إنزيم ربط الحمض النووي

📅 آخر تحديث: ١ أغسطس ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ١ أغسطس ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 2 صور
الموسوعة الحرة

إنزيم ربط الحمض النووي (DNA ligase) هو نوع من الإنزيمات التي تُسهّل ربط خيوط الحمض النووي معًا عن طريق تحفيز تكوين رابطة فوسفاتية ثنائية الإستر . يلعب هذا الإنزيم دورًا في إصلاح انقطاعات السلسلة المفردة في الحمض النووي المزدوج في الكائنات الحية، ولكن بعض أنواعه (مثل DNA ligase IV ) قد تُصلح على وجه التحديد انقطاعات السلسلة المزدوجة (أي انقطاع في كلا سلسلتي الحمض النووي المتكاملتين ). يتم إصلاح انقطاعات السلسلة المفردة بواسطة DNA ligase باستخدام السلسلة المتكاملة من الحلزون المزدوج كقالب، [ 1 ] حيث يقوم DNA ligase بتكوين الرابطة الفوسفاتية ثنائية الإستر النهائية لإصلاح الحمض النووي بشكل كامل.

يُستخدم إنزيم ربط الحمض النووي (DNA ligase) في كلٍ من إصلاح الحمض النووي وتضاعفه (انظر: إنزيمات الربط في الثدييات ). بالإضافة إلى ذلك، يُستخدم إنزيم ربط الحمض النووي على نطاق واسع في مختبرات البيولوجيا الجزيئية لتجارب الحمض النووي المؤتلف (انظر: تطبيقات البحث ). ويُستخدم إنزيم ربط الحمض النووي النقي في استنساخ الجينات لربط جزيئات الحمض النووي معًا لتكوين الحمض النووي المؤتلف .

الآلية الإنزيمية

توضح الصورة كيف يقوم الليغاز (الشكل البيضاوي الأصفر) بتحفيز ربط سلسلتي الحمض النووي. يربط الليغاز هاتين السلسلتين لتكوين سلسلة أطول من الحمض النووي عن طريق "لصقهما" معًا.

تتمثل آلية عمل إنزيم ربط الحمض النووي (DNA ligase) في تكوين رابطتين فوسفاتيتين تساهميتين بين نهايتي الهيدروكسيل 3' لنيوكليوتيد واحد ("المستقبل")، ونهاية الفوسفات 5' لنيوكليوتيد آخر ("المانح"). ويُستهلك جزيئان من الأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) لكل رابطة فوسفاتية ثنائية الإستر تتكون. [ 2 ] ويُعد الأدينوسين أحادي الفوسفات (AMP) ضروريًا لتفاعل الربط، الذي يتم على أربع خطوات:

  1. إعادة تنظيم موقع النشاط مثل الشقوق في أجزاء الحمض النووي أو شظايا أوكازاكي وما إلى ذلك.
  2. عند إضافة الأدينيل (إضافة AMP) إلى بقايا الليسين في المركز النشط للإنزيم، يتم إطلاق البيروفوسفات ؛
  3. نقل AMP إلى الفوسفات 5' لما يسمى بالمانح، وتكوين رابطة بيروفوسفات؛
  4. تكوين رابطة فوسفودايستر بين مجموعة الفوسفات 5' للمانح ومجموعة الهيدروكسيل 3' للمستقبل. [ 3 ]
مثال توضيحي لكيفية عمل الليغاز (مع نهايات لاصقة )

سيعمل الليغاز أيضًا مع النهايات غير الحادة ، على الرغم من أن ذلك يتطلب تركيزات أعلى من الإنزيم وظروف تفاعل مختلفة.

