كروماتوغرافيا التيار المعاكس

📅 آخر تحديث: ٢٥ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٥ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 3 صور
الموسوعة الحرة
نظام كروماتوغرافي عالي الأداء يعمل بالتيار المعاكس

الكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس ( CCC ، وتُعرف أيضًا بالكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس ) هي نوع من الكروماتوغرافيا السائلة-السائلة ، تستخدم طورًا ثابتًا سائلًا يُثبَّت في مكانه بفعل قصور جزيئاته، حيث تتسارع هذه الجزيئات نحو مركز جهاز الطرد المركزي بفعل قوة الطرد المركزي [ 1 ]. تُستخدم هذه التقنية لفصل وتحديد وقياس المكونات الكيميائية للمزيج . وبمعناها الأوسع، تشمل الكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس مجموعة من تقنيات الكروماتوغرافيا السائلة ذات الصلة ، والتي تستخدم طورين سائلين غير قابلين للامتزاج دون وجود دعامة صلبة. [ 1 ] [ 2 ] يتلامس الطوران السائلان عند ضخ أحدهما على الأقل عبر عمود ، أو أنبوب مجوف، أو سلسلة من الحجرات المتصلة بقنوات، تحتوي على كلا الطورين. يُتيح المزج الديناميكي والترسيب الناتج فصل المكونات بناءً على ذوبانها في كل طور. يمكن استخدام مجموعة واسعة من أنظمة المذيبات ثنائية الطور، التي تتكون من سائلين غير قابلين للامتزاج على الأقل، لتوفير الانتقائية المناسبة للفصل المطلوب. [ 3 ] [ 4 ]

تتميز بعض أنواع كروماتوغرافيا التيار المعاكس، مثل كروماتوغرافيا التدفق المزدوج (CCC)، بعملية تيار معاكس حقيقية حيث يتدفق الطوران غير القابلين للامتزاج متجاوزين بعضهما البعض ويخرجان من طرفي العمود. [ 5 ] ولكن في أغلب الأحيان، يعمل سائل واحد كطور ثابت ويُحتجز في العمود بينما يُضخ الطور المتحرك من خلاله. يُثبَّت الطور الثابت السائل في مكانه بفعل الجاذبية أو قصور جزيئاته التي تتسارع نحو مركز جهاز الطرد المركزي بفعل قوة الطرد المركزي . ومن أمثلة طريقة الجاذبية كروماتوغرافيا التيار المعاكس للقطرات (DCCC). [ 6 ] هناك طريقتان لاحتجاز الطور الثابت بواسطة قوة الطرد المركزي: الهيدروستاتيكية والهيدروديناميكية . في الطريقة الهيدروستاتيكية، يُدار العمود حول محور مركزي. [ 7 ] تُسوَّق الأجهزة الهيدروستاتيكية تحت اسم كروماتوغرافيا التقسيم بالطرد المركزي (CPC) . [ 8 ] غالبًا ما يتم تسويق الأجهزة الهيدروديناميكية على أنها أجهزة كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة أو عالية الأداء (HSCCC وHPCCC على التوالي)، والتي تعتمد على قوة لولب أرخميدس في ملف حلزوني للاحتفاظ بالطور الثابت في العمود. [ 9 ]

تتشابه مكونات نظام الفصل الكروماتوغرافي الطرد المركزي (CCC) مع معظم أنظمة الكروماتوغرافيا السائلة، مثل الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC). تقوم مضخة واحدة أو أكثر بتوصيل الأطوار إلى العمود، وهو جهاز الفصل الكروماتوغرافي الطرد المركزي نفسه. تُدخل العينات إلى العمود عبر حلقة عينة مملوءة بمحقنة آلية أو يدوية. يُرصد التدفق الخارج باستخدام كواشف متنوعة، مثل مطيافية الأشعة فوق البنفسجية والمرئية أو مطيافية الكتلة . يمكن التحكم في تشغيل المضخات وجهاز الفصل الكروماتوغرافي الطرد المركزي وحقن العينات والكشف يدويًا أو باستخدام معالج دقيق.

تاريخ

كانت تقنية التوزيع بالتيار المعاكس (CCD) هي السلف لنظرية وتطبيق كروماتوغرافيا التيار المعاكس الحديثة . وقد وُصفت نظرية CCD في ثلاثينيات القرن العشرين على يد راندال ولونغتين. [ 10 ] ثم قام آرتشر مارتن وريتشارد لورانس ميلينغتون سينج بتطوير هذه المنهجية خلال أربعينيات القرن العشرين. [ 11 ] وأخيرًا، قدم ليمان سي. كريج جهاز كريج للتوزيع بالتيار المعاكس في عام 1944، مما جعل تقنية CCD عمليةً للاستخدام في المختبرات. [ 12 ] وقد استُخدمت تقنية CCD لفصل مجموعة واسعة من المركبات المفيدة لعدة عقود. [ 13 ]

