التروية الآلية

📅 آخر تحديث: ٢٥ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٥ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 1 صور
الموسوعة الحرة

التروية الآلية (MP) هي تقنية تروية اصطناعية تُستخدم غالبًا لحفظ الأعضاء وتسهيل عمليات زراعتها . تعمل هذه التقنية عن طريق ضخ محلول متخصص باستمرار عبر الأعضاء المتبرع بها ، محاكيةً بذلك تدفق الدم الطبيعي في الجسم، مع التحكم الفعال في درجة الحرارة ومستويات الأكسجين والتركيب الكيميائي والإجهاد الميكانيكي داخل العضو. من خلال الحفاظ على حيوية العضو خارج الجسم لفترات طويلة، تعالج التروية الآلية تحديات حاسمة في زراعة الأعضاء، مثل محدودية فترات الحفظ [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ] ، وتتيح نافذة زمنية لتقييم العضو المزروع وإصلاحه [ 4 ] .

تتخذ عملية الإرواء الآلي أشكالاً متنوعة، ويمكن تصنيفها وفقًا لدرجة حرارة سائل الإرواء: بارد (4  درجات مئوية) ودافئ (37  درجة مئوية). [ 5 ] وقد طُبقت هذه العملية في زراعة الكلى ، [ 6 ] وزراعة الكبد ، [ 7 ] وزراعة الرئة . [ 8 ] وهي تُعد بديلاً عن التخزين البارد الثابت .

البحث والتطوير

في عام 2022، سُجِّل رقم قياسي في حفظ أعضاء الزرع البشرية لفترة طويلة باستخدام التروية الآلية للكبد لمدة ثلاثة أيام، بدلاً من المدة المعتادة التي تقل عن 12 ساعة. ومن الممكن تمديد هذه المدة إلى عشرة أيام، مع تجنب تلف الخلايا بشكل كبير، وذلك باستخدام طرق الحفظ في درجات حرارة منخفضة. [ 9 ] [ 10 ] وتشمل الطرق البديلة استخدام مذيبات جديدة واقية من التجمد . [ 11 ] [ 12 ]

يجري تطوير نظام جديد لتروية الأعضاء قادر على استعادة وظائف العديد من الأعضاء الحيوية (في الخنازير) على المستوى الخلوي بعد ساعة واحدة من الوفاة (حيث عانى الجسم خلالها من نقص تروية دافئ مطوّل )، [ 13 ] [ 14 ] ، بالإضافة إلى نظام/طريقة مماثلة لإحياء أدمغة الخنازير بعد ساعات من الوفاة. [ 13 ] [ 15 ] يمكن استخدام نظام استعادة الخلايا هذا لحفظ الأعضاء المتبرع بها أو لعلاجات الإنعاش في حالات الطوارئ الطبية. [ 13 ]

تاريخ تقنيات حفظ الكلى

رسم تخطيطي لعملية التروية الإقليمية للأعضاء البطنية في درجة حرارة الجسم الطبيعية استعداداً لعملية الزرع

كان عمل ألكسيس كاريل في تطوير طرق المفاغرة الوعائية خطوة تمهيدية أساسية لتطوير تقنيات حفظ الكلى وزراعتها . [ 16 ] ثم وصف كاريل أولى عمليات زراعة الكلى التي أُجريت على الكلاب عام 1902؛ ووصف أولمان [ 17 ] تجارب مماثلة بشكل مستقل في العام نفسه. في هذه التجارب، زُرعت الكلى دون أي محاولة لحفظها.

كانت الخطوة الحاسمة في جعل تخزين الكلى في المختبر ممكنة، هي إثبات فورمان عام 1943 [ 18 ] للتأثير العكسي لانخفاض درجة حرارة الجسم على العمليات الأيضية للأنسجة المعزولة. قبل ذلك، كانت الكلى تُخزن في درجات حرارة الجسم الطبيعية باستخدام الدم أو محاليل الدم المخففة [ 19 ] [ 20 ]، ولكن لم تُجرَ أي عمليات إعادة زرع ناجحة. أظهر فورمان أن شرائح من قشرة كلى الفئران ودماغها صمدت أمام التبريد إلى 0.2  درجة مئوية لمدة ساعة واحدة، حيث كان استهلاكها للأكسجين في حده الأدنى. وعندما أُعيد تسخين الشرائح إلى 37  درجة مئوية، عاد استهلاكها للأكسجين إلى مستواه الطبيعي.

أثبت أوينز في عام 1955 [ 21 ] التأثير المفيد لانخفاض درجة حرارة الجسم على الكلى السليمة المصابة بنقص التروية، حيث بيّن أنه عند تبريد الكلاب إلى 23-26 درجة مئوية، وسدّ الشريان الأورطي الصدري لديها لمدة ساعتين، لم تُظهر كلى الكلاب أي ضرر واضح عند إعادة تدفئتها. وقد أكد بوغاردوس [ 22 ] هذا التأثير الوقائي لانخفاض درجة حرارة الجسم على تلف الكلى الناتج عن نقص التروية ، حيث أظهر تأثيرًا وقائيًا لتبريد سطح كلى الكلاب التي تم تثبيت سويقاتها الكلوية في مكانها لمدة ساعتين. كما أثبت موير [ 23 ] إمكانية تطبيق هذه التجارب على الكلاب على البشر، من خلال إظهار التأثير نفسه على وظائف كلى الكلاب والبشر خلال فترات نقص التروية الناتجة عن انخفاض درجة الحرارة نفسها. 

لم يُثبت حتى عام 1958 أن كلى الكلاب السليمة تنجو من نقص التروية بشكل أفضل عند تبريدها إلى درجات حرارة منخفضة. أظهر ستويبر [ 24 ] أن الكلى تنجو من تثبيت السويقة الكلوية في مكانها لمدة 6 ساعات إذا تم تبريدها إلى 0-5  درجات مئوية بوضعها في غلاف تبريد، وأظهر شلورب [ 25 ] أن تقنية مماثلة بتبريد كلى الكلاب المعالجة بالهيبارين إلى 2-4  درجات مئوية توفر حماية لمدة 8 ساعات، ولكن ليس 12 ساعة. حاول شلورب أيضًا تخزين الكلى المبردة في المختبر وزرعها ذاتيًا، ونجح في إنقاذ كلب واحد لفترة طويلة بعد تخزين الكلية لمدة 4 ساعات، ثم إعادة زرعها واستئصال الكلية المقابلة فورًا . كما نجح في إنقاذ كلب آخر، بعد تخزين الكلية لمدة 24 ساعة واستئصال الكلية المقابلة لاحقًا، والذي أصيب بجلطة شريانية متأخرة في الكلية.

تم تحسين طرق التبريد السطحي هذه بإدخال تقنيات يتم فيها غسل الجهاز الوعائي للكلى بسائل بارد قبل التخزين. وقد أدى ذلك إلى زيادة سرعة تبريد الكلية وإزالة خلايا الدم الحمراء من الجهاز الوعائي. استخدم كايزر [ 26 ] هذه التقنية لتحقيق تخزين ناجح لكلية كلب لمدة 7 ساعات في المختبر، بعد غسل الكلية عند درجة حرارة 5 مئوية  بمزيج من الدكستران والدم المخفف قبل التخزين. في عام 1960، أكد لابشينسكي [ 27 ] إمكانية فترات تخزين مماثلة، عندما أبلغ عن نجاة ثمانية كلاب بعد تخزين كليتيها عند درجة حرارة 2-4  مئوية لمدة 28 ساعة، تلاها زرع ذاتي للكلية واستئصال الكلية المقابلة لاحقًا. على الرغم من أن لابشينسكي لم يذكر تفاصيل في بحثه، فقد أفاد همفريز [ 28 ] أن هذه التجارب تضمنت تبريد الكليتين لمدة ساعة واحدة بدم بارد، ثم حفظهما في درجة حرارة تتراوح بين 2 و4  درجات مئوية، يليه إعادة تدفئة الكليتين لمدة ساعة واحدة بدم دافئ عند إعادة زرعهما. وقد تم تأجيل استئصال الكلية المقابلة لمدة شهرين.

طوّر همفريز [ 28 ] تقنية التخزين هذه عن طريق تروية الكلية باستمرار طوال فترة التخزين. استخدم بلازما أو مصل مخففًا كمحلول تروية، وأشار إلى ضرورة انخفاض ضغط محلول التروية لمنع تورم الكلية، لكنه أقرّ بأن القيم المثلى لمتغيرات مثل درجة حرارة محلول التروية، وضغط الأكسجين الجزئي (Po2 ) ، ومعدل التدفق، لا تزال غير معروفة. وكانت أفضل نتائجه، حتى ذلك الحين، هي نجاة كلبين بعد تخزين كليتيهما لمدة 24 ساعة عند درجة حرارة تتراوح بين 4 و10  درجات مئوية، تلاها زرع ذاتي للكلية، ثم استئصال الكلية المقابلة بعد بضعة أسابيع.

شكك كالني [ 29 ] في ضرورة استخدام أساليب الإرواء المستمر، مُثبتًا إمكانية الحفاظ على الكلى لمدة 12 ساعة بنجاح باستخدام تقنيات أبسط بكثير. فقد تمكن كالني من إبقاء إحدى كليتيه حية حتى بعد استئصال الكلية المقابلة بالتزامن مع عملية إعادة الزرع. واقتصرت عملية كالني على حقن كليتي الكلب بالهيبارين ثم حفظهما في محلول مثلج عند  درجة حرارة 4 مئوية. ورغم أن إحدى التجارب أثبتت إمكانية الحفاظ على الكلى لمدة 17 ساعة عند تأخير استئصال الكلية، إلا أنه لم يُحقق أي نجاح في حفظها لمدة 24 ساعة.

حقق همفريز [ 30 ] تقدماً ملحوظاً عام 1964، عندما عدّل محلول التروية المستخدم في نظام التروية المستمر الأصلي، وتمكن من الحفاظ على حياة كلب بعد تخزينه لمدة 24 ساعة، حتى مع إجراء استئصال فوري للكلية المقابلة في نفس وقت إعادة الزرع. في هذه التجارب، استُخدم دم ذاتي مخفف بنسبة 50% بمحلول Tis-U-Sol عند  درجة حرارة 10 مئوية كمحلول تروية. كان ضغط محلول التروية 40  مم زئبق، ودرجة حموضته 7.11-7.35 (عند 37  مئوية). استُخدم غشاء رئوي للأكسجة لتجنب تلف الدم.

في محاولة لتحسين هذه النتائج، درس ماناكس [ 31 ] تأثير الأكسجين عالي الضغط ، ووجد أنه من الممكن تخزين كلى الكلاب بنجاح لمدة 48 ساعة عند درجة حرارة 2  مئوية دون استخدام التروية المستمرة، وذلك عند غسل الكلى بمحلول ديكستران /تيس-يو-سول قبل التخزين عند ضغط 7.9 ضغط جوي، وفي حال تأجيل استئصال الكلية المقابلة لمدة تتراوح بين أسبوعين وأربعة أسابيع بعد إعادة الزرع. افترض ماناكس أن الأكسجين عالي الضغط قد يعمل إما عن طريق تثبيط عملية الأيض أو عن طريق المساعدة في انتشار الأكسجين إلى خلايا الكلى، لكنه لم يذكر أي تجارب ضابطة لتحديد ما إذا كانت جوانب أخرى من نموذجه أكثر أهمية من الأكسجين عالي الضغط.