الأنواع

الإشريكية القولونية

يُشفّر جين lig إنزيم ربط الحمض النووي في بكتيريا الإشريكية القولونية . يستخدم هذا الإنزيم ، كما هو الحال في معظم بدائيات النوى، الطاقة المُكتسبة من شطر نيكوتيناميد أدينين ثنائي النوكليوتيد (NAD) لتكوين الرابطة الفوسفودايسترية. [ 4 ] ولا يقوم بربط الحمض النووي ذي النهايات غير المتداخلة إلا في ظروف الازدحام الجزيئي بوجود بولي إيثيلين جلايكول ، كما أنه لا يستطيع ربط الحمض النووي الريبوزي (RNA) بالحمض النووي بكفاءة. [ 5 ]

يمكن تعزيز نشاط إنزيم ربط الحمض النووي (DNA ligase) في بكتيريا الإشريكية القولونية (E. coli) بواسطة إنزيم بوليميراز الحمض النووي ( DNA polymerase) عند التركيزات المناسبة. ولا يحدث هذا التعزيز إلا عندما تكون تركيزات إنزيم بوليميراز الحمض النووي 1 (Pol I) أقل بكثير من تركيزات قطع الحمض النووي المراد ربطها. أما عندما تكون تركيزات إنزيم بوليميراز الحمض النووي 1 (Pol I) أعلى، فإن ذلك يؤثر سلبًا على نشاط إنزيم ربط الحمض النووي في بكتيريا الإشريكية القولونية [ 6 ].

T4

إنزيم ربط الحمض النووي من العاثية T4 (وهي عاثية تصيب بكتيريا الإشريكية القولونية ). يُعد إنزيم ربط T4 الأكثر شيوعًا في الأبحاث المخبرية. [ 7 ] يستطيع هذا الإنزيم ربط نهايات الحمض النووي، سواءً كانت متماسكة أو غير متماسكة ، بالإضافة إلى قليل النوكليوتيدات، والحمض النووي الريبي، والهجائن بين الحمض النووي الريبي والحمض النووي، ولكنه لا يستطيع ربط الأحماض النووية أحادية السلسلة. كما أنه قادر على ربط الحمض النووي ذي النهايات غير المتماسكة بكفاءة أعلى بكثير من إنزيم ربط الحمض النووي الخاص بالإشريكية القولونية . على عكس إنزيم ربط الحمض النووي الخاص بالإشريكية القولونية ، لا يستطيع إنزيم ربط الحمض النووي T4 استخدام NAD، ويتطلب وجود ATP كعامل مساعد. وقد أُجريت بعض التعديلات الهندسية لتحسين نشاط إنزيم ربط الحمض النووي T4 في المختبر . على سبيل المثال، اختبرت إحدى الطرق الناجحة إنزيم T4 DNA ligase المدمج مع عدة بروتينات بديلة لربط الحمض النووي، ووجدت أن التركيبات التي تحتوي إما على p50 أو NF-kB كشركاء اندماج كانت أكثر نشاطًا بنسبة تزيد عن 160% في ربط النهايات غير المتداخلة لأغراض الاستنساخ مقارنةً بإنزيم T4 DNA ligase من النوع البري. [ 8 ] يستخدم التفاعل النموذجي لإدخال قطعة في ناقل بلازميد ما بين 0.01 (للنهايات المتداخلة) إلى 1 (للنهايات غير المتداخلة) من إنزيم الربط. درجة حرارة الحضانة المثلى لإنزيم T4 DNA ligase هي 37  درجة مئوية، وهي درجة الحرارة التي تكون عندها إنزيمات T4 في ذروة نشاطها. مع ذلك، من الشائع إجراء تفاعلات الربط عند 16  درجة مئوية، وهي درجة حرارة مناسبة لربط القواعد في النهايات المتداخلة، حيث يكون إنزيم الربط نشطًا. [ 9 ]

تتمتع طفرات إنزيم ربط البكتيريا T4 بحساسية متزايدة لكل من الأشعة فوق البنفسجية [ 10 ] [ 11 ] وعامل الألكلة ميثيل ميثان سلفونات [ 12 ] مما يشير إلى أن إنزيم ربط الحمض النووي يستخدم في إصلاح أضرار الحمض النووي التي تسببها هذه العوامل.

