مقياس الفلورية

مقياس فلوري مصمم لقياس فلورة الكلوروفيل في النباتات

مقياس الفلورية هو جهاز يُستخدم لقياس خصائص التألق في الطيف المرئي ، وتحديدًا شدة وتوزيع أطوال موجات طيف الانبعاث بعد إثارته بطيف ضوئي معين . [ 1 ] تُستخدم هذه الخصائص لتحديد وجود وكمية جزيئات محددة في وسط ما. تتميز مقاييس الفلورية الحديثة بقدرتها على كشف تركيزات جزيئات الفلورية المنخفضة جدًا، والتي تصل إلى جزء واحد لكل تريليون .

يُعد تحليل التألق أكثر حساسيةً بكثير من التقنيات الأخرى. وتشمل تطبيقاته الكيمياء / الكيمياء الحيوية ، والطب ، والرصد البيئي . فعلى سبيل المثال، يُستخدم لقياس تألق الكلوروفيل لدراسة فسيولوجيا النبات .

المكونات والتصميم

تصميم مبسط لمكونات مقياس الفلورة

تستخدم أجهزة قياس الفلورة عادةً شعاعًا مزدوجًا. يعمل هذان الشعاعان معًا لتقليل التشويش الناتج عن تقلبات الطاقة الإشعاعية. يمر الشعاع العلوي عبر مرشح أو أحادي اللون ثم يمر عبر العينة. أما الشعاع السفلي فيمر عبر مُخفِّف ويُضبط لمحاولة مطابقة طاقة الفلورة المنبعثة من العينة. يتم الكشف عن الضوء المنبعث من فلورة العينة والشعاع السفلي المُخفَّف بواسطة محولات طاقة منفصلة، ​​ثم يُحوَّل إلى إشارة كهربائية يُفسِّرها نظام حاسوبي.

يقع محول الطاقة، المسؤول عن كشف الفلورة الناتجة عن الشعاع العلوي، داخل الجهاز على مسافة من العينة وبزاوية 90 درجة من الشعاع الساقط. صُمم الجهاز بهذه الطريقة لتقليل الضوء المتناثر من الشعاع العلوي الذي قد يصل إلى الكاشف. الزاوية المثلى هي 90 درجة. هناك طريقتان مختلفتان للتحكم في اختيار الضوء الساقط، مما يُنتج أنواعًا مختلفة من أجهزة قياس الفلورة. يُطلق على الجهاز اسم مقياس فلورة إذا استُخدمت مرشحات لاختيار أطوال موجات الضوء. بينما يستخدم مطياف الفلورة عادةً مُوحِّدَي لون، قد تستخدم بعض أجهزة مطياف الفلورة مرشحًا واحدًا ومُوحِّد لون واحد. في هذه الحالة، يعمل مرشح النطاق العريض على تقليل الضوء المتناثر، بما في ذلك الضوء الناتج عن رتب الحيود غير المرغوب فيها لشبكة الحيود في مُوحِّد اللون.

تعتمد مصادر الضوء المستخدمة في أجهزة قياس الفلورة غالبًا على نوع العينة المراد فحصها. ومن أكثر مصادر الضوء شيوعًا في هذه الأجهزة مصباح الزئبق منخفض الضغط ، الذي يوفر أطوال موجية متعددة للإثارة، مما يجعله الأكثر تنوعًا. مع ذلك، لا يُعد هذا المصباح مصدرًا مستمرًا للإشعاع. ويُستخدم مصباح قوس الزينون عند الحاجة إلى مصدر إشعاع مستمر. يوفر كلا المصدرين طيفًا مناسبًا من الأشعة فوق البنفسجية التي تحفز التلألؤ الكيميائي . وهذان مثالان فقط من بين العديد من مصادر الضوء الممكنة. [ 2 ]

تُستخدم عادةً أنابيب زجاجية أو سيليكا لوضع العينة. يجب الحرص على عدم ترك بصمات أصابع أو أي علامات أخرى على السطح الخارجي للأنبوب، لأن ذلك قد يُسبب تألقًا غير مرغوب فيه. تُستخدم أحيانًا مذيبات مُخصصة للتحليل الطيفي، مثل الميثانول، لتنظيف أسطح الأنابيب لتقليل هذه المشاكل.