حقق بيلزر تحسناً ملحوظاً في مدة التخزين عام 1967 [ 32 ] عندما أبلغ عن نجاحه في تخزين الكلى لمدة 72 ساعة بعد العودة إلى استخدام التروية المستمرة باستخدام محلول تروية قائم على بلازما الكلاب عند درجة حرارة 8-12  درجة مئوية. ووجد بيلزر [ 33 ] أن العامل الحاسم في السماح بالتروية السلسة لمدة 72 ساعة هو الترسيب بالتبريد للبلازما المستخدمة في محلول التروية لتقليل كمية البروتينات الدهنية غير المستقرة التي تترسب من المحلول وتسد تدريجياً الجهاز الوعائي للكلى. كما استُخدم جهاز أكسجة غشائي في النظام في محاولة أخرى لمنع تمسخ البروتينات الدهنية ، حيث لم تتم إزالة سوى 35% منها بالترسيب بالتبريد. تكون محلول التروية من لتر واحد من بلازما الكلاب، و4 ملي مكافئ من كبريتات المغنيسيوم ، و250 مل من الدكستروز ، و80 وحدة من الأنسولين ، و200,000 وحدة من البنسلين، و100  ملغ من الهيدروكورتيزون . إلى جانب ترسيبه بالتبريد ، تم ترشيح محلول التروية مسبقًا عبر مرشح بمسام 0.22 ميكرون قبل الاستخدام مباشرةً. استخدم بيلزر محلول تروية بدرجة حموضة تتراوح بين 7.4 و7.5، وضغط جزئي للأكسجين (Po2 ) يتراوح بين 150 و190  ملم زئبق، وضغط انقباضي يتراوح بين 50 و80  ملم زئبق، وذلك في جهاز يُنتج تدفقًا نابضًا لمحلول التروية. باستخدام هذا النظام، نجح بيلزر في إنقاذ حياة 6 كلاب بعد حفظ كليتيها لمدة 72 ساعة ثم إعادة زرعها، مع إجراء استئصال فوري للكلية المقابلة أثناء عمليات إعادة الزرع.

استوحى بيلزر استخدام الهيدروكورتيزون كمادة مساعدة في الحفظ من دراسة لوتكه على شرائح كلى الكلاب [ 34 ]، حيث حسّن الهيدروكورتيزون قدرة الشرائح على إفراز الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات والأكسجين بعد 30 ساعة من التخزين عند درجة حرارة 2-4  درجة مئوية. وأشار لوتكه إلى أن الهيدروكورتيزون قد يعمل كمثبت لغشاء الليزوزوم في هذه التجارب. أما المكونات الأخرى لنموذج بيلزر فقد تم التوصل إليها تجريبياً. استُخدم الأنسولين والمغنيسيوم جزئياً في محاولة لتحفيز السبات الاصطناعي ، حيث وجد سوومالاينن [ 35 ] أن هذا النظام فعال في تحفيز السبات لدى الحيوانات التي تدخل في سبات طبيعي. كما تم توفير المغنيسيوم كمثبط أيضي بعد أن أثبت كامياما [ 36 ] فعاليته في حفظ قلب الكلاب. وكان من بين المبررات الأخرى لاستخدام المغنيسيوم الحاجة إلى استبدال الكالسيوم المرتبط بالسترات في البلازما .

أثبت بيلزر [ 37 ] إمكانية تطبيق تجاربه على الكلاب في حفظ الكلى البشرية، وذلك عندما عرض تجاربه في زراعة الكلى البشرية باستخدام نفس تقنيات الحفظ التي استخدمها مع كلى الكلاب. وقد تمكن من حفظ الكلى لمدة تصل إلى 50 ساعة، ولم يحتج سوى 8% من المرضى إلى غسيل الكلى بعد العملية، شريطة أن يكون المتبرع قد خضع لتحضير جيد.

في عام 1968، أفاد همفريز [ 38 ] بنجاة كلب واحد من أصل 14 كلباً بعد تخزين كليتيها لمدة 5 أيام في جهاز إرواء عند درجة حرارة 10  درجات مئوية، باستخدام وسط بلازما مخفف يحتوي على أحماض دهنية إضافية. ومع ذلك، كان من الضروري في هذه التجارب إجراء استئصال الكلية المقابلة بعد 4 أسابيع من إعادة الزرع لتحقيق النجاح، مما يشير إلى أن الكليتين قد تعرضتا لإصابة بالغة أثناء التخزين.

في عام ١٩٦٩، أبلغ كولينز [ ٣٩ ] عن تحسن في النتائج التي يمكن تحقيقها باستخدام طرق بسيطة غير إرواءية لحفظ الكلى في درجات حرارة منخفضة. وقد استند في تقنيته إلى ملاحظة كيلر [ ٤٠ ] بأن فقدان الإلكتروليتات من الكلية أثناء التخزين يمكن منعه باستخدام سائل تخزين يحتوي على كاتيونات بكميات تقارب تلك الموجودة عادةً في الخلايا. في نموذج كولينز، تم ترطيب الكلاب جيدًا قبل استئصال الكلية، كما تم إعطاؤها المانيتول لتحفيز إدرار البول . تم حقن الفينوكسي بنزامين، وهو موسع للأوعية الدموية ومثبت لإنزيمات الليزوزومات [ ٤١ ] [ ٤٢ ] ، في الشريان الكلوي قبل استئصال الكلية. تم غمر الكليتين في محلول ملحي مباشرة بعد استئصالهما، وتم ترويتهما عبر الشريان الكلوي بـ ١٠٠-١٥٠ مل من محلول إلكتروليتي بارد من ارتفاع ١٠٠  سم. بقيت الكليتان في محلول ملحي مثلج طوال فترة التخزين المتبقية. وقد حاكى المحلول المستخدم في عمليات التروية الباردة الناجحة هذه تركيبة الإلكتروليتات في السوائل داخل الخلايا، لاحتوائه على كميات كبيرة من البوتاسيوم والمغنيسيوم. كما احتوى المحلول على الجلوكوز والهيبارين والبروكايين والفينوكسي بنزامين. وكانت درجة حموضة المحلول 7.0 عند 25  درجة مئوية. تمكن كولينز من تحقيق تخزين ناجح لست كلى لمدة 24 ساعة، ولثلاث كلى لمدة 30 ساعة، مع استمرار عمل الكلى مباشرة بعد إعادة الزرع، على الرغم من استئصال الكلية المقابلة مباشرة. وأكد كولينز على النتائج الضعيفة التي تم الحصول عليها باستخدام محلول رينجر للغسل، حيث وجد نتائج مماثلة مع هذه الطريقة عند مقارنتها بالكلى التي عولجت بالتبريد السطحي فقط. وأفاد ليو [ 43 ] أن محلول كولينز يمكن أن يحقق تخزينًا ناجحًا لمدة 48 ساعة عند تعديله بإضافة الأحماض الأمينية والفيتامينات. ومع ذلك، لم يجرِ ليو أي تجارب ضابطة لإثبات أهمية هذه التعديلات.

واجه باحثون آخرون صعوبة في تكرار تجارب بيلزر الناجحة لتخزين الكلى بالتروية لمدة 72 ساعة. تمكن وودز [ 44 ] من تخزين 3 كلى من أصل 6 بنجاح لمدة 48 ساعة باستخدام إضافات بيلزر مع البلازما المترسبة بالتبريد كمحلول تروية في نظام تروية منخفض الحرارة، لكنه لم يتمكن من تمديد فترة التخزين إلى 72 ساعة كما فعل بيلزر. مع ذلك، نجح وودز [ 45 ] لاحقًا في تخزين كلى الكلاب لمدة 3 و7 أيام. عدّل وودز محلول تروية بيلزر بإضافة 250  ملغ من ميثيل بريدنيزولون ، ورفع محتوى كبريتات المغنيسيوم إلى 16.2 ملي مكافئ، والأنسولين إلى 320 وحدة. أنتجت ست من أصل 6 كلى وظائف حيوية عند إعادة زرعها بعد 72 ساعة من التخزين، على الرغم من استئصال الكلية المقابلة مباشرةً. أظهرت إحدى الكليتين وظيفة حيوية بعد 96 ساعة من التخزين، وأخرى بعد 120 ساعة، وثالثة بعد 168 ساعة. كان ضغط سائل التروية 60  ملم زئبق، ومعدل ضخ 70 نبضة في الدقيقة، وحُفظت درجة حموضة سائل التروية تلقائيًا عند 7.4 بواسطة جهاز معايرة ثاني أكسيد الكربون . أكد وودز على أهمية ترطيب الحيوانات المانحة والمتلقية. ولاحظ وودز أن هشاشة الأوعية الدموية تُشكل مشكلة عند التخزين لفترات أطول من 48 ساعة، وذلك في غياب ميثيل بريدنيزولون.

أدخل جونسون [ 46 ] وكلايس [ 47 ] تبسيطًا كبيرًا على تقنيات تخزين التروية تحت التبريد، وذلك من خلال تقديم محلول تروية قائم على الألبومين. وقد أغنى هذا المحلول عن الحاجة إلى تصنيع البلازما المُرَسَّبة بالتبريد والمُرشَّحة بتقنية ميليبور، والتي كان يستخدمها بيلزر. كان تحضير هذا المحلول شاقًا ويستغرق وقتًا طويلًا، فضلًا عن وجود خطر محتمل من فيروس التهاب الكبد والأجسام المضادة السامة للخلايا. وبفضل خلو المحلول من البروتينات الدهنية، أمكن الاستغناء عن جهاز الأكسجة الغشائي في دائرة التروية، إذ لم تعد هناك حاجة لتجنب التماس بين المحلول والهواء لمنع ترسب البروتينات الدهنية. وقد استخدم الباحثان نفس الإضافات التي أوصى بها بيلزر.

تم تحضير المحلول الذي استخدمه جونسون في مختبر منتجات الدم (إلستري، إنجلترا) عن طريق استخلاص الفيبرينوجين والغلوبولينات غاما الحساسة للحرارة من البلازما، للحصول على محلول جزء بروتين البلازما (PPF). حُضِن المحلول عند درجة حرارة 60  درجة مئوية لمدة 10 ساعات لتعطيل عامل التهاب الكبد المصلي. [ 48 ] وكانت النتيجة محلول ألبومين بشري بتركيز 45 غ/لتر يحتوي على كميات ضئيلة من الغلوبولينات غاما وبيتا، وكان مستقرًا بين  درجتي حرارة 0 و30  درجة مئوية لمدة 5 سنوات. [ 49 ] احتوى جزء بروتين البلازما (PPF) على 2.2  ملي مول/لتر من الأحماض الدهنية الحرة. [ 50 ]

ركزت تجارب جونسون [ 46 ] بشكل أساسي على حفظ الكلى المتضررة نتيجة التعرض المطول للحرارة. مع ذلك، أظهر جونسون، في مجموعة ضابطة من كلى الكلاب غير المتضررة من الحرارة، سهولة حفظها لمدة 24 ساعة باستخدام محلول التروية PPF، ووصف في موضع آخر [ 51 ] حالة كلب نجا بعد 72 ساعة من التروية وإعادة الزرع مع استئصال الكلية المقابلة فورًا. في حالة الكلى المتضررة من الحرارة، حققت تروية PPF نتائج أفضل من طريقة كولينز، حيث نجا جميع الكلاب الستة بعد 40 دقيقة من الإصابة بالحرارة وحفظها لمدة 24 ساعة، تلاها إعادة زرع الكلى واستئصال الكلية المقابلة فورًا. أُضيف البوتاسيوم والمغنيسيوم والأنسولين والجلوكوز والهيدروكورتيزون والأمبيسيلين إلى محلول PPF لتوفير مصدر للطاقة ومنع تسرب البوتاسيوم من داخل الخلايا. كانت درجة حرارة سائل التروية 6  درجات مئوية، والضغط 40-80  ملم زئبق، وضغط الأكسجين 200-400 ملم  زئبق. وتم الحفاظ على الرقم الهيدروجيني بين 7.2 و 7.4.