الثدييات

يوجد في الثدييات أربعة أنواع محددة من الليغاز.

  1. إنزيم ربط الحمض النووي 1 : يربط الحمض النووي الوليد للخيط المتأخر بعد أن يقوم إنزيم الريبونوكلياز H بإزالة بادئ الحمض النووي الريبي من شظايا أوكازاكي .
  2. إنزيم ربط الحمض النووي 3 : يرتبط ببروتين إصلاح الحمض النووي XRCC1 للمساعدة في ربط الحمض النووي أثناء عملية إصلاح استئصال النيوكليوتيدات وتكوين الشظايا المؤتلفة. من بين جميع إنزيمات ربط الحمض النووي المعروفة في الثدييات، وُجد أن إنزيم الربط 3 هو الوحيد الموجود في الميتوكوندريا.
  3. إنزيم ربط الحمض النووي 4 : يرتبط بـ XRCC4 . يحفز هذا الإنزيم الخطوة الأخيرة في مسار إصلاح انقطاع الحمض النووي المزدوج عن طريق الربط غير المتجانس للنهايات . كما أنه ضروري لإعادة تركيب V(D)J ، وهي العملية التي تُنتج تنوعًا في مواقع مستقبلات الغلوبولين المناعي والخلايا التائية أثناء تطور الجهاز المناعي .
  • إنزيم ربط الحمض النووي 2: هو ناتج ثانوي لعملية التنقية ناتج عن التحلل البروتيني لإنزيم ربط الحمض النووي 3. في البداية، تم التعرف عليه على أنه إنزيم ربط حمض نووي آخر، وهو السبب في التسمية غير المألوفة لإنزيمات ربط الحمض النووي. [ 13 ]

يستخدم إنزيم ربط الحمض النووي من حقيقيات النوى وبعض الميكروبات الأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) بدلاً من NAD. [ 4 ]

مقاوم للحرارة

يُستخلص هذا الإنزيم من بكتيريا محبة للحرارة، وهو مستقر ونشط في درجات حرارة أعلى بكثير من إنزيمات ربط الحمض النووي التقليدية. يبلغ عمر النصف له 48 ساعة عند 65  درجة مئوية، وأكثر من  ساعة واحدة عند 95  درجة مئوية. وقد ثبت أن إنزيم Ampligase DNA Ligase نشط لمدة 500 دورة حرارية على الأقل (94  درجة مئوية/80  درجة مئوية) أو 16 ساعة من التدوير. <sup>10  </sup> يُتيح هذا الثبات الحراري الاستثنائي دقة عالية للغاية في التهجين وخصوصية الربط. <sup> 14 </sup>

قياس النشاط

هناك ثلاث وحدات مختلفة على الأقل تستخدم لقياس نشاط إنزيم ربط الحمض النووي: [ 15 ]

  • وحدة فايس - كمية الليغاز التي تحفز تبادل 1 نانومول من 32 P من بيروفوسفات غير عضوي إلى ATP في 20 دقيقة عند 37 درجة مئوية. هذه هي الوحدة الأكثر استخدامًا.
  • وحدة مودريتش-ليمان - نادرًا ما يتم استخدامها، ويتم تعريف الوحدة الواحدة على أنها كمية الإنزيم المطلوبة لتحويل 100 نانومول من d(AT) n إلى شكل مقاوم للإكسونوكلياز-III في 30 دقيقة في ظل الظروف القياسية.
  • يستخدم العديد من الموردين التجاريين لليغازات وحدة قياس اعتباطية تعتمد على قدرة الليغاز على ربط النهايات المتماسكة. غالبًا ما تكون هذه الوحدات ذاتية أكثر منها كمية، وتفتقر إلى الدقة.