الاستشراب السائل بدون دعامة

تتكون كروماتوغرافيا العمود القياسية من طور ثابت صلب وطور متحرك سائل، بينما تستخدم كروماتوغرافيا الغاز (GC) طورًا ثابتًا صلبًا أو سائلًا على دعامة صلبة وطورًا متحركًا غازيًا. في المقابل، في كروماتوغرافيا السائل-السائل، يكون كل من الطور المتحرك والثابت سائلًا. مع ذلك، فإن هذا التباين ليس واضحًا كما يبدو للوهلة الأولى. ففي كروماتوغرافيا الطور المعكوس ، على سبيل المثال، يمكن اعتبار الطور الثابت سائلًا مثبتًا بروابط كيميائية على دعامة صلبة من السيليكا ذات مسام دقيقة . أما في كروماتوغرافيا التيار المعاكس، فتثبت قوى الطرد المركزي أو الجاذبية طبقة السائل الثابتة. وبإزالة الدعامات الصلبة، يُتجنب الامتزاز الدائم للمادة المراد تحليلها على العمود، ويمكن تحقيق استخلاص عالٍ لها. [ 14 ] ويمكن تحويل جهاز كروماتوغرافيا التيار المعاكس بسهولة بين كروماتوغرافيا الطور العادي وكروماتوغرافيا الطور المعكوس بمجرد تغيير الطورين المتحرك والثابت. في كروماتوغرافيا الأعمدة، يكون مستوى الفصل محدودًا بنوعية الطور الثابت المتوفر تجاريًا وخصائصه. ويمكن استخدام أي زوج من المحاليل غير القابلة للامتزاج تقريبًا في كروماتوغرافيا التيار المعاكس، شريطة الحفاظ على الطور الثابت بنجاح.

تُعدّ تكاليف المذيبات عمومًا أقل من تكاليفها في كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC). وبالمقارنة مع كروماتوغرافيا الأعمدة، يمكن تقليل التدفقات وإجمالي استخدام المذيبات في معظم عمليات الفصل بالكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس إلى النصف، بل وحتى إلى عُشرها. [ 15 ] كما يتم الاستغناء عن تكلفة شراء والتخلص من وسائط الطور الثابت. ومن المزايا الأخرى للكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس إمكانية تطبيق التجارب المخبرية على نطاق صناعي. عند إجراء كروماتوغرافيا الغاز أو كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC) بأحجام كبيرة، تنخفض الدقة بسبب مشاكل تتعلق بنسب السطح إلى الحجم وديناميكيات التدفق؛ ويتم تجنب ذلك عندما يكون كلا الطورين سائلين. [ 16 ]

معامل التوزيع (K D )

يمكن اعتبار عملية فصل CCC عمليةً تحدث على ثلاث مراحل: الخلط، والترسيب، وفصل الطورين (مع أنها غالبًا ما تحدث بشكل مستمر). يُعدّ الخلط القوي للطورين أمرًا بالغ الأهمية لزيادة مساحة السطح البيني بينهما إلى أقصى حد وتعزيز انتقال الكتلة . يتوزع المُحلَّل بين الطورين وفقًا لمعامل توزيعه ، والذي يُسمى أيضًا معامل التوزيع، أو ثابت التوزيع ، أو نسبة التوزيع، ويُرمز له بـ P، أو K، أو D، أو K<sub>c </sub> ، أو K <sub> D</sub> . [ 17 ] معامل توزيع المُحلَّل في نظام مذيب ثنائي الطور مُحدد لا يعتمد على حجم الجهاز، أو معدل التدفق، أو نسبة حجم احتجاز الطور الثابت، أو قوة الجاذبية اللازمة لتثبيت الطور الثابت. تُعدّ درجة احتجاز الطور الثابت مُعاملًا حاسمًا. من العوامل الشائعة التي تؤثر على احتجاز الطور الثابت: معدل التدفق، وتركيب المذيب في نظام المذيب ثنائي الطور، وقوة الجاذبية . يُعبّر عن احتفاظ الطور الثابت بنسبة احتفاظ حجم الطور الثابت (Sf)، وهي حجم الطور الثابت مقسومًا على الحجم الكلي للجهاز. يُعدّ زمن الترسيب خاصيةً لنظام المذيب ومصفوفة العينة ، وكلاهما يؤثر بشكل كبير على احتفاظ الطور الثابت. [ 18 ]

بالنسبة لمعظم كيميائيي العمليات، يشير مصطلح "التيار المعاكس" إلى سائلين غير قابلين للامتزاج يتحركان في اتجاهين متعاكسين، كما هو الحال عادةً في وحدات الاستخلاص بالطرد المركزي الكبيرة . وباستثناء تقنية التدفق المزدوج (انظر أدناه) CCC، فإن معظم أنماط تشغيل كروماتوغرافيا التيار المعاكس تتكون من طور ثابت وطور متحرك. وحتى في هذه الحالة، تحدث تدفقات معاكسة داخل عمود الجهاز. [ 19 ] وقد اقترح العديد من الباحثين إعادة تسمية كل من CCC وCPC إلى كروماتوغرافيا السائل-السائل، [ 20 ] بينما يرى آخرون أن مصطلح "التيار المعاكس" نفسه تسمية غير دقيقة. [ 21 ]

على عكس كروماتوغرافيا الأعمدة وكروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC)، يمكن لمشغلي كروماتوغرافيا التيار المعاكس حقن كميات كبيرة مقارنةً بحجم العمود. [ 22 ] عادةً ما يتم حقن ما بين 5 إلى 10% من حجم الملف. وفي بعض الحالات، يمكن زيادة هذه النسبة إلى ما بين 15 إلى 20% من حجم الملف. [ 23 ] عادةً، تستطيع معظم أجهزة كروماتوغرافيا التيار المعاكس (CCC) وكروماتوغرافيا التيار المعاكس التجارية الحديثة حقن ما بين 5 إلى 40 غ/لتر. هذا النطاق واسع جدًا، حتى بالنسبة لجهاز واحد، فضلًا عن جميع خيارات الأجهزة، نظرًا لاختلاف نوع الهدف والمصفوفة والمذيب ثنائي الطور المتاح بشكل كبير. يُعدّ 10 غ/لتر قيمة نموذجية يمكن استخدامها كقيمة أساسية في معظم التطبيقات.