استخدم كلايس [ 47 ] محلول تروية قائم على الألبومين البشري (كابي: السويد) مخفف بمحلول ملحي إلى تركيز 45 غ/لتر. نجح كلايس في حفظ 4 من أصل 5 كلى كلاب لمدة 96 ساعة، حيث عملت الكلى مباشرة بعد إعادة زرعها على الرغم من استئصال الكلية المقابلة مباشرة. كما قارن كلايس هذا المحلول ببلازما بيلزر المُرَسَّبة بالتبريد في مجموعة ضابطة، ولم يجد فرقًا ذا دلالة إحصائية بين وظائف الكلى المُعاد زرعها في المجموعتين.

كانت مجموعة ليو وهمفريز [ 52 ] في عام 1973 المجموعة الوحيدة الأخرى، إلى جانب مجموعة وودز، التي أبلغت عن نجاح تخزين الكلى لمدة سبعة أيام. وقد نجا ثلاثة من أصل سبعة كلاب لديهم، بعد تخزين كليتيها لمدة سبعة أيام، تلاها إعادة زرعها واستئصال الكلية المقابلة مباشرةً. وبلغت ذروة الكرياتينين لدى أفضل كلب لديهم بعد إعادة الزرع 50  ملغم/لتر (0.44  مليمول/لتر). استخدم ليو كلابًا مُرطبة جيدًا تخضع لإدرار البول بالمانيتول، وخزن الكلى عند  درجة حرارة 9-10 درجات  مئوية باستخدام محلول ترشيح مُستخلص من سائل ترشيح الكلى البشري. وتم تجزئة سائل الترشيح بشكل إضافي باستخدام بوليمر عالي الذوبان في الماء (بلورونيك F-38)، وأُضيف إليه أسيتيل تريبتوفانات الصوديوم وكابريلات الصوديوم كمثبتات للسماح بالبسترة. أُضيف إلى هذا المحلول الألبومين البشري، والهيبارين، والمانيتول، والجلوكوز، وكبريتات المغنيسيوم، وكلوريد البوتاسيوم، والأنسولين، وميثيل بريدنيزولون، والكاربنیسيلين، والماء لضبط الأسمولية إلى 300-310 ملي أسمول /كجم. تم استبدال محلول التروية بعد 3.5 أيام من التخزين. كان ضغط محلول التروية 60 مم زئبق أو أقل، بمعدل ضخ 60 ضخة في الدقيقة. تراوحت درجة حموضة محلول التروية بين 7.12 و7.32 (عند 37 درجة مئوية)، وضغط ثاني أكسيد الكربون بين 27 و47 مم زئبق، وضغط الأكسجين بين 173 و219 مم زئبق. في تقرير لاحق عن هذه الدراسة، وجد همفريز [ 53 ] أنه عند تكرار التجارب بدفعة جديدة من محلول التروية المُرَوَّى، لم يتم الحصول على أي خلايا باقية، وأظهر الفحص النسيجي للخلايا الباقية من التجربة الأصلية فرطًا في عدد الخلايا الكبيبية، والذي عزاه إلى تأثير سام محتمل لبوليمر البوليمر.     

أفاد جويس وبروكتور [ 54 ] بنجاح استخدام محلول تروية بسيط قائم على الدكستران لحفظ كلى الكلاب لمدة 72 ساعة. كانت 10 من أصل 17 كلية قابلة للحياة بعد إعادة زرعها واستئصال الكلية المقابلة مباشرةً. استخدم جويس تروية غير نابضة عند  درجة حرارة 4 مئوية بمحلول تروية يحتوي على 2.1% من الدكستران 70 (فارماسيا)، بالإضافة إلى إلكتروليتات، وجلوكوز (19.5  غ/لتر)، وبروكايين، وهيدروكورتيزون. لم يحتوي محلول التروية على بلازما أو مكوناتها. كان ضغط محلول التروية 30  سم ماء فقط ، ودرجة الحموضة 7.34-7.40، وضغط الأكسجين 250-400 مم زئبق  . أظهرت هذه الدراسة أنه لحفظ الكلى لمدة 72 ساعة، لا حاجة إلى مغذيات أخرى غير الجلوكوز، وأن ضغوط وتدفقات محلول التروية المنخفضة كافية.

في عام 1973، أثبت ساكس [ 55 ] إمكانية استخدام التبريد بالثلج البسيط بنجاح لمدة 72 ساعة، وذلك باستخدام محلول غسيل جديد للتبريد الأولي وغسل الكلية. قام ساكس باستئصال كلى كلاب مُرطّبة جيدًا ومُدرّة للبول بعد حقنها بالمانيتول، ثم غسل الكليتين بـ 200  مل من المحلول من ارتفاع 100  سم. بعد ذلك، حُفظت الكليتان عند درجة حرارة 2  مئوية لمدة 72 ساعة دون أي تروية إضافية. أُعيد زرع الكليتين، ثم أُجريت عمليات استئصال فورية للكلية المقابلة. صُمم محلول الغسيل لمحاكاة تركيبة السائل داخل الخلايا، واحتوى على المانيتول كأيون غير منفذ لمنع تورم الخلايا. بلغت أسمولية المحلول 430  ملي أسمول/كجم، وكان الرقم الهيدروجيني له 7.0 عند درجة حرارة 2  مئوية. تم حذف المواد المضافة التي استخدمها كولينز (الدكستروز، فينوكسي بنزامين، بروكايين وهيبارين) من قبل ساكس.

وقد حقق روس [ 56 ] نتائج مماثلة، حيث نجح أيضًا في تخزين الكلى لمدة 72 ساعة دون استخدام التروية المستمرة، على الرغم من أنه لم يتمكن من تكرار نتائج كولينز أو ساكس باستخدام محاليل كولينز أو ساكس الأصلية. كان محلول روس الناجح مشابهًا في تركيبه الكهرليتي للسائل داخل الخلايا مع إضافة سترات مفرطة التوتر ومانيتول. لم يكن المحلول يحتوي على فوسفات أو بيكربونات أو كلوريد أو جلوكوز؛ وكانت الأسمولية 400  ملي أسمول/كجم ودرجة الحموضة 7.1. نجا خمسة من أصل ثمانية كلاب من إعادة زرع كليتيها واستئصال الكلية المقابلة الفوري، بعد تخزين الكلى لمدة 72 ساعة من غسلها بمحلول روس؛ لكن روس لم يتمكن من تحقيق تخزين لمدة 7 أيام بهذه التقنية حتى عند استخدام استئصال الكلية المقابلة المؤجل.

قام كولينز بتحديد متطلبات التخزين الناجح للتروية تحت التبريد لمدة 72 ساعة، حيث أظهر أن التروية النبضية غير ضرورية عند  استخدام ضغط تروية يبلغ 49 مم زئبق، وأن 7  درجات مئوية هي درجة حرارة أفضل للتخزين من 2  أو 12  درجة مئوية. [ 57 ] [ 58 ] كما قارن بين تركيبات مختلفة لمحلول التروية، ووجد أنه يمكن استخدام محلول تروية مُخفَّف بالفوسفات بنجاح، مما يُغني عن الحاجة إلى إمداد ثاني أكسيد الكربون. [ 57 ] وأظهر غروندمان [ 59 ]  أيضًا أن ضغط التروية المنخفض كافٍ. فقد استخدم متوسط ​​ضغط نبضي يبلغ 20 مم زئبق في عمليات التروية لمدة 72 ساعة، ووجد أن هذا يُعطي نتائج أفضل من متوسطات الضغط 15 أو 40 أو 50 أو 60  مم زئبق.

أفاد كوهين [ 60 ] بنجاح تخزين العينات لمدة تصل إلى 8 أيام باستخدام أنواع مختلفة من محاليل الإرواء، حيث تم الحصول على أفضل النتائج عند استخدام محلول إرواء مُخفَّف بالفوسفات عند درجة حرارة 8  درجات مئوية. ويُعتقد أن عدم القدرة على تكرار هذه التجارب الناجحة يعود إلى تغييرات طرأت على طريقة تصنيع محلول الإرواء المُخفَّف بالفوسفات، حيث كان ارتفاع محتوى حمض الأوكتانويك ضارًا. وقد ثبت أن حمض الأوكتانويك قادر على تحفيز النشاط الأيضي أثناء الإرواء في درجات حرارة منخفضة [ 61 ] ، وقد يكون هذا ضارًا.

طبيعة إصابة الحفاظ على الكلى

الإصابة الهيكلية

وصف ماكاي [ 62 ] التغيرات البنيوية التي تحدث أثناء تخزين الكلى السليمة سابقًا في درجة حرارة منخفضة لمدة 72 ساعة ، موضحًا كيف يحدث تكوّن فجوات تدريجي في سيتوبلازم الخلايا، مما يؤثر بشكل خاص على الأنابيب الكلوية القريبة . وباستخدام المجهر الإلكتروني، لوحظ انتفاخ الميتوكوندريا مع انفصال مبكر للأغشية البلورية الداخلية، ثم فقدان كامل للبنية الداخلية. وقد حافظت الجسيمات الحالة على سلامتها حتى وقت متأخر، ولم يظهر أن تدمير الخلية ناتج عن إنزيمات محللة، إذ لم تكن هناك إصابة مباشرة حول الجسيمات الحالة أكثر من بقية أجزاء الخلية.

وودز [ 45 ] [ 63 ] وليو [ 52 ] - عند وصف التخزين الناجح للكلى لمدة 5 و7 أيام - وصفوا التغيرات المجهرية الضوئية التي شوهدت في نهاية التروية وبعد الوفاة، لكنهم وجدوا القليل من التشوهات الإجمالية باستثناء بعض التسلل بالخلايا الليمفاوية والضمور الأنبوبي العرضي.

وصف هيل [ 64 ] التغيرات التي تحدث أثناء عمليات التروية القصيرة للكلى البشرية قبل إعادة زرعها ، كما أجرى خزعات بعد ساعة واحدة من إعادة الزرع. ووجد هيل، باستخدام المجهر الإلكتروني، تلفًا في الخلايا البطانية يتناسب مع شدة ترسب الفيبرين بعد إعادة الزرع. أما التغيرات التي لاحظها هيل في الكبيبات باستخدام المجهر الضوئي، فكانت عبارة عن جلطات فيبرين متفرقة وتسلل بالخلايا متعددة الأشكال. اشتبه هيل في أن هذه التغيرات ناتجة عن استجابة مناعية، لكنه وجد أنه لا توجد علاقة بين شدة الآفة النسيجية ووجود أو غياب ترسبات الغلوبولين المناعي.

توجد عدة تقارير عن تحليل البول الناتج عن الكلى أثناء التخزين بالتروية. قام كاستاغير [ 65 ] بتحليل البول الناتج خلال 24 ساعة من التروية، ووجد أنه عبارة عن رشاحة فائقة من سائل التروية. ووجد سكوت [ 66 ] أثراً ضئيلاً من البروتين في البول خلال نفس فترة التخزين، بينما لم يجد بيدرسون [ 67 ] سوى أثر ضئيل من البروتين بعد 36 ساعة من التخزين بالتروية. وأشار بيدرسون إلى أنه لاحظ وجود بروتينية شديدة في البول خلال تجارب سابقة. ولاحظ وودز [ 63 ] وجود قوالب بروتينية في أنابيب الكلى الحية بعد 5 أيام من التخزين، لكنه لم يحلل البول الناتج أثناء التروية. وفي دراسة كوهين [ 60 ] ، لوحظ ازدياد تدريجي في تركيز البروتين في البول خلال 8 أيام من الحفظ حتى تساوى محتوى البروتين في البول مع محتواه في سائل التروية. ربما كان هذا مرتبطًا بتورم الأغشية القاعدية الكبيبية والاندماج التدريجي لزوائد الخلايا الظهارية التي لوحظت أيضًا خلال نفس فترة تخزين التروية.