تطبيقات البحث

أصبحت إنزيمات ربط الحمض النووي أدوات لا غنى عنها في أبحاث البيولوجيا الجزيئية الحديثة لإنتاج تسلسلات الحمض النووي المؤتلف . على سبيل المثال، تُستخدم إنزيمات ربط الحمض النووي مع إنزيمات التقييد لإدخال أجزاء من الحمض النووي، وغالبًا ما تكون جينات ، في البلازميدات .

يُعدّ التحكم في درجة الحرارة المثلى جانبًا حيويًا لإجراء تجارب إعادة التركيب الفعّالة التي تتضمن ربط أجزاء الحمض النووي ذات النهايات المتماسكة. تستخدم معظم التجارب إنزيم T4 DNA Ligase (المُستخلص من العاثية T4 )، والذي يكون في ذروة نشاطه عند 37  درجة مئوية. [ 16 ] مع ذلك، ولتحقيق كفاءة ربط مثلى مع الأجزاء ذات النهايات المتماسكة ("النهايات اللزجة")، يجب موازنة درجة حرارة الإنزيم المثلى مع درجة انصهار النهايات اللزجة (Tm ) المراد ربطها. [ 17 ] لن يكون الاقتران المتماثل للنهايات اللزجة مستقرًا لأن ارتفاع درجة الحرارة يُعطّل الروابط الهيدروجينية . يكون تفاعل الربط أكثر كفاءة عندما تكون النهايات اللزجة مُلتحمة بالفعل بشكل مستقر، وبالتالي فإن تعطيل عملية الالتحام سيؤدي إلى انخفاض كفاءة الربط. كلما كان الجزء المتدلي أقصر ، انخفضت درجة انصهاره (Tm ) .

بما أن شظايا الحمض النووي ذات النهايات غير المتداخلة لا تحتوي على نهايات متماسكة للالتحام، فإن درجة حرارة الانصهار لا تُؤخذ في الاعتبار ضمن النطاق الحراري الطبيعي لتفاعل الربط. العامل المحدد في ربط النهايات غير المتداخلة ليس نشاط الليغاز، بل عدد عمليات المحاذاة بين نهايات شظايا الحمض النووي. لذا، فإن درجة حرارة الربط الأكثر فعالية للحمض النووي ذي النهايات غير المتداخلة هي تلك التي تسمح بحدوث أكبر عدد من عمليات المحاذاة. تُجرى معظم عمليات ربط النهايات غير المتداخلة عند درجة حرارة تتراوح بين 14 و25  درجة مئوية طوال الليل. كما أن غياب النهايات الملتصقة بشكل مستقر يعني انخفاض كفاءة الربط، مما يستلزم استخدام تركيز أعلى من الليغاز. [ 17 ]

يُمكن ملاحظة استخدام جديد لإنزيم ربط الحمض النووي في مجال الكيمياء النانوية، وتحديدًا في تقنية طي الحمض النووي.  وقد أثبتت مبادئ التجميع الذاتي القائمة على الحمض النووي جدواها في تنظيم الأجسام النانوية، مثل الجزيئات الحيوية، والآلات النانوية، والمكونات النانوإلكترونية والضوئية. ويتطلب تجميع هذه البنية النانوية إنشاء شبكة معقدة من جزيئات الحمض النووي. ورغم إمكانية التجميع الذاتي للحمض النووي دون أي مساعدة خارجية باستخدام ركائز مختلفة، مثل توفير سطح غير نشط لرقائق الألومنيوم، إلا أن إنزيم ربط الحمض النووي يُمكنه توفير المساعدة الإنزيمية اللازمة لتكوين بنية شبكية من الحمض النووي من أطرافه المتدلية. [ 18 ]

