اختبار النوى الصغيرة

اختبار النوى الدقيقة هو اختبار يُستخدم في الفحص السمّي للمركبات التي يُحتمل أن تكون سامة جينياً . يُعتبر هذا الاختبار الآن من أنجح وأكثر الاختبارات موثوقيةً للكشف عن المواد المسرطنة السامة جينياً ، أي المواد المسرطنة التي تُسبب تلفاً جينياً، وهو مُوصى به في إرشادات منظمة التعاون الاقتصادي والتنمية لاختبار المواد الكيميائية. [ 1 ] يوجد نوعان رئيسيان من هذا الاختبار، أحدهما يُجرى على الكائنات الحية والآخر على المختبر .

يستخدم الاختبار الحيوي عادةً نخاع عظم الفأر أو دمه المحيطي . عندما تتطور خلية أرومة حمراء من نخاع العظم إلى خلية حمراء متعددة الألوان ، تُطرد النواة الرئيسية؛ وقد تبقى أي نواة صغيرة متكونة في السيتوبلازم الخالي من النواة. يسهل رؤية النوى الصغيرة في هذه الخلايا لافتقارها إلى نواة رئيسية. تشير زيادة تواتر الخلايا الحمراء متعددة الألوان ذات النوى الصغيرة في الحيوانات المعالجة إلى تلف كروموسومي مُستحث. [ 2 ]

النوى الصغيرة ( ب، ج ) والتشوهات النووية ( أ، د ) في كريات الدم الحمراء المحيطية لطيور البطريق Pygoscelis papua.

استُخدمت النوى الدقيقة لأول مرة لتحديد كمية التلف الكروموسومي بواسطة إتش جيه إيفانز وآخرون، في أطراف جذور الفول العريض ( Vicia faba) . لاحقًا، طُوّر هذا الاختبار الحيوي بشكل مستقل بواسطة دبليو شميد وجيه إيه هيدل وزملائهم. طُوّر اختبار الدم المحيطي للفئران بواسطة جيه تي ماكجريجور، وتم تكييفه الآن للقياس بواسطة قياس التدفق الخلوي بواسطة إيه توميتسكو وزملائه. كان أول استخدام للنوى الدقيقة في الخلايا المستنبتة بواسطة جيه إيه هيدل وزملائه في الخلايا الليمفاوية البشرية . وقد حُسّن الاختبار بواسطة إم فينيش وزملائه لاستخدامه في الخلايا الليمفاوية وخلايا أخرى في الخلايا المستنبتة .

استُخدم تلوين جيمسا البسيط في الأصل لتقييم النوى الدقيقة. لاحقًا، طُوّرت طريقة النوى الدقيقة المُثبّطة بالانقسام الخلوي (CBMN)، حيث استُخدم السيتوكروم ب ، وهو مُثبّط لتكوين المغزل، لمنع انقسام السيتوبلازم بعد انقسام النواة. تُستخدم طريقة CBMN لتقييم فقدان الكروموسومات، وانكسارها، وما يرتبط بها من موت الخلايا المبرمج والنخر الناجم عن مُطفرات مختلفة . [ 3 ]

النواة الصغيرة هي النواة الشاذة (الثالثة) التي تتشكل خلال الطور الانفصالي من الانقسام المتساوي أو الاختزالي . النوى الصغيرة (التي يعني اسمها "النواة الصغيرة") هي أجسام سيتوبلازمية تحتوي على جزء من كروموسوم لا مركزي أو كروموسوم كامل لم ينتقل إلى القطبين المتقابلين خلال الطور الانفصالي. يؤدي تشكلها إلى افتقار الخلية البنت لجزء من الكروموسوم أو كله. عادةً ما تُكوّن هذه الشظايا الكروموسومية أو الكروموسومات الكاملة أغشية نووية وتتشكل كنوى صغيرة كنواة ثالثة. بعد انقسام السيتوبلازم، ينتهي المطاف بإحدى الخليتين البنتين بنواة واحدة، بينما ينتهي المطاف بالأخرى بنواة كبيرة وأخرى صغيرة، أي نوى صغيرة. هناك احتمال لتشكل أكثر من نواة صغيرة واحدة عند حدوث تلف جيني كبير. يُستخدم اختبار النواة الصغيرة كأداة لتقييم السمية الجينية لمختلف المواد الكيميائية. وهو أسهل في إجرائه من اختبار الانحراف الكروموسومي من حيث الإجراءات والتقييم. باستخدام التهجين الموضعي الفلوري (FISH) مع المجسات الموجهة إلى منطقة السنترومير ، يمكن تحديد ما إذا كان الكروموسوم بأكمله مفقودًا، أو جزء منه فقط.

انظر أيضاً

المراجع والملاحظات