تبدأ عملية الفصل بالتيار المعاكس باختيار نظام مذيب ثنائي الطور مناسب للفصل المطلوب. تتوفر مجموعة واسعة من مخاليط المذيبات ثنائية الطور لممارسي تقنية الفصل بالتيار المعاكس، بما في ذلك مزيج الهكسان العادي (أو الهبتان )، وأسيتات الإيثيل ، والميثانول ، والماء بنسب مختلفة. [ 24 ] يُشار إلى نظام المذيب الأساسي هذا أحيانًا بنظام مذيب HEMWat. يمكن الاسترشاد في اختيار نظام المذيب بالاطلاع على مراجع تقنية الفصل بالتيار المعاكس. كما يمكن استخدام تقنية كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة المعروفة لتحديد نظام المذيب الأمثل. [ 25 ] وقد سهّل تصنيف أنظمة المذيبات إلى "مجموعات" عملية اختيارها بشكل كبير. [ 26 ] يمكن اختبار نظام المذيب من خلال تجربة تجزئة في قارورة واحدة. سيشير معامل التجزئة المقاس من تجربة التجزئة إلى سلوك الإذابة للمركب. يُفضّل عادةً اختيار نظام مذيب يكون فيه معامل التوزيع للمركب (أو المركبات) المستهدفة بين 0.25 و8. [ 27 ] تاريخيًا، كان يُعتقد أنه لا يوجد جهاز كروماتوغرافيا تيار معاكس تجاري قادر على التعامل مع اللزوجة العالية للسوائل الأيونية . مع ذلك، أصبحت الأجهزة الحديثة التي تستوعب من 30 إلى 70 % أو أكثر من السوائل الأيونية (وربما 100% منها، إذا كانت كلتا المرحلتين سوائل أيونية مُخصصة بشكل مناسب) متاحة. [ 28 ] يمكن تخصيص السوائل الأيونية لفصل المركبات العضوية القطبية وغير القطبية، والمركبات الكيرالية وغير الكيرالية ، والجزيئات الحيوية، والمواد غير العضوية، حيث يمكن تخصيصها لتتمتع بقدرة إذابة وخصوصية استثنائية. [ 29 ] 

بعد اختيار نظام المذيب ثنائي الطور، تُحضّر دفعة من المحلول وتُعادَل في قمع فصل . تُسمى هذه الخطوة بالمعادلة المسبقة لنظام المذيب. يتم فصل الطورين، ثم يُملأ العمود بالطور الثابت باستخدام مضخة. بعد ذلك، يُضبط العمود على ظروف المعادلة، مثل سرعة الدوران المطلوبة، ويُضخ الطور المتحرك عبر العمود. يُزيح الطور المتحرك جزءًا من الطور الثابت حتى يتحقق توازن العمود، ثم يخرج الطور المتحرك من العمود. يمكن إدخال العينة إلى العمود في أي وقت أثناء خطوة معادلة العمود أو بعد اكتمال المعادلة. عندما يتجاوز حجم المذيب حجم الطور المتحرك في العمود، تبدأ مكونات العينة بالخروج. تخرج المركبات ذات معامل التوزيع الواحد عندما يمر حجم عمود كامل من الطور المتحرك عبر العمود منذ وقت الحقن. يمكن بعد ذلك إدخال المركب إلى طور ثابت آخر للمساعدة في زيادة دقة النتائج . [ 30 ] يتوقف التدفق بعد فصل المركب (المركبات) المستهدف أو بعد إخراج العمود عن طريق ضخ الطور الثابت عبره. ومن الأمثلة على التطبيقات الرئيسية للكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس، أخذ مصفوفة معقدة للغاية، مثل مستخلص نباتي، وإجراء فصل الكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس باستخدام نظام مذيبات مُختار بعناية، ثم إخراج العمود لاستخلاص العينة بالكامل. ستكون المصفوفة المعقدة الأصلية قد فُصلت إلى نطاقات قطبية ضيقة منفصلة ، ​​والتي يمكن بعد ذلك تحليل تركيبها الكيميائي أو نشاطها البيولوجي. إن إجراء فصل واحد أو أكثر بالكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس بالتزامن مع تقنيات كروماتوغرافية وغير كروماتوغرافية أخرى، لديه القدرة على تحقيق تقدم سريع في التعرف على تركيب المصفوفات المعقدة للغاية. [ 31 ] [ 32 ]

قطرة CCC

طُوِّرت تقنية كروماتوغرافيا التيار المعاكس بالقطرات (DCCC) عام 1970 على يد تانيمورا، وبيسانو، وإيتو، وبومان. [ 33 ] تعتمد هذه التقنية على الجاذبية فقط لتحريك الطور المتحرك عبر الطور الثابت الموجود في أنابيب رأسية طويلة موصولة على التوالي. في الوضع الهابط، تسقط قطرات الطور المتحرك الأكثر كثافة والعينة عبر أعمدة الطور الثابت الأخف بفعل الجاذبية فقط. أما في حال استخدام طور متحرك أقل كثافة، فإنه يرتفع عبر الطور الثابت؛ ويُسمى هذا الوضع بالوضع الصاعد. يُنقل المذيب من عمود إلى آخر؛ وكلما زاد عدد الأعمدة المستخدمة، زاد عدد الصفائح النظرية التي يمكن الحصول عليها. حققت تقنية DCCC بعض النجاح في فصل المنتجات الطبيعية، لكنها تراجعت شعبيتها بشكل كبير أمام التطور السريع لكروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة. [ 34 ] يتمثل القيد الرئيسي لتقنية DCCC في انخفاض معدلات التدفق، وضعف المزج في معظم أنظمة المذيبات الثنائية.