تاريخ

تم تنقية أول إنزيم ربط الحمض النووي (DNA ligase) وتوصيفه عام 1967 في مختبرات جيليرت، ليمان، ريتشاردسون، وهورويتز. [ 19 ] وقد قام فايس وريتشاردسون بتنقيته وتوصيفه لأول مرة باستخدام عملية فصل كروماتوغرافي من ست خطوات، تبدأ بإزالة حطام الخلايا وإضافة الستربتومايسين، تليها عدة غسلات باستخدام عمود السليلوز ثنائي إيثيل أمينو إيثيل (DEAE)، ثم فصل نهائي باستخدام فوسفوسليلوز. احتوى المستخلص النهائي على 10% من النشاط المسجل مبدئيًا في وسط الإشريكية القولونية ؛ وخلال هذه العملية، اكتُشف أن الأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) وأيونات المغنيسيوم (Mg++) ضروريان لتحسين التفاعل. وقد اكتُشفت إنزيمات ربط الحمض النووي (DNA ligase) الشائعة المتوفرة تجاريًا في الأصل في العاثية T4 ، والإشريكية القولونية ، وبكتيريا أخرى . [ 20 ]  

الاضطرابات

ارتبطت العيوب الجينية في إنزيمات ربط الحمض النووي البشري بمتلازمات سريرية تتسم بنقص المناعة، والحساسية للإشعاع، وتشوهات النمو، [ 19 ] متلازمة LIG4 (متلازمة الربط الرابع) مرض نادر مرتبط بطفرات في إنزيم ربط الحمض النووي 4، ويتداخل مع آليات إصلاح انقطاعات الحمض النووي المزدوج. تسبب متلازمة الربط الرابع نقص المناعة لدى الأفراد، وترتبط عادةً بصغر الرأس ونقص تنسج نخاع العظم. [ 21 ] فيما يلي قائمة بالأمراض الشائعة الناتجة عن نقص أو خلل في وظيفة إنزيم ربط الحمض النووي. 

جفاف الجلد المصطبغ

جفاف الجلد المصطبغ ، المعروف اختصاراً بـ XP، هو حالة وراثية تتميز بحساسية مفرطة للأشعة فوق البنفسجية المنبعثة من ضوء الشمس. وتؤثر هذه الحالة في الغالب على العينين ومناطق الجلد المعرضة للشمس. كما يعاني بعض المصابين من مشاكل في الجهاز العصبي. [ 22 ]

ترنح توسع الشعيرات الدموية

تُسبب الطفرات في جين  ATM مرض ترنح توسع الشعيرات الدموية . يُوفر جين ATM تعليمات لصنع بروتين يُساعد في تنظيم انقسام الخلايا ويُشارك في إصلاح الحمض النووي. يلعب هذا البروتين دورًا هامًا في النمو الطبيعي ونشاط العديد من أجهزة الجسم، بما في ذلك الجهاز العصبي والجهاز المناعي. يُساعد بروتين ATM الخلايا في التعرّف على خيوط الحمض النووي التالفة أو المكسورة، ويُنسق عملية إصلاح الحمض النووي عن طريق تنشيط الإنزيمات التي تُصلح الخيوط المكسورة. يُساعد الإصلاح الفعال لخيوط الحمض النووي التالفة في الحفاظ على استقرار المعلومات الوراثية للخلية. عادةً ما يُعاني الأطفال المصابون من صعوبة في المشي، ومشاكل في التوازن وتناسق حركة اليد، وحركات ارتعاشية لا إرادية (الرقص الكوري)، وارتعاشات عضلية (الرمع العضلي)، واضطرابات في وظائف الأعصاب (الاعتلال العصبي). عادةً ما تُؤدي مشاكل الحركة إلى حاجة المصابين إلى كرسي متحرك في سن المراهقة. كما يُعاني المصابون بهذا الاضطراب من تداخل في الكلام وصعوبة في تحريك أعينهم للنظر من جانب إلى آخر (خلل التناسق الحركي العيني). [ 23 ]       