آليات الإصابة

يمكن تقسيم الآليات التي تُلحق الضرر بالكلى أثناء التخزين في درجات حرارة منخفضة على النحو التالي:

  1. إصابة العمليات الأيضية للخلية بسبب:
    1. بارد
    2. نقص الأكسجين عندما تكون الكلية دافئة قبل وبعد فترة التخزين في درجة حرارة منخفضة.
    3. عدم توفير العناصر الغذائية الصحيحة.
    4. تراكم السموم في سائل التروية.
    5. أضرار سامة ناتجة عن سائل التخزين.
    6. غسل الركائز الأساسية من خلايا الكلى.
  2. إصابة الحمض النووي النووي.
  3. إصابة ميكانيكية للجهاز الوعائي للكلى أثناء الإرواء تحت درجة حرارة منخفضة.
  4. إصابة ما بعد إعادة الزرع.

الإصابة الأيضية

بارد

في درجات الحرارة الطبيعية، تحافظ آليات الضخ في جدران الخلايا على مستويات عالية من البوتاسيوم داخل الخلايا وتطرد الصوديوم. في حال تعطل هذه المضخات، تمتص الخلية الصوديوم ويفقد البوتاسيوم. يتبع الماء الصوديوم بشكل سلبي، مما يؤدي إلى انتفاخ الخلايا. وقد أوضح ماكلوغلين [ 68 ] أهمية التحكم في انتفاخ الخلايا ، حيث وجد ارتباطًا وثيقًا بين محتوى الماء في قشرة الكلى لدى الكلاب وقدرة الكلى على دعم الحياة بعد تخزينها لمدة 36 ساعة. تُحفز آلية الضخ بواسطة نظام إنزيمي يُعرف باسم ATPase المُنشط بواسطة Na+K+ [ 69 ] ، ويُثبط بفعل البرد. وجد ليفي [ 70 ] أن النشاط الأيضي عند 10  درجات مئوية، كما يتضح من قياسات استهلاك الأكسجين، انخفض إلى حوالي 5% من المستوى الطبيعي، ولأن جميع الأنظمة الإنزيمية تتأثر بشكل مماثل بانخفاض درجة حرارة الجسم، فإن نشاط ATPase ينخفض ​​بشكل ملحوظ عند 10  درجات مئوية.

مع ذلك، توجد اختلافات بين الأنسجة والأنواع في حساسية هذا الإنزيم ATPase للبرودة، وهو ما قد يفسر الاختلافات في قدرة الأنسجة على تحمل انخفاض درجة حرارة الجسم. وقد أظهر مارتن [ 71 ] أن بعض نشاط إنزيم ATPase في خلايا قشرة الكلى لدى الكلاب يبقى موجودًا عند  درجة حرارة 10 مئوية، ولكنه يختفي عند  درجة حرارة 0 مئوية. وفي خلايا الكبد والقلب، تم تثبيط النشاط تمامًا عند  درجة حرارة 10 مئوية، وارتبط هذا الاختلاف في حساسية إنزيم ATPase للبرودة بصعوبة أكبر في السيطرة على تورم الخلايا أثناء تخزين خلايا الكبد والقلب في درجات حرارة منخفضة. يوجد إنزيم ATPase مميز في جدران الأوعية الدموية، وقد أظهر بيلزر [ 72 ] أنه يُثبط تمامًا عند درجة حرارة 10  مئوية، بينما يظل إنزيم ATPase في خلايا قشرة الكلى نشطًا عند هذه الدرجة. أُجريت هذه التجارب على بطانة الشريان الأورطي، ولكن إذا كانت بطانة الأوعية الدموية في الكلى لها نفس الخصائص، فقد يكون تلف الأوعية الدموية هو العامل المحدد في تخزين الكلى لفترات طويلة.

أظهر ويليس [ 73 ] كيف أن الحيوانات التي تدخل في سبات شتوي تستمد بعض قدرتها على البقاء على قيد الحياة في درجات الحرارة المنخفضة من خلال امتلاكها لإنزيم Na+K+-ATPase القادر على نقل الصوديوم والبوتاسيوم بنشاط عبر أغشية خلاياها، عند درجة حرارة 5  مئوية، أسرع بست مرات تقريبًا من الحيوانات التي لا تدخل في سبات شتوي؛ معدل النقل هذا كافٍ لمنع تورم الخلايا.

قد يكون معدل تبريد الأنسجة عاملاً مهماً في إحداث الضرر لأنظمة الإنزيمات. فقد أظهر فرانكافيلا [ 74 ] أنه عند تبريد شرائح الكبد بسرعة (تبريد فوري إلى 12  درجة مئوية خلال 6 دقائق)،  انخفضت عملية تحلل الجلوكوز اللاهوائي، كما تم قياسها عند إعادة تسخينها إلى 37 درجة مئوية، بنحو 67% من النشاط الذي لوحظ في الشرائح التي خضعت لتبريد متأخر. ومع ذلك، كانت شرائح كلى الكلاب أقل تأثراً بالتبريد السريع مقارنةً بشرائح الكبد.

نقص الأكسجين

تحتاج جميع الخلايا إلى الأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) كمصدر للطاقة اللازمة لنشاطها الأيضي. تتضرر الكلية نتيجة نقص الأكسجين عندما تعجز خلايا قشرة الكلية عن توليد كمية كافية من ATP في ظل ظروف لاهوائية لتلبية احتياجاتها. عند استئصال الكلية، يكون نقص الأكسجين أمرًا لا مفر منه في الفترة الفاصلة بين قطع الشريان الكلوي وتبريد الكلية. وقد أظهر بيرجستروم [ 75 ] أن 50% من محتوى ATP في خلايا قشرة كلية الكلب يُفقد خلال دقيقة واحدة من قطع الشريان الكلوي، ووجد وارنيك [ 76 ] نتائج مماثلة في كلى الفئران الكاملة، حيث انخفض مستوى ATP الخلوي بنسبة 50% بعد حوالي 30 ثانية من نقص الأكسجين الدافئ. كما أظهر وارنيك وبيرجستروم أن تبريد الكلية مباشرة بعد استئصالها يقلل بشكل ملحوظ من أي فقدان إضافي لـ ATP. عندما تم تروية هذه الكلى غير المصابة بالحرارة ببلازما منخفضة الحرارة مؤكسجة، انخفضت مستويات الأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) بنسبة 50% بعد 24 ساعة من التخزين، وبعد 48 ساعة، كانت مستويات ATP في الأنسجة أعلى قليلاً من ذلك، مما يشير إلى حدوث تخليق لـ ATP. وقد أظهر بيج [ 77 ] أن كلى الأرانب قادرة على إعادة تخليق ATP بعد فترة من التخزين بالتروية عقب الإصابة بالحرارة، ولكن لم يحدث أي إعادة تخليق في الكلى غير المصابة بالحرارة.

قد يحدث نقص الأكسجين الدافئ أيضًا أثناء إعادة زرع الكلية بعد التخزين. وقد أظهر لانن [ 78 ] ، من خلال قياسات استقلاب السكسينات، كيف كانت الكلية أكثر حساسية لفترة نقص الأكسجين الدافئ التي تحدث بعد التخزين مقارنةً بنفس فترة نقص الأكسجين الدافئ التي تحدث مباشرةً قبل التخزين.

نقص العناصر الغذائية الأساسية

وقد تم إثبات عملية التمثيل الغذائي النشط للجلوكوز مع إنتاج البيكربونات بواسطة بيترسون [ 79 ] وكوهين [ 60 ] .

ركزت دراسات بيترسون [ 79 ] على استقلاب الجلوكوز والأحماض الدهنية في الكلى خلال تخزينها بالتروية تحت التبريد لمدة ستة أيام، ووجد أن الكلى تستهلك الجلوكوز بمعدل 4.4 ميكرومول/غرام/يوم والأحماض الدهنية بمعدل 5.8 ميكرومول/غرام/يوم. وفي دراسة كوهين [ 60 ]، استهلكت أفضل الكلى المخزنة لمدة ثمانية أيام الجلوكوز بمعدل 2.3 ميكرومول/غرام/يوم و4.9 ميكرومول/غرام/يوم على التوالي، مما يرجح أنها كانت تستخدم الأحماض الدهنية بمعدلات مماثلة لكلى كلاب بيترسون. يشير ثبات كل من معدل استهلاك الجلوكوز ومعدل إنتاج البيكربونات إلى عدم وجود أي إصابة تؤثر على نظامي إنزيم تحلل الجلوكوز وإنزيم الأنهيدراز الكربوني.

أظهر لي [ 80 ] أن الأحماض الدهنية هي الركيزة المفضلة لقشرة كلى الأرنب عند درجات الحرارة الطبيعية، بينما يُعد الجلوكوز الركيزة المفضلة لخلايا النخاع التي تستقلب عادةً في ظروف لاهوائية. وأظهر أبوديلي [ 81 ] أن كلاً من الأحماض الدهنية والجلوكوز يمكن استخدامهما بواسطة النخاع الخارجي لكلى الأرنب، ولكن الجلوكوز يُستخدم بشكل تفضيلي. عند انخفاض درجة حرارة الجسم، تنخفض الاحتياجات الأيضية للكلى بشكل كبير، ولكن يحدث استهلاك ملحوظ للجلوكوز والأحماض الدهنية والأجسام الكيتونية. وأظهر هورسبرغ [ 50 ] أن الكلى التي تعاني من انخفاض درجة حرارة الجسم تستخدم الدهون، حيث يتراوح استهلاك البالميتات بين 0 و15% من المعدل الطبيعي في قشرة كلى الفئران عند 15  درجة مئوية. وأظهر بيترسون [ 79 ] أنه، على أساس مولاري، يتم استقلاب الجلوكوز والأحماض الدهنية بواسطة الكلى التي يتم ترويتها في ظروف انخفاض درجة حرارة الجسم بمعدلات متقاربة. أظهرت دراسة أجراها هوانغ [ 82 ] أن قشرة كلية الكلب المصاب بانخفاض حرارة الجسم تفقد الدهون (فقدان 35% من إجمالي الدهون بعد 24 ساعة) ما لم يُضَف الأوليات إلى سائل ترشيح الكلية. وأشار هوانغ إلى أن هذا الفقدان قد يؤثر على بنية الخلية، كما أنه يُشير إلى أن الكلية تستخدم الأحماض الدهنية. وفي دراسة لاحقة، أظهر هوانغ [ 83 ] أن شرائح قشرة كلية الكلب تستقلب الأحماض الدهنية، وليس الجلوكوز، عند درجة حرارة 10  درجات مئوية.

حتى مع توفير العناصر الغذائية الصحيحة، قد تُفقد هذه العناصر نتيجة امتصاصها في أنابيب نظام الحفظ. وقد أثبت لي [ 84 ] أن مطاط السيليكون (وهي مادة تُستخدم على نطاق واسع في أنظمة حفظ الكلى) امتص 46% من حمض الأوليك الموجود في سائل التروية بعد 4 ساعات من التروية.

تراكم السموم

أظهر أبونا [ 85 ] أن الأمونيا تُطلق في سائل التروية خلال تخزين الكلى لمدة ثلاثة أيام، وأشار إلى أن ذلك قد يكون سامًا لخلايا الكلى ما لم يُزال عن طريق استبدال سائل التروية بشكل متكرر. وقدّم ليو [ 52 ] بعض الدعم لاستخدام استبدال سائل التروية خلال عمليات التروية الطويلة ، حيث استخدم هذه التقنية في تجاربه الناجحة للتخزين لمدة سبعة أيام. كما وجد غروندمان [ 86 ] أن جودة الحفظ لمدة 96 ساعة تحسّنت باستخدام ضعف حجم سائل التروية أو عن طريق استبداله. مع ذلك، استندت استنتاجات غروندمان إلى مقارنات مع مجموعة ضابطة مكونة من ثلاثة كلاب فقط. لم يتمكن كوهين [ 60 ] من إثبات أي إنتاج للأمونيا خلال ثمانية أيام من التروية، ولم يجد أي فائدة من استبدال سائل التروية؛ وقد تبيّن أن القلوية التدريجية التي حدثت أثناء التروية كانت ناتجة عن إنتاج البيكربونات.