CCC الهيدروديناميكي

بدأ العصر الحديث لتقنية الفصل الكروماتوغرافي بالتيار المعاكس (CCC) مع تطوير جهاز الطرد المركزي الكوكبي على يد الدكتور يويتشيرو إيتو، والذي طُرح لأول مرة عام 1966 على شكل أنبوب حلزوني مغلق يدور حول محور "كوكبي" كما يدور حول محور "شمسي". [ 35 ] ثم طُوّر نموذج التدفق المستمر، وأُطلق على هذه التقنية الجديدة اسم كروماتوغرافيا التيار المعاكس عام 1970. [ 2 ] وجرى تطوير هذه التقنية لاحقًا باستخدام مخاليط اختبارية من أحماض DNP الأمينية في نظام مذيب مكون من الكلوروفورم وحمض الخليك الجليدي وحمض الهيدروكلوريك المائي بتركيز 0.1 مولار (بنسبة 2:2:1 حجم/حجم). [ 36 ] تطلّب الأمر تطويرًا كبيرًا لتصميم الجهاز بحيث يُمكن الحفاظ على الحركة الكوكبية المطلوبة أثناء ضخ الأطوار عبر الملف (الملفات). [ 37 ] ودُرست معايير مثل الدوران النسبي للمحورين (متزامن أو غير متزامن)، واتجاه التدفق عبر الملف، وزوايا الدوار. [ 38 ] [ 39 ]

سرعة عالية

بحلول عام ١٩٨٢، كانت التقنية قد تطورت بما يكفي لتُسمى تقنية كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة (HSCCC). [ ٤٠ ] [ ٤١ ] قام بيتر كارميسي في البداية بتسويق جهاز PC Inc. Ito Multilayer Coil Separator/Extractor الذي يستخدم بكرة واحدة (يُلف عليها الملف) وثقل موازن، بالإضافة إلى مجموعة من "الأسلاك الطائرة" وهي أنابيب تربط البكرات. [ ٤٢ ] قام الدكتور والتر كونواي وآخرون لاحقًا بتطوير تصميم البكرة بحيث يمكن وضع ملفات متعددة، حتى ملفات بأحجام أنابيب مختلفة، على البكرة الواحدة. [ ٤٣ ] قام إدوارد تشو لاحقًا بتطوير وتسويق تصميم ثلاثي البكرات تحت اسم Pharmatech CCC، والذي يحتوي على آلية فك التواء للأسلاك بين البكرات الثلاث. [ 44 ] طوّر جهاز Quattro CCC، الذي طُرح عام 1993، الأجهزة المتوفرة تجاريًا باستخدام تصميم مبتكر ذي بكرتين متطابقتين، لا يحتاج إلى آلية فك الالتواء الموجودة في جهاز Pharmatech بين البكرات المتعددة، مما يسمح باستخدام بكرات متعددة على نفس الجهاز. [ 45 ] تتوفر الآن أجهزة CCC الهيدروديناميكية بما يصل إلى 4 ملفات لكل جهاز. يمكن أن تكون هذه الملفات مصنوعة من أنابيب PTFE أو PEEK أو PVDF أو الفولاذ المقاوم للصدأ . يمكن أن تكون الملفات (2 أو 3 أو 4) بنفس القطر الداخلي لتسهيل عملية CCC ثنائية الأبعاد (انظر أدناه). يمكن توصيل الملفات على التوالي لزيادة طولها وسعة الجهاز، أو على التوازي لإجراء عمليتي فصل أو ثلاث أو أربع عمليات فصل في وقت واحد. كما يمكن أن تكون الملفات بأحجام مختلفة على الجهاز الواحد، تتراوح من 1 إلى 6 مم، مما يسمح للجهاز الواحد بتحسين معدلات الاستخلاص من ملليغرامات إلى كيلوغرامات يوميًا. في الآونة الأخيرة، تم طرح مشتقات الأجهزة المزودة بأختام دوارة لتصاميم CCC الهيدروديناميكية المختلفة، بدلاً من الأسلاك الطائرة، سواء كخيارات مخصصة أو قياسية. [ 46 ] [ 47 ] [ 48 ] [ 49 ] [ 50 ]

أداء عالٍ

يعتمد مبدأ تشغيل أجهزة كروماتوغرافيا التيار المعاكس (CCC) على عمود يتكون من أنبوب ملفوف حول بكرة. تدور البكرة بحركة دورانية ثنائية المحور ( قلبية الشكل )، مما يُولّد قوة جاذبية متغيرة تؤثر على العمود خلال كل دورة. تُؤدي هذه الحركة إلى فصل مكونات العينة في العمود مرة واحدة لكل دورة، وذلك تبعًا لمعامل توزيعها بين الطورين السائلين غير القابلين للامتزاج. تعمل كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية الأداء (HPCCC) بطريقة مشابهة لكروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة (HSCCC). وقد أسفرت عملية بحث وتطوير استمرت سبع سنوات عن إنتاج أجهزة HPCCC تُولّد قوة جاذبية تصل إلى 240 ضعف قوة الجاذبية الأرضية، مقارنةً بـ 80 ضعف قوة الجاذبية الأرضية لأجهزة HSCCC. وقد مكّنت هذه الزيادة في قوة الجاذبية الأرضية وقطر العمود الأكبر من زيادة الإنتاجية عشرة أضعاف، وذلك بفضل تحسين معدلات تدفق الطور المتحرك وزيادة احتفاظ الطور الثابت. [ 51 ] تُعدّ كروماتوغرافيا التيار المعاكس تقنيةً من تقنيات كروماتوغرافيا السائل التحضيرية، إلا أنه مع ظهور أجهزة كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية الأداء (HPCCC) ذات السعة العالية، أصبح من الممكن الآن تشغيل هذه الأجهزة بكميات عينات منخفضة تصل إلى بضعة ملليغرامات، بينما كان من الضروري في السابق استخدام مئات المليغرامات. تشمل مجالات التطبيق الرئيسية لهذه التقنية تنقية المنتجات الطبيعية وتطوير الأدوية. [ 52 ]