فقر الدم فانكوني

فقر الدم فانكوني (FA) هو اضطراب دموي وراثي نادر يؤدي إلى فشل نخاع العظم. يمنع هذا المرض نخاع العظم من إنتاج ما يكفي من خلايا الدم الجديدة لكي يعمل الجسم بشكل طبيعي. كما يمكن أن يتسبب في إنتاج نخاع العظم للعديد من خلايا الدم المعيبة، مما قد يؤدي إلى مشاكل صحية خطيرة، مثل سرطان الدم (اللوكيميا) . [ 24 ]

متلازمة بلوم

تُسبب متلازمة بلوم حساسية الجلد لأشعة الشمس، وعادةً ما تظهر بقعة حمراء على شكل فراشة على الأنف والخدين. كما قد يظهر طفح جلدي في مناطق أخرى معرضة للشمس، مثل ظهر اليدين والساعدين. غالبًا ما تظهر تجمعات صغيرة من الأوعية الدموية المتضخمة (توسع الشعيرات الدموية) في الطفح الجلدي، وقد يظهر توسع الشعيرات الدموية أيضًا في العينين. تشمل السمات الجلدية الأخرى بقعًا من الجلد أفتح أو أغمق من المناطق المحيطة بها (نقص التصبغ أو فرط التصبغ على التوالي). تظهر هذه البقع في مناطق من الجلد غير معرضة للشمس، ولا يرتبط ظهورها بالطفح الجلدي.

كهدف دوائي

في دراسات حديثة، استُخدم إنزيم ربط الحمض النووي البشري الأول (DNA ligase I) في تصميم الأدوية بمساعدة الحاسوب لتحديد مثبطات إنزيمات ربط الحمض النووي كعوامل علاجية محتملة لعلاج السرطان. [ 25 ] ونظرًا لأن النمو الخلوي المفرط يُعد سمة مميزة لتطور السرطان، فإن العلاج الكيميائي الموجه الذي يُعطل وظيفة إنزيم ربط الحمض النووي يُمكن أن يُعيق تطور أشكال السرطان المساعدة. علاوة على ذلك، فقد ثبت أنه يُمكن تقسيم إنزيمات ربط الحمض النووي بشكل عام إلى فئتين، وهما: إنزيمات ربط الحمض النووي المعتمدة على ATP وإنزيمات ربط الحمض النووي المعتمدة على NAD + . وقد أظهرت الأبحاث السابقة أنه على الرغم من اكتشاف إنزيمات ربط الحمض النووي المعتمدة على NAD + في بيئات خلوية أو فيروسية متفرقة خارج نطاق البكتيريا، إلا أنه لا توجد أي حالة وُجد فيها إنزيم ربط الحمض النووي المعتمد على NAD + في كائن حقيقي النواة . إن وجود إنزيمات ربط الحمض النووي المعتمدة على NAD+ حصريًا في الكائنات غير حقيقية النواة، وخصوصيتها الفريدة للركيزة، وبنيتها النطاقية المميزة مقارنةً بإنزيمات ربط الحمض النووي البشرية المعتمدة على ATP، تجعلها أهدافًا مثالية لتطوير أدوية جديدة مضادة للبكتيريا. [ 19 ]