الضرر السام الناتج عن سائل التروية

أظهرت بعض الدراسات أن محاليل التروية قد تُسبب آثارًا سامة على الكلى نتيجةً لإضافة مواد كيميائية معينة إليها عن غير قصد. فقد بيّن كولينز [ 87 ] أن البروكايين المُضاف إلى تركيبة محاليل التروية التي استخدمها قد يكون سامًا، كما أشار بيج [ 88 ] إلى إمكانية غسل مواد سامة، مثل مُلدّنات البولي فينيل كلوريد، من أنابيب دائرة التروية. وأظهر دفوراك [ 89 ] أن إضافة ميثيل بريدنيزولون إلى محلول التروية، والتي اعتبرها وودز [ 63 ] ضرورية ، قد تكون ضارة في بعض الحالات. فقد بيّن أنه عند استخدام أكثر من  غرام من ميثيل بريدنيزولون في 650  مل من محلول التروية (مقارنةً بـ 250  ملغ في لتر واحد استخدمها وودز)، حدثت تغيرات ديناميكية دموية وبنيوية لا رجعة فيها في الكلى بعد 20 ساعة من التروية. كان هناك نخر في حلقات الشعيرات الدموية، وانسداد في مساحات بومان، وتثخن في الغشاء القاعدي، وتلف في الخلايا البطانية.

غسل الركائز الأساسية

اعتقد وارنيك [ 76 ] أن مستوى النيوكليوتيدات المتبقية في الخلية بعد التخزين عاملٌ مهم في تحديد قدرة الخلية على إعادة تصنيع الأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) والتعافي بعد إعادة التدفئة. ويُعدّ التغيير المتكرر لسائل التروية أو استخدام كمية كبيرة منه عيبًا نظريًا يتمثل في احتمال غسل نيوكليوتيدات الأدينين المتحللة من الخلايا، وبالتالي عدم توفرها لإعادة تصنيعها إلى ATP عند إعادة تدفئة الكلية.

إصابة الحمض النووي النووي

يتضرر الحمض النووي النووي أثناء التخزين البارد للكلى. وقد أظهر لازاروس [ 90 ] حدوث كسور في الحمض النووي أحادي السلسلة خلال 16 ساعة في كلى الفئران المخزنة في درجات حرارة منخفضة، مع تثبيط طفيف لهذا الضرر عند التخزين في محاليل كولينز أو ساكس. ويختلف هذا الضرر النووي عن ذلك الذي يُلاحظ في حالة الإصابة الدافئة عند حدوث كسور في الحمض النووي ثنائي السلسلة. [ 91 ]

إصابة ميكانيكية للجهاز الوعائي

قد تُلحق طرق التخزين بالتروية ضررًا ميكانيكيًا بالبطانة الوعائية للكلى، مما يؤدي إلى تجلط الشرايين أو ترسب الفيبرين بعد إعادة الزرع. لاحظ هيل [ 64 ] أن ترسب الفيبرين في الكبيبة بعد إعادة الزرع ووظيفة الكلى بعد الجراحة، في الكلى البشرية، يرتبط بمدة التخزين بالتروية. وقد أخذ خزعات أثناء إعادة التروية من كلى بشرية محفوظة بالتروية أو التخزين بالثلج، وأظهر بالمجهر الإلكتروني أن تمزق البطانة يحدث فقط في الكلى التي خضعت للتروية. وأظهرت الخزعات المأخوذة بعد ساعة واحدة من إعادة التروية وجود صفائح دموية وفيبرين ملتصقة بأي مناطق من الغشاء القاعدي الوعائي المكشوف. ووصف شيل [ 92 ] نوعًا مختلفًا من تلف الأوعية الدموية ، حيث بيّن كيف يمكن أن يحدث تمزق نفاث في الجزء البعيد من القنية المربوطة بالشريان الكلوي، مما يؤدي إلى تجلط الشرايين  على بعد حوالي 1 سم من موقع القنية.

إصابة ما بعد إعادة الزرع

توجد أدلة تشير إلى أن الآليات المناعية قد تُلحق الضرر بالكلى التي تم ترويتها تحت التبريد بعد إعادة زرعها، إذا احتوى سائل التروية على أجسام مضادة نوعية. وصف كروس [ 93 ] زوجين من كلى بشرية من جثث متبرعين، تم ترويتها في آنٍ واحد ببلازما مُرَسَّبة بالتبريد تحتوي على أجسام مضادة نوعية لمستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) لأحد الزوجين. عانت كلتا الكليتين من تجلط شرياني مبكر. وصف لايت [ 94 ] رفضًا حادًا مماثلًا بعد تخزين التروية، وأظهر أن البلازما المُرَسَّبة بالتبريد المستخدمة تحتوي على أجسام مضادة سامة من نوع IgM. وقد أثبت فيلو [ 95 ] هذا الخطر المحتمل لاستخدام البلازما المُرَسَّبة بالتبريد تجريبيًا، حيث قام بتروية كلى كلاب لمدة 24 ساعة ببلازما كلاب مُرَسَّبة بالتبريد مُحسَّسة بشكل نوعي، ووجد أنه قادر على إحداث آفات كبيبية ووعائية مع احتقان الشعيرات الدموية، وتورم البطانة، وتسلل كريات الدم البيضاء متعددة النوى، وتجلط شرياني. أظهر الفحص المجهري المناعي الفلوري ارتباطًا نوعيًا للغلوبولين المناعي IgG على طول الأسطح البطانية، وفي الكبيبات، وكذلك في الأوعية الدموية. بعد إعادة الزرع، حدث تثبيت المتممة وتلف الأنسجة بنمط مماثل. وُجد ارتباط بين شدة التلف النسيجي ووظيفة الكلى اللاحقة.

حاول العديد من الباحثين منع ارتفاع درجة حرارة الكلى أثناء عملية إعادة الزرع، لكن كوهين وحده هو من وصف استخدام نظام تبريد فعال. [ 60 ] أظهرت قياسات إطلاق إنزيمات الليزوزومات من الكلى التي خضعت لعملية توصيل وهمية، سواء داخل نظام التبريد أو خارجه، مدى حساسية الكلى لارتفاع درجة حرارتها بعد فترة من التخزين البارد، وأكدت فعالية نظام التبريد في منع إطلاق الإنزيمات. ولعل من العوامل الأخرى التي ساهمت في تقليل الإصابة أثناء عمليات إعادة الزرع هو الحفاظ على الكلى عند درجة حرارة 7  درجات مئوية داخل ملف التبريد، وهي درجة قريبة من درجة الحرارة المستخدمة أثناء التخزين بالتروية، ما جنّب الكلى التغيرات الكبيرة في درجة الحرارة التي كانت ستحدث لو تم استخدام التبريد بالثلج.

وصف دمبستر [ 96 ] استخدام التحرير البطيء للمشابك الوعائية في نهاية عمليات إعادة زرع الكلى لتجنب إصابة الكلية، لكن باحثين آخرين لم يذكروا ما إذا كانوا قد استخدموا هذه المناورة أم لا. بعد أن لاحظ كوهين إصابة وعائية مصحوبة بنزيف داخل الكلية بعد 3 أيام من تخزين الإرواء [ 60 ] ، تم استخدام تقنية إعادة التروية البطيئة في جميع التجارب اللاحقة، بهدف منح الأوعية الدموية داخل الكلية الوقت الكافي لاستعادة توترها بشكل كافٍ لمنع تطبيق ضغط انقباضي كامل على الأوعية الكبيبية الهشة. قد يُعزى غياب الإصابة الوعائية الواضحة في عمليات الإرواء اللاحقة إلى استخدام هذه المناورة.