CCC الهيدروستاتيكي

تم اختراع تقنية الفصل الكروماتوغرافي بالطرد المركزي الهيدروستاتيكي (CPC) في ثمانينيات القرن الماضي من قبل شركة سانكي الهندسية اليابانية، التي كان يرأسها آنذاك كانيتشي نونوغاكي. [ 8 ] [ 53 ] وشهدت هذه التقنية تطورًا واسع النطاق في فرنسا بدءًا من أواخر التسعينيات. في فرنسا، تم في البداية تحسين مفهوم الأقراص المتراصة الذي ابتكرته سانكي. ومؤخرًا، في فرنسا والمملكة المتحدة، تم تطوير تكوينات CPC غير المتراصة باستخدام دوارات مصنوعة من مادة PTFE أو الفولاذ المقاوم للصدأ أو التيتانيوم . صُممت هذه التكوينات للتغلب على التسريبات المحتملة بين الأقراص المتراصة في التصميم الأصلي، وللسماح بالتنظيف بالبخار كجزء من ممارسات التصنيع الجيدة . تتوفر أحجام تتراوح من 100 مل إلى 12 لترًا بمواد دوارة مختلفة. يحتوي جهاز CPC ذو الدوار سعة 25 لترًا على دوار من التيتانيوم. [ 54 ] تُباع هذه التقنية أحيانًا تحت اسم "CPC السريع" أو "CPC عالي الأداء".

تحقيق

يتكون جهاز كروماتوغرافيا الفصل بالطرد المركزي من دوار فريد يحتوي على العمود. يدور هذا الدوار حول محوره المركزي (بينما يدور عمود كروماتوغرافيا الفصل بالطرد المركزي عالي السرعة (HSCCC) حول محوره الكوكبي، ويدور في الوقت نفسه بشكل لا مركزي حول محور شمسي آخر). يوفر جهاز كروماتوغرافيا الفصل بالطرد المركزي (CPC) نطاق سرعة دوران نموذجي يتراوح بين 500 و2000 دورة في الدقيقة، مع اهتزازات وضوضاء أقل. على عكس كروماتوغرافيا الفصل بالطرد المركزي الهيدروديناميكية (CCC)، لا تتناسب سرعة الدوران تناسبًا طرديًا مع نسبة حجم الاحتفاظ للطور الثابت. وكما هو الحال في كروماتوغرافيا الفصل بالطرد المركزي الديناميكية (DCCC)، يمكن تشغيل جهاز كروماتوغرافيا الفصل بالطرد المركزي (CPC) في وضع تنازلي أو تصاعدي، حيث يكون الاتجاه نسبيًا للقوة المتولدة من الدوار وليس للجاذبية. وقد أُطلق على عمود كروماتوغرافيا الفصل بالطرد المركزي (CPC) المُعاد تصميمه، والذي يحتوي على حجرات وقنوات أكبر، اسم استخلاص الفصل بالطرد المركزي (CPE). [ 55 ] في تصميم CPE، يمكن تحقيق معدلات تدفق أسرع وزيادة في تحميل العمود.

المزايا

تصوير عملية الاختلاط والترسيب في خلية توأمية من نوع CPC

توفر تقنية CPC إمكانية التوسع المباشر من الأجهزة التحليلية (بضعة ملليلترات) إلى الأجهزة الصناعية (عدة لترات) لإنتاج دفعات سريعة. ويبدو أن تقنية CPC مناسبة بشكل خاص لأنظمة المذيبات ثنائية الطور المائية. [ 56 ] عمومًا، تستطيع أجهزة CPC الاحتفاظ بأنظمة المذيبات التي لا يمكن الاحتفاظ بها جيدًا في الأجهزة الهيدروديناميكية نظرًا لاختلافات الكثافة الطفيفة بين الأطوار. [ 57 ] وقد كان من المفيد جدًا لتطوير أجهزة CPC تصوير أنماط التدفق التي تؤدي إلى الخلط والترسيب في حجرة CPC باستخدام كاميرا غير متزامنة وجهاز ستروبوسكوب يتم تشغيله بواسطة دوار CPC. [ 58 ]

أنماط التشغيل

يمكن استخدام الأجهزة الهيدروديناميكية والهيدروستاتيكية المذكورة آنفًا بطرقٍ أو أنماط تشغيلٍ متنوعة لتلبية احتياجات الفصل الخاصة بالباحث. وقد طُوّرت أنماط تشغيلٍ عديدة للاستفادة من مزايا وإمكانيات تقنية كروماتوغرافيا التيار المعاكس. وبشكلٍ عام، يمكن تنفيذ الأنماط التالية باستخدام الأجهزة المتوفرة تجاريًا.