الاستخدامات

صناعة الألبان

تُستخدم تقنية قياس التألق على نطاق واسع في صناعة الألبان للتحقق من نجاح عملية البسترة . ويتم ذلك باستخدام كاشف يتحلل مائيًا إلى فلوروفور وحمض الفوسفوريك بواسطة إنزيم الفوسفاتاز القلوي الموجود في الحليب. [ 3 ] إذا نجحت عملية البسترة، فسيتعطل إنزيم الفوسفاتاز القلوي تمامًا ولن يظهر أي تألق في العينة. ويعود ذلك إلى أن أي معالجة حرارية تُعطل إنزيم الفوسفاتاز القلوي تقضي على مسببات الأمراض الموجودة في الحليب. [ 4 ] [ 5 ]

تُطلب فحوصات التألق من قبل منتجي الألبان في المملكة المتحدة لإثبات نجاح عملية البسترة، [ 6 ] لذلك تحتوي جميع مصانع الألبان في المملكة المتحدة على معدات قياس التألق.

تكتل البروتين والكشف عن اعتلال الدماغ الإسفنجي المعدي

الثيوفلافينات هي أصباغ تستخدم في تلوين الأنسجة ودراسات الفيزياء الحيوية لتجمع البروتين. [ 7 ] على سبيل المثال، يستخدم الثيوفلافين T في تقنية RT-QuIC للكشف عن البريونات المطوية بشكل خاطئ المسببة لاعتلال الدماغ الإسفنجي المعدي .

علم المحيطات

تمت ملاحظة العوالق النباتية الضوئية من المحيط الهادئ باستخدام مجهر التألق الضوئي (ضوء الإثارة الأزرق).
قم بتصفية عينة الماء من خلاله لعزل العوالق النباتية الموجودة على المرشح قبل قياس فلورية الكلوروفيل على سطح العمل.

تُستخدم أجهزة قياس الفلورة على نطاق واسع في علم المحيطات لقياس تركيزات الكلوروفيل بناءً على تألق الكلوروفيل الناتج عن أصباغ خلايا العوالق النباتية . يُعد تألق الكلوروفيل مؤشرًا شائع الاستخدام لكمية (كتلة) الطحالب المجهرية في الماء. في المختبر، وبعد أخذ عينات من الماء، يستخلص الباحثون الأصباغ من مرشح يحتوي على خلايا العوالق النباتية، ثم يقيسون تألق المستخلص في جهاز قياس فلورة مكتبي في غرفة مظلمة. [ 8 ] لقياس تألق الكلوروفيل مباشرةً "في الموقع" (في الماء)، يستخدم الباحثون أجهزة مصممة لقياس التألق بصريًا (على سبيل المثال، مجسات مزودة بمستشعرات بصرية إلكترونية إضافية). تُصدر هذه المستشعرات ضوءًا أزرق لتحفيز أصباغ العوالق النباتية وجعلها تتألق أو تُصدر ضوءًا أحمر. يقيس المستشعر هذا التألق المُستحث عن طريق قياس الضوء الأحمر كجهد كهربائي، ويحفظ الجهاز البيانات في ملف. يتم تحويل إشارة الجهد الكهربائي للمستشعر إلى تركيز باستخدام منحنى معايرة في المختبر، إما باستخدام أصباغ حمراء اللون مثل الرودامين ، أو معايير مثل الفلورسين ، أو مزارع العوالق النباتية الحية . [ 9 ]

يُقاس تألق الكلوروفيل في المحيطات على متن سفن الأبحاث والقوارب الصغيرة والعوامات والأرصفة البحرية في جميع أنحاء العالم. تُستخدم قياسات التألق لرسم خرائط تركيزات الكلوروفيل لدعم الاستشعار عن بُعد للون المحيط . يمكن لأجهزة قياس التألق الخاصة بمياه المحيطات قياس خصائص تتجاوز الكمية الإجمالية للتألق، مثل المردود الكمي للكيمياء الضوئية ، وتوقيت التألق ، وتألق الخلايا عند تعرضها لكميات متزايدة من الضوء. [ 10 ] تستخدم عمليات الاستزراع المائي، مثل مزارع الأسماك، أجهزة قياس التألق لقياس توافر الغذاء للحيوانات التي تتغذى بالترشيح مثل بلح البحر [ 11 ] ، وللكشف عن بداية ازدهار الطحالب الضارة و/أو " المد الأحمر " (وهما ليسا بالضرورة الشيء نفسه). [ 12 ]

البيولوجيا الجزيئية

يمكن استخدام أجهزة قياس التألق لتحديد تركيز الحمض النووي في العينة. [ 13 ]

أنواع مقياس الفلور

يوجد نوعان أساسيان من أجهزة قياس الفلورة: أجهزة قياس الفلورة بالمرشحات وأجهزة قياس الفلورة الطيفية. ويكمن الفرق بينهما في طريقة اختيار أطوال موجات الضوء الساقط؛ إذ تستخدم أجهزة قياس الفلورة بالمرشحات مرشحات، بينما تستخدم أجهزة قياس الفلورة الطيفية محززات أحادية اللون. غالبًا ما تُشترى أجهزة قياس الفلورة بالمرشحات أو تُصنع بتكلفة أقل، لكنها أقل حساسية ودقة من أجهزة قياس الفلورة الطيفية. كما أن أجهزة قياس الفلورة بالمرشحات لا تعمل إلا عند أطوال موجات المرشحات المتاحة، في حين أن أجهزة قياس الفلورة أحادية اللون قابلة للضبط بحرية ضمن نطاق واسع نسبيًا. ويكمن العيب المحتمل لأجهزة قياس الفلورة أحادية اللون في هذه الخاصية نفسها، لأنها عرضة للخطأ في المعايرة أو الضبط، بينما يكون طول موجة المرشحات ثابتًا عند تصنيعها.