انظر أيضاً

مراجع

  1. ↑ فوجيوشي، ماساتو؛ دي ماير، فنسنت إي؛ بورت، روبرت جيه (2021-01-01)، أورلاندو، جوزيبي؛ كيشافجي، شاف (محررون)، "الفصل 2 - الإرواء الآلي لإصلاح الأعضاء المتبرع بها: من الرؤية إلى الممارسة السريرية اليومية" ، إصلاح الأعضاء وتجديدها ، دار النشر الأكاديمية، ص 43-73 ، ISBN  978-0-12-819451-5تم الاطلاع عليه بتاريخ 31 يوليو 2024{{citation}}: CS1 maint: work parameter with ISBN ( link )
  2. ↑ جينغ، لي؛ ياو، ليان؛ تشاو، مايكل؛ بينغ، لي بينغ؛ ليو، مينغياو (2018). " حفظ الأعضاء: من الماضي إلى المستقبل" . مجلة علم الأدوية الصينية . 39 (5): 845-857 . doi : 10.1038/aps.2017.182 . ISSN 1745-7254 . PMC 5943901. PMID 29565040 .   
  3. ^ تشين، جوانجكي؛ جيرنريد، فيكتوريا؛ سيوبيرج، تريجفي؛ ستين، ستيج. نيلسون ، يوهان (2022/03/21). "التروية الآلية للحفاظ على قلب الإنسان: مراجعة منهجية" . زرع الدولية . 35 10258. دوى : 10.3389/ti.2022.10258 . ISSN 0934-0874 . بمك 8983812 . بميد 35401041 .   
  4. ↑ هويلر، فلوريان؛ بينز، جوناس؛ كانينغهام، ليزلي؛ فايستر، ماتياس؛ شولر، مارتن جيه؛ تيبت، مارك دبليو؛ كلافين، بيير آلان (2025). "ما وراء الحفظ: مستقبل التروية الآلية لتقييم الكبد وإصلاحه" . مجلة نيتشر ريفيوز لأمراض الجهاز الهضمي والكبد . 22 (10): 721-733 . doi : 10.1038/s41575-025-01111-6 . ISSN 1759-5053 . 
  5. ↑ كاي، مارك د.؛ هوسجود، سارة أ.؛ هاربر، سيمون جيه إف؛ باجول، أتول؛ والر، هيلين ل.؛ نيكلسون، مايكل ل. (نوفمبر 2011). "الغسل خارج الجسم في درجة حرارة طبيعية مقابل الغسل في درجة حرارة منخفضة باستخدام محلول حفظ جديد خالٍ من الفوسفات (AQIX) في كلى الخنازير". مجلة البحوث الجراحية . 171 (1): 275-282 . doi : 10.1016/j.jss.2010.01.018 . PMID 20421110 . 
  6. ↑ يونغ، سيسي؛ هوسغود، سارة أ.؛ نيكلسون، مايكل ل. (يونيو 2016). "التروية خارج الجسم في درجة حرارة الجسم الطبيعية في زراعة الكلى: الماضي والحاضر والمستقبل". الرأي الحالي في زراعة الأعضاء . 21 (3): 301-307 . doi : 10.1097/MOT.0000000000000316 . ISSN 1087-2418 . PMID 27145197. S2CID 22627245 .   
  7. ↑ سيريزا، كارلو دي إل؛ نصر الله، ديفيد؛ كوسيو، قسطنطين سي؛ فريند، بيتر جيه (فبراير 2018). "حالة استخدام التروية الآلية في درجة حرارة الجسم الطبيعية في زراعة الكبد: سيريزا وآخرون" . زراعة الكبد . 24 (2): 269-275 . doi : 10.1002/lt.25000 . PMID 29272051 . 
  8. ↑ سايبيل، مارسيلو؛ يونغ، جوناثان سي؛ ليو، مينغياو؛ أنراكو، ماساكي؛ تشين، فينغشي؛ كارولاك، فويتك؛ ساتو، ماساكي؛ لاراتا، جين؛ آزاد، ساسان؛ مادونيك، ميندي؛ تشاو، تشونغ واي (14 أبريل 2011). "إرواء الرئة خارج الجسم في درجة حرارة الجسم الطبيعية في زراعة الرئة السريرية" ( ملف PDF) . مجلة نيو إنجلاند الطبية . 364 (15): 1431-1440 . doi : 10.1056/NEJMoa1014597 . ISSN 0028-4793 . PMID 21488765. S2CID 10576812. مؤرشف من النسخة الأصلية (ملف PDF) بتاريخ 22 فبراير 2020.   
  9. ↑ "نجاح عملية زرع كبد: الكبد يبقى حياً خارج الجسم لعدة أيام" . بي بي سي نيوز . 31 مايو 2022. تم الاطلاع عليه بتاريخ 24 يونيو 2022 .
  10. ↑ كلافين، بيير آلان؛ دوتكوفسكي، فيليب؛ مولر، ماتيو؛ إشمومينوف، ديلمورودجون؛ باوتيستا بورّيغو، لوسيا؛ ويبر، أخيم؛ مولهاوبت، بيات؛ سوزا دا سيلفا، ريتشارد إكس؛ بورغ، برايان آر؛ رودولف فون روهر، فيليب؛ شولر، مارتن جيه؛ بيكر، داستن؛ هيفتي، ماكس؛ تيبت، مارك دبليو. (31 مايو 2022). "زراعة كبد بشري بعد 3 أيام من الحفظ خارج الجسم في درجة حرارة طبيعية". مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 40 (11): 1610-1616 . doi : 10.1038/s41587-022-01354-7 . ISSN 1546-1696 . PMID 35641829 . S2CID 249234907 .   
  11. ↑ "مواد كيميائية جديدة واقية من التجمد قد تحافظ على الأعضاء دون تلفها بسبب الجليد" . نيو أطلس . 22 يونيو 2022. تم الاطلاع عليه بتاريخ 24 يونيو 2022 .
  12. ↑ براينت، سافرون جيه؛ عوض، ميا ن؛ إلبورن، آرون؛ كريستوفرسون، أندرو جيه؛ مارتن، أندرو في؛ مفتاحي، نسترن؛ دروموند، كالوم جيه؛ غريفز، تمار ل؛ براينت، غاري (22 يونيو 2022). "المذيبات اليوتكتيكية العميقة كعوامل واقية من التجمد للخلايا الثديية". مجلة كيمياء المواد ب . 10 (24): 4546-4560 . doi : 10.1039/D2TB00573E . ISSN 2050-7518 . PMID 35670530 .  
  13. ١ ٢ ٣ "إحياء جزئي لأعضاء خنزير بعد ساعة من نفوقه" . بي بي سي نيوز . ٣ أغسطس ٢٠٢٢. تاريخ الاطلاع: ١٥ سبتمبر ٢٠٢٢ .
  14. ^ ديفيد أندرييفيتش. فرسيليا، زفونيمير؛ ليسي، تاراس؛ تشانغ، شوبي. سكاريكا، ماريو؛ سباجيك، آنا؛ دلال، ديفيد؛ ثورن، ستيفاني L.؛ داكرو، روبرت ب. ما، شاوجي؛ دوي، فان س. إيشيكتاش، أتاجون يو؛ ليانغ ، دان. لي، مينجفينج؛ كيم، سويل كي؛ دانييلي، ستيفانو جي؛ بنو، خديجة؛ بيرينشيري، سودهير؛ مينون، مادهاف سي؛ هتنر، أنيتا. شيث، كيفن ن.؛ جوبيسكي، كيفن T.؛ تيتجين، غريغوري T.؛ زافيري، هيتن P .؛ لاثام، ستيفن ر. سينوساس، ألبرت J.؛ سيستان، نيناد (أغسطس 2022). "التعافي الخلوي بعد نقص تروية الجسم كله الدافئ لفترة طويلة" . طبيعة . 608 (7922 ) : 405– 412. Bibcode : 2022Natur.608..405A . doi : 10.1038/ s41586-022-05016-1 . ISSN 1476-4687 . PMC 9518831. PMID 35922506. S2CID 251316299 .    
  15. ^ فرسيليا، زفونيمير؛ دانييلي، ستيفانو جي؛ سيلبيريس، جون. تالبو، فرانشيسكا؛ موروزوف، يوري م.؛ سوزا ، أندريه إم إم . تاناكا، بريان س.؛ سكاريكا، ماريو؛ بليتيكوس، ميهوفيل؛ كور، نافجوت؛ تشوانغ، تشن دبليو؛ ليو، تشاو؛ الكوادري، رافيد؛ سينوساس، ألبرت J.؛ لاثام، ستيفن ر. واكسمان، ستيفن G.؛ سيستان ، نيناد (أبريل 2019). "استعادة الدورة الدموية في المخ والوظائف الخلوية بعد ساعات من الوفاة" . طبيعة . 568 (7752): 336–343 . بيب كود : 2019Natur.568..336V . doi : 10.1038/ s41586-019-1099-1 . ISSN 1476-4687 . PMC 6844189. PMID 30996318 .   
  16. ^ كاريل أ (1902). "تقنية تشغيل مفاغرة الأوعية الدموية وزرع الأحشاء". ليون ميد . 98 : 859 – 864.
  17. ^ أولمان إي (1902). “زراعة نيرين التجريبية”. وين كلين ووششر . 15 : 281 - 282.
  18. ↑ فورمان، ف. أ.، وفيلد، ج. (1943). "إمكانية عكس تثبيط استقلاب الدماغ والكلى لدى الفئران بفعل البرد". المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء . 139 (2): 193-196 . doi : 10.1152/ajplegacy.1943.139.2.193 .
  19. ↑ كاريل أ، ليندبيرغ سي أ (1935). "زراعة الأعضاء الكاملة" ( ملف PDF) . مجلة ساينس . 81 (2112): 621-623 . Bibcode : 1935Sci....81..621C . doi : 10.1126/science.81.2112.621 . PMID 17733174. S2CID 19034161 .  
  20. ↑ بينبريدج ، ف. أ.، وإيفانز، س. ل. (1914). "تحضير القلب والرئة والكلى" . مجلة علم وظائف الأعضاء . 48 (4): 278-286 . doi : 10.1113/jphysiol.1914.sp001661 . PMC 1420524. PMID 16993254 .  
  21. ↑ أوينز، ج. كوثبرت (1955-01-01). "انسداد تجريبي مطوّل للشريان الأورطي الصدري أثناء انخفاض حرارة الجسم". أرشيف الجراحة . 70 (1): 95-97 . doi : 10.1001/archsurg.1955.01270070097016 . ISSN 0004-0010 . PMID 13217608 .  
  22. ↑ بوغاردوس جي إم، شلوسر آر جيه (1956). "تأثير درجة الحرارة على تلف الكلى الإقفاري". الجراحة . 39 (6): 970-974 . PMID 13324611 . 
  23. ↑ موير، جون هـ.؛ موريس، جورج؛ ديبيكي، مايكل إي. (يناير 1957). "انخفاض حرارة الجسم: 1. تأثيره على ديناميكا الدم الكلوية وعلى إفراز الماء والكهارل في الكلاب والبشر" . حوليات الجراحة . 145 (1): 26-40 . doi : 10.1097/00000658-195701000-00003 . ISSN 0003-4932 . PMC 1465379. PMID 13395281 .   
  24. ↑ ستويبر، ب.؛ كوفاكس، س.؛ كوليتسكي، س.؛ بيرسكي، ل. (يوليو 1958). "انخفاض حرارة الكلى الموضعي". الجراحة . 44 (1): 77-83 . ISSN 0039-6060 . PMID 13556447 .  
  25. ↑ شلورب، بي آر؛ والدورف، آر دي؛ ويلش، جيه إس (نوفمبر 1959). "التأثير الوقائي لانخفاض حرارة الكلى على نقص التروية الكلوية الكلي". الجراحة، أمراض النساء والتوليد . 109 : 561-565 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0039-6087 . الرقم المرجعي في PubMed 14442912 .  
  26. ↑ كايزر، جيه سي؛ فارلي، إتش إتش؛ مولر، جي إف؛ ستروبل، سي جيه؛ هيتشكوك، سي آر (1960). "نجاح عمليات زرع الكلى الذاتية في الكلاب بعد تبريد الكلى الانتقائي لمدة سبع ساعات". منتدى الجراحة . 11 : 26-28 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0071-8041 . الرقم المرجعي في PubMed 13756355 .  
  27. ↑ لابشينسكي، أ. ج. (1960). "النتائج الحديثة لزراعة الأطراف والكلى المحفوظة تجريبياً، وإمكانية استخدام هذه التقنية في الممارسة السريرية". حوليات أكاديمية نيويورك للعلوم . 87 (1): 539-569 . Bibcode : 1960NYASA..87..539L . doi : 10.1111/j.1749-6632.1960.tb23220.x . PMID 14414086. S2CID 41367748 .  
  28. 1 2 همفريز إيه إل؛ راسل آر؛ أوستافين جيه؛ جودريتش إس إم؛ موريتز دبليو إتش (1962). "إعادة زرع ناجحة لكلية كلب بعد تخزينها لمدة 24 ساعة". منتدى الجراحة . 13 : 380-382 . PMID 13955710 . 