انظر أيضاً

مراجع

  1. ↑ باسكال جيه إم، أوبراين بي جيه، تومكينسون إيه إي، إلينبرغر تي (نوفمبر 2004). "إنزيم ربط الحمض النووي البشري الأول يُحيط تمامًا بالحمض النووي المقطوع ويفكه جزئيًا". مجلة نيتشر . 432 (7016): 473-478 . Bibcode : 2004Natur.432..473P . doi : 10.1038/nature03082 . PMID 15565146. S2CID 3105417 .  
  2. ↑ شارما، بابيتا (2023-08-03). "إنزيم ربط الحمض النووي - التعريف، التركيب، الأنواع، الوظائف" . microbenotes.com . تم الاطلاع عليه بتاريخ 2026-01-07 .
  3. ↑ ليمان ، آي آر (نوفمبر 1974). "إنزيم ربط الحمض النووي: التركيب، والآلية، والوظيفة". مجلة ساينس . 186 (4166): 790-797 . Bibcode : 1974Sci...186..790L . doi : 10.1126/science.186.4166.790 . PMID 4377758. S2CID 86549159 .  
  4. 1 2 فوستر جيه بي، سلونكزوسكي جيه (2010). علم الأحياء الدقيقة: علم متطور ( الطبعة الثانية). نيويورك: دبليو دبليو نورتون وشركاه. ISBN  978-0-393-93447-2.
  5. ↑ "الإنزيمات المستخدمة في البيولوجيا الجزيئية: دليل مفيد" . PubMed Central . تم الاطلاع عليه بتاريخ 17-06-2026 .
  6. ↑ يانغ واي، ليكاتا في جيه (فبراير 2018). "تحفز بوليميرازات الحمض النووي من النوع الأول (Pol I) عملية ربط نهايات الحمض النووي بواسطة ليغاز الحمض النووي لبكتيريا الإشريكية القولونية" . مجلة الاتصالات البحثية في الكيمياء الحيوية والفيزياء الحيوية . 497 (1): 13-18 . Bibcode : 2018BBRC..497...13Y . doi : 10.1016/j.bbrc.2018.01.165 . PMID 29409896 . 
  7. ↑ "الرابطات" (ملف PDF) . دليل موارد الإنزيمات . شركة بروميج. الصفحات 8-14 . 
  8. ↑ ويلسون، آر إتش، مورتون، إس كيه، ديدريك، إتش، جيرث، إم إل، بول، إتش إيه، جيربر، آي، باتيل، إيه، إلينغتون، إيه دي، هونيك-سميث، إس بي، باتريك، دبليو إم (يوليو 2013). "إنزيمات ربط الحمض النووي المُهندسة ذات النشاط المُحسَّن في المختبر" . هندسة البروتين، التصميم والاختيار . 26 (7): 471-478 . doi : 10.1093/protein/gzt024 . PMID 23754529 . 
  9. ↑ تابور، ستانلي (1989). "إنزيمات ربط الحمض النووي" . البروتوكولات الحالية في البيولوجيا الجزيئية . 8 (1): 3.14.1–3.14.4. doi : 10.1002/0471142727.mb0314s08 . ISSN 1934-3647 . 
  10. ↑ بالدي، م. و. (1968). "الإصلاح وإعادة التركيب في العاثية T4. الجزء الثاني: الجينات المؤثرة على حساسية الأشعة فوق البنفسجية". ندوات كولد سبرينغ هاربور حول البيولوجيا الكمية . 33 : 333-338 . doi : 10.1101/sqb.1968.033.01.038 . PMID 4891973 . 
  11. ↑ بالدي، م. و. (فبراير 1970). "حساسية الأشعة فوق البنفسجية لبعض الطفرات الحساسة للحرارة في المراحل المبكرة من عاثية T4". علم الفيروسات . 40 (2): 272-287 . doi : 10.1016/0042-6822(70)90403-4 . PMID 4909413 . 
  12. ↑ بالدي، إم دبليو، ستروم، بي، بيرنشتاين، إتش (مارس 1971). "إصلاح الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين لفيروس العاثية T4 المؤلكل بواسطة آلية تتضمن إنزيم ربط عديد النوكليوتيدات" . مجلة علم الفيروسات . 7 (3): 407-408 . doi : 10.1128/JVI.7.3.407-408.1971 . PMC 356131. ​​PMID 4927528 .  