المرحلة الطبيعية

يتم تحقيق الإذابة في الطور العادي عن طريق ضخ الطور غير المائي أو طور نظام المذيبات ثنائي الطور عبر العمود كطور متحرك، مع احتفاظ العمود بطور ثابت أكثر قطبية. ويُعد سبب التسمية الأصلية ذا صلة. فمع استبدال الأطوار الثابتة الأصلية لكروماتوغرافيا الورق بمواد أكثر كفاءة مثل التراب الدياتومي (السيليكا الطبيعية ذات المسام الدقيقة)، ثم بهلام السيليكا الحديث ، أصبح الطور الثابت في كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة قطبيًا (مجموعات هيدروكسيل مرتبطة بالسيليكا)، وتم تحقيق أقصى قدر من الاحتفاظ باستخدام مذيبات غير قطبية مثل الهكسان العادي . ثم استُخدمت مذيبات أكثر قطبية تدريجيًا لتحريك المركبات القطبية لأعلى الصفيحة. وجُرِّبت أطوار مختلفة مرتبطة بالألكان ، وأصبح C18 الأكثر شيوعًا. ارتبطت سلاسل الألكان كيميائيًا بالسيليكا، مما أدى إلى انعكاس اتجاه الإذابة. وهكذا أصبحت الكروماتوغرافيا ذات الطور الثابت القطبي "عادية" ، وأصبحت الكروماتوغرافيا ذات الطور الثابت غير القطبي "معكوسة" .

الطور المعكوس

في عملية الإذابة ذات الطور المعكوس (مثل الطور المتحرك المائي)، يُستخدم الطور المائي كطور متحرك مع طور ثابت أقل قطبية. أما في كروماتوغرافيا التيار المعاكس، فيمكن استخدام نظام المذيبات نفسه في وضع الطور العادي أو المعكوس ببساطة عن طريق عكس اتجاه تدفق الطور المتحرك عبر العمود.

الاستخلاص بالبثق

قبل ظهور مصطلح EECCC، كان ممارسو تقنية الفصل اللوني الطردي (CCC) يستخدمون طريقة طرد الطور الثابت من العمود في نهاية تجربة الفصل، وذلك بإيقاف الدوران وضخ المذيب أو الغاز عبر العمود. [ 59 ] في نمط الطرد بالطرد (EECCC)، يُطرد الطور المتحرك بعد نقطة معينة عن طريق تغيير الطور الذي يُضخ إلى النظام مع الحفاظ على الدوران. [ 60 ] على سبيل المثال، إذا بدأ الفصل باستخدام الطور المائي كطور متحرك، فعند نقطة معينة يُضخ الطور العضوي عبر العمود، مما يؤدي فعليًا إلى طرد كلا الطورين الموجودين في العمود وقت التغيير. تُغسل العينة بالكامل بترتيب القطبية (سواءً كان عاديًا أو معكوسًا) دون فقدان الدقة بسبب الانتشار. لا يتطلب الأمر سوى حجم عمود واحد من طور المذيب، ويترك العمود ممتلئًا بطور ثابت جديد للفصل اللاحق. [ 61 ]

تدرج

يُعدّ استخدام تدرج المذيب تقنيةً متطورةً في كروماتوغرافيا الأعمدة، ولكنه أقل شيوعًا في كروماتوغرافيا الطور الثابت (CCC). يُنتج تدرج المذيب عن طريق زيادة (أو تقليل) قطبية الطور المتحرك أثناء الفصل لتحقيق فصل مثالي عبر نطاق أوسع من القطبية . على سبيل المثال، يمكن استخدام تدرج طور متحرك من الميثانول والماء باستخدام الهبتان كطور ثابت. لا يُمكن تطبيق ذلك على جميع أنظمة المذيبات ثنائية الطور، نظرًا للفقدان المفرط للطور الثابت الناتج عن اضطراب ظروف التوازن داخل العمود. يمكن إنتاج التدرجات إما على مراحل، [ 62 ] أو بشكل مستمر. [ 63 ]

الوضع المزدوج

في الوضع المزدوج، يتم عكس طوري الحركة والثبات جزئيًا أثناء عملية الفصل. يتطلب ذلك تغيير الطور الذي يُضخ عبر العمود، بالإضافة إلى تغيير اتجاه التدفق. [ 64 ] من المرجح أن يؤدي التشغيل بالوضع المزدوج إلى إخراج العينة بأكملها من العمود، ولكن ترتيب الإخراج يختلّ نتيجةً لتغيير الطور واتجاه التدفق.

تدفق مزدوج

تحدث كروماتوغرافيا التدفق المزدوج، والمعروفة أيضًا باسم كروماتوغرافيا التيار المعاكس المزدوج، عندما يتدفق كلا الطورين في اتجاهين متعاكسين داخل العمود. تتوفر أجهزة للتشغيل بالتدفق المزدوج لكل من كروماتوغرافيا التيار المعاكس الهيدروديناميكية والهيدروستاتيكية. وصف يويتشيرو إيتو كروماتوغرافيا التيار المعاكس ذات التدفق المزدوج لأول مرة عام 1985 في كروماتوغرافيا التيار المعاكس الرغوية، حيث تم إجراء فصل الغاز عن السائل. [ 65 ] وسرعان ما تبع ذلك فصل السائل عن السائل. [ 66 ] يجب تعديل جهاز كروماتوغرافيا التيار المعاكس بحيث يكون لكلا طرفي العمود مدخل ومخرج. يتيح هذا الوضع إجراء عمليات فصل مستمرة أو متتابعة، حيث يتم إدخال العينة في منتصف العمود أو بين بكرتين في الجهاز الهيدروديناميكي. [ 67 ] تُعد تقنية الاستخلاص بالتيار المعاكس المتقطع (ICcE) طريقة شبه مستمرة، حيث يتم تبديل تدفق الأطوار "بشكل متقطع" بين الإذابة بالطور العادي والإذابة بالطور المعكوس، بحيث يتبادل الطور الثابت أيضًا. [ 68 ]

