بقعة بابانيكولاو

صبغة بابانيكولاو (وتُعرف أيضًا بصبغة بابانيكولاو أو صبغة باب ) هي تقنية تلوين خلوي متعددة الألوان، طوّرها جورج بابانيكولاو عام 1942. ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 3 ]} تُعدّ صبغة بابانيكولاو من أكثر الصبغات استخدامًا في علم الخلايا ، ^{[ 1 ]} حيث تُستخدم لمساعدة أخصائيي علم الأمراض في التشخيص. وبالرغم من شهرتها في الكشف عن سرطان عنق الرحم في اختبار باب أو مسحة باب، إلا أنها تُستخدم أيضًا لتلوين عينات غير نسائية من إفرازات الجسم المختلفة ، ومن خزعات الإبر الصغيرة للأعضاء والأنسجة. ^{[ 4 ] [ 5 ]} وقد نشر بابانيكولاو ثلاث تركيبات لهذه الصبغة في أعوام 1942 و1954 و1960. ^{[ 2 ]}

يُستخدم تلوين بابانيكولاو لتمييز الخلايا في مسحات الأنسجة (حيث تُفرد العينات أو تُدهن على شريحة زجاجية للمجهر) ^{[ 6 ]} من إفرازات الجسم المختلفة وخزعات الإبرة ؛ وقد تشمل العينات مسحات أمراض النساء ( مسحات بابانيكولاو )، والبلغم ، والمسحات بالفرشاة، والغسولات، والبول ، والسائل النخاعي الشوكي ، ^{[ 4 ]} والسائل البطني، والسائل الجنبي ، والسائل الزلالي ، والسائل المنوي ، ^{[ 7 ]} وعينات الشفط بالإبرة الدقيقة ، وعينات لمس الورم، أو مواد أخرى تحتوي على خلايا سائبة. ^{[ 8 ] [ 4 ] [ 9 ]}

لا يوجد توحيد كامل لصبغة بابانيكولاو، وهي متوفرة في تركيبات متعددة تختلف في الأصباغ المستخدمة ونسبها وتوقيت العملية. ^{[ 2 ] [ 1 ]} عادةً ما ترتبط صبغة بابانيكولاو بعلم أمراض الخلايا حيث تُفحص الخلايا غير الملتصقة، ولكن تم تعديل الصبغة أيضًا واستخدامها على شرائح الأنسجة. ^{[ 9 ]}

تتضمن الطريقة الكلاسيكية لصبغة بابانيكولاو خمسة أصباغ في ثلاثة محاليل. ^{[ 2 ] [ 11 ] [ 12 ]}

• يحتوي محلول التلوين الأول على الهيماتوكسيلين الذي يصبغ أنوية الخلايا . ^{[ 10 ] [ 2 ] [ 12 ]} استخدم بابانيكولاو هيماتوكسيلين هاريس في جميع تركيبات الصبغة الثلاث التي نشرها. ^{[ 2 ]}
• يحتوي محلول التلوين الثاني (المُسمى OG-6) على صبغة أورانج جي في 95% من الإيثانول مع كمية قليلة من حمض الفوسفوتنجستيك . ^{[ 12 ] [ 2 ]} في OG-6، يرمز OG إلى صبغة أورانج جي، ويشير الرقم 6 إلى تركيز حمض الفوسفوتنجستيك المُضاف؛ وهناك أنواع أخرى مثل OG-5 وOG-8. ^{[ 2 ]}
• يتكون محلول التلوين الثالث من ثلاثة أصباغ: إيوسين Y ، وأخضر فاتح مصفر SF ، وبني بسمارك Y، في 95% من الإيثانول مع كمية قليلة من حمض الفوسفوتنجستيك وكربونات الليثيوم . ^{[ 12 ] [ 2 ]} يُرمز لهذا المحلول بالرمز EA، متبوعًا برقم يدل على نسبة الأصباغ، وتشمل التركيبات الأخرى EA-36 وEA-50 وEA-65. ^{[ 2 ]}

تُذاب الأصباغ المضادة في كحول إيثيلي بنسبة 95%، مما يمنع تلطيخ الخلايا بشكل مفرط، الأمر الذي قد يُخفي تفاصيل النواة وحدود الخلايا، خاصةً عند تداخل الخلايا على الشريحة. ^{[ 3 ] [ 2 ]} يُضاف حمض الفوسفوتنجستيك لضبط درجة حموضة الأصباغ المضادة، مما يُساعد على تحسين كثافة اللون. ^{[ 2 ]} يحتوي مُلوّن EA المضاد على بني بسمارك وحمض الفوسفوتنجستيك، وعند امتزاجهما، يترسبان من المحلول، مما يُقلل من عمر الخليط. ^{[ 2 ]}

ينبغي أن ينتج عن التلوين خلايا شفافة إلى حد كبير، بحيث يمكن تفسير حتى العينات السميكة ذات الخلايا المتداخلة. ^{[ 2 ]} يجب أن تكون أنوية الخلايا واضحة، زرقاء إلى سوداء اللون ^{[ 12 ] [ 13 ]} ، وأن تكون أنماط الكروماتين في النواة محددة جيدًا. يتلون سيتوبلازم الخلية باللون الأزرق المخضر، بينما يتلون الكيراتين باللون البرتقالي. ^{[ 13 ] [ 5 ]}

يصبغ الإيوسين Y الخلايا الحرشفية الظهارية السطحية ، والنويات ، والأهداب ، وخلايا الدم الحمراء . ^{[ 2 ]} أما صبغة Light Green SF المصفرة فتُضفي لونًا أزرقًا على سيتوبلازم الخلايا النشطة مثل الخلايا العمودية، والخلايا الحرشفية شبه القاعدية، والخلايا الحرشفية المتوسطة. ^{[ 14 ]} وتكون الخلايا السطحية برتقالية إلى وردية، بينما تكون الخلايا المتوسطة وشبه القاعدية خضراء فيروزية إلى زرقاء. ^{[ 12 ]}

يُعدّ تلوين بابانيكولاو فائق السرعة بديلاً لعينات الشفط بالإبرة الدقيقة، وقد طُوّر لتحقيق وضوح بصري مماثل في وقت أقصر بكثير. تختلف هذه العملية في إعادة ترطيب المسحة المجففة بالهواء بمحلول ملحي ، واستخدام مُثبّت الفورمالديهايد بنسبة 4% في الإيثانول بنسبة 65% ، واستخدام هيماتوكسيلين ريتشارد-آلان -2 وصبغة سيتو-ستين ، مما ينتج عنه عملية تستغرق 90 ثانية تُعطي ألوانًا شفافة متعددة الألوان. ^{[ 15 ]}

• بابانيكولاو، جورج ن. "إجراء جديد لتلوين مسحات المهبل." مجلة ساينس 95.2469 (1942): 438-439.

• بابانيكولاو، جورج ن. "طريقة مسحة الخلايا لتشخيص السرطان." المجلة الأمريكية للصحة العامة وصحة الأمة 38.2 (1948): 202-205.

• بابانيكولاو، جورج ن. "أطلس علم الخلايا التقشيري". نُشر لصالح صندوق الكومنولث بواسطة مطبعة جامعة هارفارد. (1954).

• بابانيكولاو، جورج ن. "مذكرة حول التلوين". أطلس علم الخلايا التقشيري. كامبريدج، ماساتشوستس: مطبعة جامعة هارفارد، الملحق الثاني (1960): 12.

• Diff-Quik — طريقة تلوين رومانوفسكي شائعة الاستخدام في علم الخلايا ^{[ 16 ]}