  29. ↑ كالني، آر واي؛ بيج، دي إي؛ برايس-ديفيز، جيه؛ براون، إف إل (14 سبتمبر 1963). " حفظ الكلى بالتبريد بالثلج" . المجلة الطبية البريطانية . 2 (5358): 640-655 . doi : 10.1136/bmj.2.5358.640-a . ISSN 0959-8138 . PMC 1872740. PMID 14046169 .   
  30. ↑ همفريز، أ. ل.؛ موريتز، و. هـ.؛ بيرس، إ. س. (أبريل 1964). "حفظ الكلى لمدة 24 ساعة مع تقرير عن عملية زرع ذاتي ناجحة للكلاب بعد استئصال الكلية بالكامل". الجراحة . 55 : 524-530 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0039-6060 . الرقم المرجعي في PubMed 14138017 .  
  31. ↑ ماناكس، ويليام ج. (31 مايو 1965). "انخفاض درجة حرارة الجسم وارتفاع ضغط الدم: طريقة بسيطة لحفظ الأعضاء كاملةً". مجلة الجمعية الطبية الأمريكية . 192 (9): 755-759 . doi : 10.1001/jama.1965.03080220019004 . ISSN 0098-7484 . PMID 14285707 .  
  32. ↑ بيلزر، فولكرت أو.؛ ​​آشبي، ب. ستيري؛ دنفي، ج. إنجلبرت (سبتمبر 1967). "حفظ كلى الكلاب لمدة 24 ساعة و72 ساعة". مجلة لانسيت . 290 (7515): 536-539 . doi : 10.1016/S0140-6736(67)90498-9 . PMID 4166894 . 
  33. ↑ بيلزر، فولكرت أو.؛ ​​آشبي، ب. ستيري؛ هوانغ، جوزفين س.؛ دنفي، ج. إنجلبرت (سبتمبر 1968). " أسباب ارتفاع ضغط التروية في تروية الأعضاء المعزولة" . حوليات الجراحة . 168 (3): 382-391 . doi : 10.1097/00000658-196809000-00008 . ISSN 0003-4932 . PMC 1387342. PMID 4877588 .   
  34. ↑ لوتكي، ب. أ. (1966). "عوامل تثبيت الليزوزومات لحفظ الكلى في درجات حرارة منخفضة". مجلة نيتشر . 212 (5061): 512-513 . Bibcode : 1966Natur.212..512L . doi : 10.1038/212512a0 . PMID 5339142 . 
  35. ^ سومالاينن ف (1938). "إنتاج السبات الاصطناعي" . طبيعة . 142 (3609): 1157. بيب كود : 1938Natur.142.1157S . دوى : 10.1038/1421157a0 . S2CID 4087215 . 
  36. ↑ كامياما، تيكو م. (1970-05-01). "حفظ القلب المصاب بنقص الأكسجين باستخدام مثبط أيضي وانخفاض درجة حرارة الجسم". مجلة أرشيف الجراحة . 100 (5): 596-599 . doi : 10.1001/archsurg.1970.01340230062016 . ISSN 0004-0010 . PMID 4908950 .  
  37. ↑ بيلزر، ف. أو.، وكاونتز ، س. ل. (1970). "حفظ وزرع كلى المتوفين: تجربة لمدة عامين" . حوليات الجراحة . 172 (3): 394-404 . doi : 10.1097/00000658-197009000-00009 . PMC 1397323. PMID 4918001 .  
  38. ↑ همفريز، أ. ل.؛ راسل، ر.؛ ستودارد، ل. د.؛ موريتز، و. هـ. (مايو 1968). "حفظ الكلى بنجاح لمدة خمسة أيام. الإرواء ببلازما مخففة منخفضة الحرارة". مجلة جراحة المسالك البولية الاستقصائية . 5 (6): 609-618 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0021-0005 . الرقم المرجعي في PubMed 4914852 .  
  39. ^ كولينز، جنرال موتورز. برافو شوجارمان، ماريا؛ تيراساكي، PI (ديسمبر 1969). “الحفاظ على الكلى للنقل”. لانسيت . 294 (7632): 1219–1222 . دوى : 10.1016/S0140-6736(69)90753-3 . بميد 4187813 . 
  40. ↑ كيلر، ر.؛ سويني، ج.؛ تايلور، ر.م.ر.؛ أولدال، ب.ر. (ديسمبر 1966). "مشكلة الحفاظ على وظائف الكلى". المجلة البريطانية لجراحة المسالك البولية . 38 (6): 653-656 . doi : 10.1111/j.1464-410X.1966.tb09773.x . PMID 5335118 . 
  41. ↑ داف آر إس، جينسبيرغ جيه (1957). "بعض التأثيرات الوعائية الطرفية للدايبينيلين داخل الشرايين لدى الإنسان". العلوم السريرية . 16 (1): 187-196 . PMID 13414151 . 
  42. ↑ رانجيل دي إم، بروكنر دبليو إل، بايفيلد جيه إي، دينبار جيه إي، ياكيشي واي، ستيفنز جي إتش، فونكالسرود إي دبليو (1969). "التقييم الإنزيمي لحفظ الكبد باستخدام الأدوية المثبتة للخلايا". مجلة الجراحة وأمراض النساء والتوليد . 129 : 963-972 .
  43. ↑ ليو، وين-بين؛ همفريز، آرثر إل.؛ ستودارد، ليلاند دي.؛ موريتز، ويليام إتش. (أغسطس 1970). "تخزين الكلى لمدة 48 ساعة". مجلة لانسيت . 296 (7669): 423. doi : 10.1016/S0140-6736(70)90041-3 . PMID 4194732 . 
  44. ↑ وودز، جون إي. (1970-11-01). "مشاكل في حفظ كلى الكلاب لمدة 48 إلى 72 ساعة". مجلة أرشيف الجراحة . 101 (5): 605-609 . doi : 10.1001/archsurg.1970.01340290061013 . ISSN 0004-0010 . PMID 5479705 .  
  45. وودز ، جيه إي (1971). "حفظ كلى الكلاب بنجاح لمدة تتراوح بين ثلاثة وسبعة أيام". أرشيف الجراحة . 102 (6): 614-616 . doi : 10.1001/archsurg.1971.01350060078024 . PMID 4930759 . 
  46. 1 2 جونسون، آر دبليو جي؛ أندرسون، مارلين؛ فلير، سي تي جي؛ موراي، شيلا جي إتش؛ تايلور، آر إم آر؛ سويني، جون (مارس 1972). " تقييم محلول إرواء جديد لحفظ الكلى" . زرع الأعضاء . 13 (3): 270-275 . doi : 10.1097/00007890-197203000-00012 . ISSN 0041-1337 . PMID 4553729. S2CID 35755493 .   
  47. 1 2 كلايس، ج.؛ أوريل، م.؛ بلوهمي، إ.؛ بيترسون، س. (1972). "النتائج التجريبية والسريرية للتروية المستمرة للألبومين تحت درجة حرارة منخفضة". وقائع الجمعية الأوروبية لغسيل الكلى وزراعة الأعضاء. الجمعية الأوروبية لغسيل الكلى وزراعة الأعضاء . 9 : 484-490 . ISSN 0071-2736 . PMID 4589766 .  
  48. ↑ موراي ر، ديفنباخ دبليو سي إل (1953). "تأثير الحرارة على عامل التهاب الكبد المصلي المتجانس". وقائع جمعية علم الأحياء التجريبي والطب . 84 (1): 230-231 . doi : 10.3181/00379727-84-20599 . PMID 13120994. S2CID 29635377 .  
  49. ↑ هينك، جيه إتش؛ بابنهاجن، إيه آر؛ لوندبلاد، جيه؛ جونسون، إف إف (يونيو 1970). "جزء بروتين البلازما (البشري)". فوكس سانغينيس . 18 (6): 527-541 . doi : 10.1111/j.1423-0410.1970.tb02185.x . PMID 4104308. S2CID 71936479 .  
  50. 1 2 هورسبرغ تي (1973). "الدور المحتمل للأحماض الدهنية الحرة في وسائط حفظ الكلى". مجلة نيتشر للبيولوجيا الجديدة . 242 (117): 122-123 . doi : 10.1038/newbio242122a0 . PMID 4513414 . 
  51. ↑ جونسون، ر. و. ج. دراسات في الحفاظ على الكلى. نيوكاسل، إنجلترا: جامعة نيوكاسل، 1973. 94 صفحة. رسالة ماجستير.
  52. 1 2 3 ليو، دبليو بي؛ همفريز، إيه إل؛ راسل، آر؛ ستودارد، إل دي؛ غارسيا، إل إيه؛ سيركيس، كيه دي (1973). "إرواء كلية كلب لمدة ثلاثة وسبعة أيام بجزء بروتين البلازما البشري IV-4". منتدى الجراحة . 24 : 316-318 . ISSN 0071-8041 . PMID 4806016 .  
  53. ↑ همفريز، أ. ل.؛ غارسيا، ل. أ.؛ سيركيس، ك. د. (سبتمبر 1974). "محاليل التروية للحفظ طويل الأمد عن طريق التروية المستمرة". وقائع زراعة الأعضاء . 6 (3): 249-253 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0041-1345 . الرقم المرجعي في PubMed 4606897 .  
  54. ↑ جويس م، بروكتر إي (1974). "حفظ كلى الكلاب بالتروية تحت درجة حرارة منخفضة لمدة 48-72 ساعة دون مشتقات البلازما أو أكسجة الغشاء" . زرع الأعضاء . 18 (6): 548-550 . doi : 10.1097/00007890-197412000-00014 . PMID 4612890 . 
  55. ↑ ساكس، ستيفن أ.؛ بيتريتش، بيتر هـ.؛ كوفمان، جوزيف ج. (مايو 1973). "حفظ كلى الكلاب باستخدام محلول ترشيح جديد". مجلة لانسيت . 301 (7811): 1024-1028 . doi : 10.1016/S0140-6736(73)90665-X . PMID 4122110 . 
  56. ↑ روس، هـ.؛ مارشال، فيرنون س.؛ إسكوت، مارغريت ل. (يونيو 1976). "حفظ الكلى لدى الكلاب لمدة 72 ساعة دون إرواء مستمر" . زرع الأعضاء . 21 (6): 498-501 . doi : 10.1097/00007890-197606000-00009 . ISSN 0041-1337 . PMID 936278. S2CID 29098639 .   
  57. 1 2 كولينز جي إم، هالاسز إن إيه (1974). "تبسيط تخزين الكلى لمدة 72 ساعة". منتدى الجراحة . 25 : 275-277 . PMID 4612775 . 
  58. ↑ كولينز جي إم، وهالاسز إن إيه (1973). "دور التدفق النبضي في الحفاظ على الكلى" . زرع الأعضاء . 16 (4): 378-379 . doi : 10.1097/00007890-197310000-00018 . PMID 4583153 . 
  59. ↑ غروندمان، ر.؛ راب، م.؛ ميوزل، إ.؛ كيرشوف، ر.؛ بيشلمير، هـ. (مارس 1975). "تحليل ضغط التروية الأمثل ومعدل تدفق مقاومة الأوعية الدموية الكلوية واستهلاك الأكسجين في الكلية المروية تحت التبريد". الجراحة . 77 (3): 451-461 . ISSN 0039-6060 . PMID 1092016 .  
  60. 1 2 3 4 5 6 7 كوهين، جيفري ليونارد (1982). حفظ الكلى لمدة 8 أيام . copac.jisc.ac.uk ( رسالة ماجستير في الكيمياء). جامعة ليفربول. OCLC 757144327. EThOS uk.bl.ethos.535952 .  ( التسجيل مطلوب )
  61. ↑ كوهين، جي إل؛ بوردت، ك؛ جونسون، آر دبليو جي (ديسمبر 1985). "تحفيز استهلاك الأكسجين بواسطة حمض الأوليك وحمض الأوكتانويك أثناء حفظ الكلى في درجات حرارة منخفضة". علم الأحياء التجميدي . 22 (6): 615-616 . doi : 10.1016/0011-2240(85)90078-1 .
  62. ↑ ماكاي ب، مولوني ب ج، ريكس د ب. "استخدام المجهر الإلكتروني في حفظ الكلى وإروائها". في: نورمان ج س، محرر. إرواء الأعضاء وحفظها. نيويورك: أبليتون سينشري كروفتس، 1968: 697-714.
  63. وودز ، جيه إي؛ فليشر، جي إيه؛ هيرش، بي إل (سبتمبر 1974). "إرواء كلى الكلاب لمدة خمسة أيام: تأثير مفترض للستيرويدات". وقائع زراعة الأعضاء . 6 ( 3): 255-260 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0041-1345 . الرقم المرجعي في PubMed 4153357 .  
  64. 1 2 هيل، جي إس؛ لايت، جيه إيه؛ بيرلوف، إل جيه (أبريل 1976). "الإصابة المرتبطة بالتروية في زراعة الكلى". الجراحة . 79 (4): 440-447 . ISSN 0039-6060 . PMID 769223 .  