إعادة التدوير والتسلسل

تُعدّ كروماتوغرافيا إعادة التدوير أسلوبًا شائعًا في كلٍّ من كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC ) [ 69 ] وكروماتوغرافيا الطرد المركزي (CCC) [ 70 ] . في كروماتوغرافيا إعادة التدوير، تُعاد المركبات المستهدفة إلى العمود بعد خروجها منه. كل مرور عبر العمود يزيد من عدد الصفائح النظرية التي تمر بها المركبات، مما يُحسّن الفصل الكروماتوغرافي. يجب إجراء إعادة التدوير المباشر باستخدام نظام مذيب متساوي التركيز. في هذا الأسلوب، يُمكن إعادة كروماتوغرافيا المُذيب بشكل انتقائي على نفس العمود أو عمود آخر لتسهيل الفصل [ 71 ] . تُعرف عملية إعادة التدوير الانتقائية هذه باسم "القطع القلبي"، وهي فعّالة بشكل خاص في تنقية مركبات مستهدفة مُحددة مع بعض الفقد الطفيف في الاستخلاص [ 72 ] . لطالما مارس العلماء عملية إعادة فصل أجزاء مُحددة من تجربة كروماتوغرافية باستخدام طريقة كروماتوغرافية أخرى. تُعدّ كروماتوغرافيا إعادة التدوير والتسلسل نسخة مُبسّطة من هذه العملية. في تقنية الفصل الطردي المركزي (CCC)، يمكن تعديل خصائص الفصل للعمود ببساطة عن طريق تغيير تركيبة نظام المذيب ثنائي الطور. [ 73 ]

التبادل الأيوني والتنقية في نطاق الأس الهيدروجيني

في تجربة CCC التقليدية، يُجرى توازن مسبق لنظام المذيب ثنائي الطور قبل ملء الجهاز بالطور الثابت وموازنته مع الطور المتحرك. وقد تم إنشاء نمط التبادل الأيوني بتعديل كلا الطورين بعد التوازن المسبق. [ 74 ] عمومًا، يُضاف مُزيح أيوني (أو مُذيب) إلى الطور المتحرك، ويُضاف مُحتفظ أيوني إلى الطور الثابت. على سبيل المثال، قد يحتوي الطور المتحرك المائي على يوديد الصوديوم (NaI) كمُزيح، بينما يُعدّل الطور الثابت العضوي بملح الأمونيوم الرباعي المعروف باسم أليكوات 336 كمُحتفظ. [ 75 ] يُعرف نمط تكرير منطقة الأس الهيدروجيني بأنه نوع من أنماط التبادل الأيوني التي تستخدم الأحماض و/أو القواعد كمُعدِّلات للمذيب. [ 76 ] عادةً، تُفصل المواد المراد تحليلها بترتيب يُحدده قيم pKa الخاصة بها . على سبيل المثال، تم عزل ستة قلويدات أوكسيندول من عينة وزنها 4.5 غرام من مستخلص ساق نبات جيلسيميوم إليغانس باستخدام نظام مذيب ثنائي الطور مكون من الهكسان، وأسيتات الإيثيل، والميثانول، والماء (3:7:1:9، حجم/حجم)، حيث أُضيف 10 ملي مول من ثلاثي إيثيل أمين (TEA) إلى الطور العضوي الثابت العلوي كعامل احتجاز، و10 ملي مول من حمض الهيدروكلوريك (HCl) إلى الطور المتحرك المائي كعامل إزالة. [ 77 ] تتمتع طرق التبادل الأيوني، مثل التكرير النطاقي للأس الهيدروجيني، بإمكانيات هائلة نظرًا لإمكانية تحقيق أحمال عينات عالية دون التضحية بقدرة الفصل. وهي تعمل بشكل أفضل مع المركبات القابلة للتأين، مثل القلويدات المحتوية على النيتروجين أو الأحماض الدهنية المحتوية على حمض الكربوكسيل. [ 78 ]

التطبيقات

استُخدمت تقنية كروماتوغرافيا التيار المعاكس وتقنيات الفصل السائل-السائل ذات الصلة على نطاق صناعي ومختبري لتنقية مجموعة واسعة من المواد الكيميائية. تشمل تطبيقات الفصل البروتينات، [ 79 ] والحمض النووي DNA، [ 80 ] ومركب الكانابيديول (CBD) المستخلص من نبات القنب ساتيفا ، [ 81 ] والمضادات الحيوية، [ 82 ] والفيتامينات، [ 83 ] والمنتجات الطبيعية ، [ 31 ] والمستحضرات الصيدلانية، [ 52 ] وأيونات المعادن، [ 84 ] والمبيدات الحشرية، [ 85 ] والمتماثلات الضوئية ، [ 86 ] والهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات من العينات البيئية، [ 87 ] والإنزيمات النشطة، [ 88 ] وأنابيب الكربون النانوية . [ 89 ] وتُعرف كروماتوغرافيا التيار المعاكس بنطاقها الديناميكي العالي وقابليتها للتوسع، حيث يمكن الحصول على كميات من المكونات الكيميائية النقية تتراوح من المليغرام إلى الكيلوغرام باستخدام هذه التقنية. [ 90 ] كما أن لها ميزة استيعاب العينات المعقدة كيميائيا التي تحتوي على جزيئات غير ذائبة.

