانب طبق الآجار. [ 1 ] [ 2 ] [ 4 ] ثم تُسحب إبرة التلقيح من طبق الآجار الملقح وتُعقم باللهب.
- ثقافة الطعن
تُعدّ إبرة التلقيح أداةً أساسيةً في تلقيح مزرعة الطعن. [ 4 ] [ 7 ] يُزال غطاء مزرعة الطعن المعقم، ويُعرَّض طرفه المفتوح للهب. ثم يُدفع طرف الإبرة وطولها في وسط الطعن، ويُوقف التلقيح عندما يصل طرف الإبرة إلى مسافة 1.25 سم من قاع وسط الطعن. [ 7 ] تُسحب إبرة التلقيح من الوسط بنفس الاتجاه والمسار اللذين دُفعت بهما في وسط الطعن لمنع التذبذب الذي قد يُؤثر على المزرعة. [ 4 ] [ 7 ] تُعقَّم الإبرة بالتعقيم باللهب.
انظر أيضاً
معرض
1
2
3
4
مراجع
- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 طرق النقل والتلقيح المعقمة الشائعة . الصفحات 4-8 .
- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 دوبي، آر سي (2014). عملي للصف الحادي عشر ( الطبعة الثانية). دار نشر إس. تشاند. ISBN 978-81-219-2417-7.
- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 ماهيشواري، د.ك. (2002). مختبر علم الأحياء الدقيقة: القواعد والمتطلبات الأساسية ( الطبعة الثانية). دار نشر إس. تشاند. ص 6.
- 1 2 3 4 5 6 7 8 باريجا، سوبهاش تشاندرا (2012). كتاب علم الأحياء الدقيقة والمناعة ( الطبعة الثانية). إلسيفير. ص 38. ISBN 978-81-312-2810-4.
- ١ ٢ ٣ ٤ ٥ "أخذ العينات والتلقيح" . دليل مختبر بيولوجيا الخلية . دليل مختبر بيولوجيا الخلية ودليل السلامة، كلية هندريكس. مؤرشف من الأصل في ٩ أكتوبر ٢٠١٦. تم الاطلاع عليه في ٢٨ أكتوبر ٢٠١٦ .
- ↑ أورسكوڤ، ج. (17 يناير 1992). "طريقة لعزل البكتيريا في مزرعة نقية من خلايا مفردة وإجراء للتتبع المباشر لنمو البكتيريا على وسط صلب". مجلة علم البكتيريا . 7 (6): 547-548 .
- 1 2 3 4 5 6 مقدمة في علم الأحياء الدقيقة . المجموعة الأمريكية لزراعة الأنماط. 2015. الصفحات 10-11 ، 26، 28، 30-31 .
- معدات علم الأحياء الدقيقة