  13. ↑ تومكينسون، آلان إي؛ سالماير، أناهيتا (5 سبتمبر 2013). "بنية ووظيفة إنزيمات ربط الحمض النووي المشفرة بواسطة جين LIG3 في الثدييات" . جين . 531 ( 2): 150-157 . doi : 10.1016/j.gene.2013.08.061 . PMC 3881560. PMID 24013086 .  
  14. ↑ "أمبليغاز - إنزيم ربط الحمض النووي المقاوم للحرارة" . www.epibio.com . مؤرشف من الأصل بتاريخ 19-06-2017 . تم الاطلاع عليه بتاريخ 15-05-2017 .
  15. ↑ راسل، د. و.، وسامبروك، ج. (2001). "الفصل 1: البلازميدات وفائدتها في الاستنساخ الجزيئي". الاستنساخ الجزيئي: دليل المختبر . المجلد 1 ( الطبعة الثالثة). كولد سبرينغ هاربور، نيويورك: مختبر كولد سبرينغ هاربور. الصفحات 1-159 . ISBN    978-0-87969-577-4.
  16. ↑ بانيكس إف، لوكوت جي (1993). مقدمة في تقنيات الاستنساخ الجزيئي . تشيتشستر: جون وايلي وأولاده. ص 156. ISBN  978-0-471-18849-0.
  17. 1 2 تابور س (مايو 2001). "إنزيمات ربط الحمض النووي". البروتوكولات الحالية في البيولوجيا الجزيئية . الفصل 3: الوحدة 3.14. doi : 10.1002/0471142727.mb0314s08 . ISBN 978-0-471-14272-0PMID 18265223 . S2CID 23944826 .​  
  18. ↑ بهانجاديو إم إم، ناياك إيه كيه، سوبودهي يو (2017). "التجميع الذاتي للحمض النووي بمساعدة السطح: استراتيجية خالية من الإنزيمات لتكوين شبكة الحمض النووي المتفرعة". مجلة الاتصالات البحثية البيوكيميائية والبيوفيزيائية . 485 (2): 492-498 . Bibcode : 2017BBRC..485..492B . doi : 10.1016/j.bbrc.2017.02.024 . PMID 28189681 . 
  19. 1 2 3 شومان ، س. (يونيو 2009). "إنزيمات ربط الحمض النووي: التقدم والآفاق" . مجلة الكيمياء البيولوجية . 284 (26): 17365-17369 . doi : 10.1074/jbc.R900017200 . PMC 2719376. PMID 19329793 .  
  20. ↑ فايس ب، ريتشاردسون سي سي (أبريل 1967). "الكسر والوصل الإنزيمي للحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين، الجزء الأول: إصلاح كسور السلسلة المفردة في الحمض النووي بواسطة نظام إنزيمي من الإشريكية القولونية المصابة بالعاثية T4" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 57 (4): 1021-1028 . Bibcode : 1967PNAS...57.1021W . doi : 10.1073 / pnas.57.4.1021 . PMC 224649. PMID 5340583 .  
  21. ↑ ألتمان تي، جينيري إيه آر (أكتوبر 2016). "متلازمة إنزيم ربط الحمض النووي الرابع: مراجعة" . مجلة أورفانيت للأمراض النادرة . 11 (1) 137. doi : 10.1186/s13023-016-0520-1 . PMC 5055698. PMID 27717373 .  
  22. ↑ "جفاف الجلد المصطبغ" . مرجع علم الوراثة المنزلي . تم الاطلاع عليه بتاريخ 15-05-2017 .
  23. ↑ "ترنح توسع الشعيرات الدموية" . مرجع علم الوراثة المنزلي . تم الاسترجاع في 15-05-2017 .
  24. ↑ "ما هو فقر الدم فانكوني؟" . المعهد الوطني للقلب والرئة والدم، المعاهد الوطنية للصحة. مؤرشف من الأصل في 3 سبتمبر 2011. تم الاطلاع عليه في 15 مايو 2017 .
  25. ↑ تومكينسون إيه إي، هاوز تي آر، ويست إن إي ( يونيو 2013). "إنزيمات ربط الحمض النووي كأهداف علاجية" . أبحاث السرطان الانتقالية . 2 (3). PMC 3819426. PMID 24224145 .