  65. ↑ كاستاغير بي كي، كاب كي، ليوناردز جيه آر (1969). "البنية الدقيقة في كلية الكلاب المحفوظة لمدة 24 ساعة". معاملات الجمعية الأمريكية للأعضاء الداخلية الاصطناعية . 15 : 214-218 . PMID 4893029 . 
  66. ↑ سكوت، د. ف.؛ مورلي، أ. ر.؛ سويني، ج. (سبتمبر 1969). "حفظ الكلى لدى الكلاب بعد الإرواء بالتبريد ووظيفتها اللاحقة". المجلة البريطانية للجراحة . 56 (9): 688-691 . doi : 10.1002/bjs.1800560913 . PMID 4897217. S2CID 44273808 .  
  67. ↑ بيدرسن، إف بي؛ هرينكزوك، جيه آر؛ شيبيل، جيه إتش؛ سورنسن، بي إل (يناير 1973). "إنتاج البول واستقلاب الجلوكوز وحمض اللاكتيك في الكلى خلال 36 ساعة من التبريد والتروية ببلازما مخففة". المجلة الإسكندنافية لأمراض المسالك البولية والكلى . 7 (1): 68-73 . doi : 10.3109/00365597309133675 . ISSN 0036-5599 . PMID 4701659 .  
  68. ↑ ماكلوغلين، جيرارد أ.؛ سيلز، روبرت أ.؛ تيريل، إيرين (مايو 1974). "تقييم تقنيات حفظ الكلى". المجلة البريطانية للجراحة . 61 (5): 406-409 . doi : 10.1002/bjs.1800610520 . PMID 4598857. S2CID 3249755 .  
  69. ↑ غلين، آي إم (1968). "أدينوسين ثلاثي الفوسفات الغشائي ونقل الكاتيونات". النشرة الطبية البريطانية . 24 (2): 165-169 . doi : 10.1093/oxfordjournals.bmb.a070620 . PMID 4231272 . 
  70. ↑ ليفي، م. ن. (1959). "استهلاك الأكسجين وتدفق الدم في الكلية المروية والمصابة بانخفاض درجة حرارة الجسم". المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء . 197 (5): 1111-1114 . doi : 10.1152/ajplegacy.1959.197.5.1111 . PMID 14416432 . 
  71. ↑ مارتن، ديفيد ر.؛ سكوت، ديفيد ف.؛ داونز، غلين ل.؛ بيلزر، فولكرت أ. (يناير 1972). " السبب الرئيسي لفشل الحفاظ على الكبد والقلب: حساسية نظام ATPase للبرودة" . حوليات الجراحة . 175 (1): 111-117 . doi : 10.1097/00000658-197201000-00017 . ISSN 0003-4932 . PMC 1355165. PMID 4258534 .   
  72. ↑ بيلزر، فولكرت أو.؛ ​​هوفمان، روبرت؛ هوانغ، جوزفين؛ داونز، غلين (أكتوبر 1972). "تلف الخلايا البطانية في كلية كلب مروية وحساسية مضخة الصوديوم والبوتاسيوم الوعائية للبرودة". علم الأحياء التجميدي . 9 (5): 457-460 . doi : 10.1016/0011-2240(72)90163-0 . PMID 4265432 . 
  73. ↑ ويليس، ج. س. (1966). "خصائص نقل الأيونات في قشرة الكلى لدى الثدييات التي تدخل في سبات شتوي" . مجلة علم وظائف الأعضاء العام . 49 (6): 1221-1239 . doi : 10.1085/jgp.0491221 . PMC 3328324. PMID 5924109 .  
  74. ↑ فرانكافيلا، أنطونيو؛ براون، ثيودور هـ.؛ فيوري، روزا؛ كاسكاردو، سيرجيو؛ تايلور، بول؛ غروث، كارل ج. (1973). "حفظ الأعضاء لزراعتها: دليل على التأثير الضار للتبريد السريع". البحوث الجراحية الأوروبية . 5 (5): 384-389 . doi : 10.1159/000127678 . ISSN 1421-9921 . PMID 4595412 .  
  75. ↑ بيرجستروم ج، كولست هـ، جروث س، هولتمان إي، ميلين ب (1971). "محتوى الماء والكهارل والمحتوى الأيضي في أنسجة القشرة الكلوية من كلى الكلاب المحفوظة بالتبريد". وقائع الجمعية الأوروبية لغسيل الكلى وزراعة الأعضاء . 8 : 313-320 .
  76. 1 2 وارنيك سي تي، لازاروس إتش إم (1979). "الحفاظ على مستويات نيوكليوتيدات الأدينين أثناء تخزين الكلى في محاليل داخل الخلايا". وقائع جمعية علم الأحياء التجريبي والطب . 160 (4): 453-457 . doi : 10.3181/00379727-160-40469 . PMID 450910. S2CID 29011354 .  
  77. ↑ بيج، د. إي؛ وستمان، م. س؛ فورمان، ج. (نوفمبر 1981). "استقلاب كلى الأرانب السليمة والمصابة بنقص التروية أثناء الإرواء لمدة 48 ساعة عند 10 درجات مئوية". زرع الأعضاء . 32 (5): 437-443 . doi : 10.1097/00007890-198111000-00020 . ISSN 0041-1337 . PMID 7330963 .  
  78. ↑ لانن، إس جي؛ توكارام، كيه تي؛ أوليفر، جيه إيه؛ ماكينون، كيه جيه؛ دوسيتور، جيه بي (مايو 1967). "تقييم الحفاظ على الكلى بواسطة مؤشر بيوكيميائي". الجراحة، أمراض النساء والتوليد . 124 (5): 999-1004 . ISSN 0039-6087 . PMID 5336874 .  
  79. 1 2 3 بيترسون، سيلاس؛ كلايس، غوران؛ شيرستين، توري (1974). "استخدام الأحماض الدهنية والجلوكوز أثناء الإرواء المستمر تحت درجة حرارة منخفضة لكلى الكلاب". البحوث الجراحية الأوروبية . 6 (2): 79-94 . doi : 10.1159/000127708 . ISSN 1421-9921 . PMID 4425410 .  
  80. ↑ لي، جيمس ب.؛ فانس، فيرنون ك.؛ كاهيل، جورج ف. (1962-07-01). "استقلاب الركائز الموسومة بالكربون-14 بواسطة قشرة ونخاع كلية الأرنب" ( ملف PDF) . المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء. المحتوى القديم . 203 (1): 27-36 . doi : 10.1152/ajplegacy.1962.203.1.27 . ISSN 0002-9513 . PMID 14463505. S2CID 33890310. مؤرشف من الأصل (ملف PDF) بتاريخ 2019-02-26.   
  81. ↑ أبوديلي، د. أ.، ولي، ج. ب. (1971). "وقود تنفس لب الكلى". المجلة الأمريكية لعلم وظائف الأعضاء . 220 (6): 1693-1700 . doi : 10.1152/ajplegacy.1971.220.6.1693 . PMID 4253387 . 
  82. ↑ هوانغ، جيه إس؛ داونز، جي إل؛ بيلزر، إف أو (سبتمبر 1971). "استخدام الأحماض الدهنية في كلية كلب مُروّى ومُصاب بانخفاض حرارة الجسم" . مجلة أبحاث الدهون . 12 (5): 622-627 . doi : 10.1016/S0022-2275(20)39482-7 . ISSN 0022-2275 . PMID 5098398 .  
  83. ↑ هوانغ، جوزفين س.؛ داونز، غلين ل.؛ تشيلدرس، غويندولين ل.؛ فيلتس، جيمس م.؛ بيلزر، فولكرت أ. (أكتوبر 1974). "أكسدة الركائز الموسومة بالكربون-14 بواسطة قشرة كلية الكلب عند 10 و38 درجة مئوية". علم الأحياء التجميدي . 11 (5): 387-394 . doi : 10.1016/0011-2240(74)90105-9 . PMID 4452273 . 
  84. ↑ لي كي واي (1971). "فقدان الدهون في الأنابيب البلاستيكية" . مجلة أبحاث الدهون . 12 (5): 635-636 . doi : 10.1016/S0022-2275(20)39484-0 . PMID 5098400 . 
  85. ↑ أبونا، جي إم؛ ليم، إف؛ كوك، جي إس؛ جروب، دبليو؛ كريج، إس إس؛ سيبل، إتش آر؛ هيوم، دي إم (مارس 1972). "حفظ الكلى في الكلاب لمدة ثلاثة أيام". الجراحة . 71 (3): 436-444 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0039-6060 . الرقم المرجعي في PubMed 4551562 .  
  86. ↑ غروندمان، ر؛ بير، ف؛ بيتشي، هـ؛ كيرشوف، ر؛ بيشلمير، هـ (مارس 1974). " حفظ كلى الكلاب لمدة 96 ساعة" . زرع الأعضاء . 17 (3): 299-305 . doi : 10.1097/00007890-197403000-00010 . ISSN 0041-1337 . PMID 4592185. S2CID 37365155 .   
  87. ↑ كولينز جي إم، هالاسز إن إيه (1976). "حفظ الكلى في الثلج لمدة 48 ساعة. أهمية محتوى الكاتيونات". الجراحة . 79 (4): 432-435 . PMID 769222 . 
  88. ↑ بيج، دي إي؛ فولر، بي جيه؛ فورمان، جيه؛ غرين، سي جيه (ديسمبر 1972). "اختيار الأنابيب البلاستيكية لتجارب إرواء الأعضاء". علم الأحياء التجميدي . 9 (6): 569-571 . doi : 10.1016/0011-2240(72)90182-4 . ISSN 0011-2240 . PMID 4658019 .  
  89. ↑ دفوراك، كينيث جيه؛ براون، ويليام إي؛ ماغنوسون، ماغنوس أو؛ ستو، نيكولاس تي؛ بانوفسكي، لين إتش دبليو (فبراير 1976). "تأثير الجرعات العالية من ميثيل بريدنيزولون على الكلية المعزولة المروية للكلاب" . زرع الأعضاء . 21 (2): 149-157 . doi : 10.1097/00007890-197602000-00010 . ISSN 0041-1337 . PMID 1251463. S2CID 29825354 .   
  90. ↑ لازاروس، هاريسون م.؛ وارنيك، سي. تيري؛ هوفنبيك، أرليني (أبريل 1982). "انكسار خيوط الحمض النووي بعد تخزين الكلى". علم الأحياء التجميدي . 19 (2): 129-135 . doi : 10.1016/0011-2240(82)90133-X . PMID 7083879 . 
  91. ↑ لازاروس إتش إم، هوبفنبك إيه (1974). " تدهور الحمض النووي أثناء التخزين". إكسبيرينتيا . 30 (12): 1410-1411 . doi : 10.1007/bf01919664 . PMID 4442530. S2CID 5240888 .  
  92. ↑ شيل، أ. ج. روس؛ دروموند، ج. مالكولم؛ بولاس، جون (أغسطس 1975). "الخثار الوعائي في الطعوم الكلوية المروية آليًا" . زرع الأعضاء . 20 (2): 178-179 . doi : 10.1097/00007890-197508000-00016 . ISSN 0041-1337 . PMID 1101485 .  
  93. ↑ كروس، دونالد إي.؛ ويتير، فريدريك سي.؛ كوباج، فرانسيس إي.؛ كراوتش، توماس؛ مانويل، يوجين إل.؛ جرانثام، جاريد جيه. (يونيو 1974). "رفض حاد للغاية لزراعة الكلى بعد الإرواء النبضي بمحلول يحتوي على أجسام مضادة نوعية" . زرع الأعضاء . 17 (6): 626-628 . doi : 10.1097/00007890-197406000-00013 . ISSN 0041-1337 . PMID 4597928 .  
  94. ↑ لايت، جيمي أ.؛ أنابل، تشارلز؛ بيرلوف، ليونارد ج.؛ سولكين، مايكل د.؛ هيل، غاري س.؛ إيثريدج، إدوارد إ.؛ سبيس، إيفريت ك. (يونيو 1975). "الضرر المناعي الناتج عن حفظ الأعضاء" . زرع الأعضاء . 19 (6): 511-516 . doi : 10.1097/00007890-197506000-00010 . ISSN 0041-1337 . S2CID 45211253 .  
  95. ↑ فيلو، آر إس؛ ديكسون، إل جي؛ سوبا، إي إيه؛ سيل، كيه دبليو (يوليو 1974). "الإصابة المناعية الناجمة عن إرواء الطعوم الكلوية الذاتية للكلاب خارج الجسم الحي". الجراحة . 76 (1): 88-100 . الرقم الدولي الموحد للدوريات 0039-6060 . الرقم المرجعي في PubMed 4601595 .  
  96. ↑ ديمبستر، دبليو جيه؛ كونتز، إس إل؛ جوفانوفيتش، إم. (15 فبراير 1964). " تقنية بسيطة لتخزين الكلى" . المجلة الطبية البريطانية . 1 (5380): 407-410 . doi : 10.1136/bmj.1.5380.407 . ISSN 0959-8138 . PMC 1813389. PMID 14085969 .