انظر أيضاً

مراجع

  1. "قياس الطيف الفلوري" . موسوعة علوم الحياة . ماكميلان للنشر المحدودة. 2002. مؤرشف من الأصل في 14 مايو 2014. تم الاطلاع عليه في 9 سبتمبر 2017 .
  2. ساينتيفيكا (2025). "اختيار أفضل مصدر ضوئي لتجربة التألق الضوئي" . ساينتيفيكا .
  3. لانغريدج، إي دبليو. تحديد نشاط الفوسفاتاز . شركة إدارة الجودة المحدودة . تم الاسترجاع في 20-12-2013 .
  4. كاي، هـ. (1935). "بعض نتائج تطبيق اختبار بسيط لكفاءة البسترة". مجلة لانسيت . 225 (5835): 1516-1518 . doi : 10.1016/S0140-6736(01)12532-8 .
  5. هوي، دبليو إيه؛ نيف، إف كيه (1937). "اختبار الفوسفاتاز للبسترة الفعالة". مجلة لانسيت . 230 (5949): 595. doi : 10.1016/S0140-6736(00)83378-4 .
  6. BS EN ISO 11816-1:2013
  7. بيانكالانا م، كويدي س (يوليو 2010). "الآلية الجزيئية لارتباط ثيوفلافين-تي بألياف الأميلويد" . بيوشيميكا إت بيوفيزيكا أكتا (BBA) - البروتينات والبروتيوميات . 1804 (7): 1405-1412 . doi : 10.1016/j.bbapap.2010.04.001 . PMC 2880406. PMID 20399286 .  
  8. هولم-هانسن، أوزموند؛ لورينزن، كارل جيه؛ هولمز، روبرت دبليو؛ ستريكلاند، جون دي إتش (1965). "التقدير الفلوري للكلوروفيل". مجلة ICES للعلوم البحرية . 30 (1): 3-15 . doi : 10.1093/icesjms/30.1.3 .
  9. إيرب، آلان (2011). "مراجعة المعايير الفلورية لمعايرة أجهزة قياس الفلورة في الموقع: توصيات مطبقة في برامج الرصد الساحلي والمحيطي". أوبتكس إكسبرس . 19 (27): 26768-26782 . Bibcode : 2011OExpr..1926768E . doi : 10.1364/OE.19.026768 . hdl : 10453/18163 . PMID 22274260 . 
  10. فالكوفسكي، بول ج.؛ لين، هانزي؛ غوربونوف، مكسيم ي. (14 أغسطس 2017). "ما الذي يحد من كفاءة تحويل الطاقة الضوئية في الطبيعة؟ دروس مستفادة من المحيطات" . المعاملات الفلسفية للجمعية الملكية ب: العلوم البيولوجية . 372 (1730) 20160376. الجمعية الملكية. doi : 10.1098/rstb.2016.0376 . ISSN 0962-8436 . PMC 5566876. PMID 28808095 .   
  11. أوجيلفي، شون سي؛ روس، أليكس إتش؛ شيل، ديفيد آر (2000). "كتلة العوالق النباتية المرتبطة بمزارع بلح البحر في خليج بياتريكس، نيوزيلندا". الاستزراع المائي . 181 ( 1-2 ): 71-80 . Bibcode : 2000Aquac.181...71O . doi : 10.1016/S0044-8486(99)00219-7 .
  12. أندرسون، دونالد م.؛ أندرسون، بير؛ بريسيلج، في. مونيكا؛ كولين، جون ج.؛ رينسل، جيه إي جاك (2001). استراتيجيات الرصد والإدارة لتكاثر الطحالب الضارة في المياه الساحلية، أبيك #201-MR-01.1 (ملف PDF) . باريس: برنامج آسيا والمحيط الهادئ الاقتصادي، سنغافورة، والسلسلة الفنية رقم 59 للجنة الأوقيانوغرافية الحكومية الدولية.
  13. ميسزاروس، إيفا (2021). "تحديد تركيز ونقاء الأحماض النووية" . إنتغرا للعلوم الحيوية .