انظر أيضاً

مراجع

  1. 1 2 بيرثود، آلان؛ ماريوتينا، تاتيانا؛ سبيفاكوف، بوريس؛ شبيغون، أوليغ؛ ساذرلاند، إيان أ. (2009). "الكروماتوغرافيا المعاكسة في الكيمياء التحليلية (تقرير فني من الاتحاد الدولي للكيمياء البحتة والتطبيقية)" (ملف PDF) . الكيمياء البحتة والتطبيقية . 81 (2): 355-387 . doi : 10.1351/PAC-REP-08-06-05 . ISSN 1365-3075 . S2CID 28365063 .  
  2. 1 2 إيتو، ي.؛ باومان، ر. ل. (1970). "الكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس: كروماتوغرافيا تقسيم السائل-السائل بدون دعامة صلبة". مجلة ساينس . 167 (3916): 281-283 . Bibcode : 1970Sci...167..281I . doi : 10.1126/science.167.3916.281 . PMID 5409709. S2CID 21803257 .  
  3. ↑ يويتشيرو إيتو؛ والتر د. كونواي، محرران (1996). كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة . التحليل الكيميائي. نيويورك: جون وايلي. ISBN 978-0-471-63749-3.
  4. ↑ ليو، يانغ؛ فريزن، ج. برنت؛ ماكابلين، جيمس ب.؛ باولي، غيدو ف. (2015). "استراتيجيات اختيار نظام المذيب في الفصل بالتيار المعاكس" . بلانتا ميديكا . 81 (17): 1582-1591 . Bibcode : 2015PlMed..81.1582L . doi : 10.1055/s-0035-1546246 . PMC 4679665. PMID 26393937 .  
  5. ^ إيتو ، يوكو. غوتو، تومومي؛ يامادا، ساداجي؛ ماتسوموتو، هيروشي؛ أوكا، هيساو؛ تاكاهاشي، نوبويوكي؛ ناكازاوا، هيرويوكي؛ ناجاسي، هيساميتسو؛ إيتو، يويتشيرو (2006). "تطبيق اللوني المزدوج المضاد للتيار للتحضير السريع لعينات مبيدات N-ميثيل كارباميت في الزيوت النباتية والحمضيات". مجلة اللوني أ . 1108 (1): 20-25 . دوى : 10.1016/j.chroma.2005.12.070 . بميد 16445929 . 
  6. ↑ تانيمورا، تاكينوري؛ بيسانو، جون جيه؛ إيتو، يويتشيرو؛ بومان، روبرت إل. (1970). "كروماتوغرافيا التيار المعاكس للقطرات". مجلة ساينس . 169 (3940): 54-56 . Bibcode : 1970Sci...169...54T . doi : 10.1126/science.169.3940.54 . PMID 5447530. S2CID 32380725 .  
  7. ↑ فوكو، آلان ب. (1994). كروماتوغرافيا التقسيم بالطرد المركزي . سلسلة علوم الكروماتوغرافيا، المجلد 68. مطبعة سي آر سي. رقم ISBN 978-0-8247-9257-2.
  8. 1 2 مارشال، لوك؛ ليجراند، جاك؛ فوكو، آلان (2003). "الكروماتوغرافيا التقسيمية بالطرد المركزي: مسح لتاريخها، وأحدث التطورات في هذا المجال". السجل الكيميائي . 3 (3): 133-143 . doi : 10.1002/tcr.10057 . PMID 12900934 . 
  9. ↑ إيتو، يويتشيرو (2005). "القواعد الذهبية والمزالق في اختيار الظروف المثلى لكروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1065 (2): 145-168 . doi : 10.1016/j.chroma.2004.12.044 . PMID 15782961 . 
  10. ↑ راندال، ميرل؛ لونغتين، بروس (1938). "عمليات الفصل: طريقة عامة للتحليل". الكيمياء الصناعية والهندسية . 30 (9): 1063-1067 . doi : 10.1021/ie50345a028 .
  11. ↑ مارتن، أ. ج. ب.؛ سينج، ر. ل. م. (1941). "فصل الأحماض الأمينية الأحادية العليا بالاستخلاص السائل-السائل بالتيار المعاكس: تركيب الأحماض الأمينية في الصوف" . مجلة الكيمياء الحيوية . 35 ( 1-2 ): 91-121 . doi : 10.1042/bj0350091 . PMC 1265473. PMID 16747393 .  
  12. ↑ ليمان سي. كريج (1944). "تحديد كميات صغيرة من المركبات العضوية عن طريق دراسات التوزيع: الجزء الثاني. الفصل بالتوزيع المعاكس للتيار". مجلة الكيمياء البيولوجية . 155 : 535-546 .
  13. ↑ كيمورا، يوكيو؛ كيتامورا، هيسامي؛ هاياشي، كيوزو (1982). "طريقة لفصل مركب الكوليستين التجاري إلى مكونات جديدة: كوليستين برو-أ، وبرو-ب، وبرو-ج" . مجلة المضادات الحيوية . 35 (11): 1513-1520 . doi : 10.7164/antibiotics.35.1513 . PMID 7161191 . 
  14. ↑ إيان أ. ساذرلاند (2007). "التقدم الأخير في التوسع الصناعي لتقنية كروماتوغرافيا التيار المعاكس". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1151 ( 1-2 ): 6-13 . doi : 10.1016/j.chroma.2007.01.143 . PMID 17386930 . 
  15. ↑ دي أميسيس، كارل؛ إدواردز، نيل أ.؛ جايلز، مايكل ب.؛ هاريس، جاي هـ.؛ هيويتسون، بيتر؛ جاناواي، لي؛ إغناتوفا، سفيتلانا (2011). "مقارنة بين كروماتوغرافيا السائل التحضيرية ذات الطور المعكوس وكروماتوغرافيا التيار المعاكس لتنقية مبيد سبينيتورام الخام بكميات كيلوغرامية". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1218 (36): 6122-6127 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.06.073 . PMID 21763662 . 
  16. ↑ هاو ليانغ؛ كويجوان لي؛ تشيبينغ يوان؛ فرانك فريزيكوب (2008). "تطبيق كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالي السرعة لعزل السلفورافان من مسحوق بذور البروكلي". مجلة الكيمياء الزراعية والغذائية . 56 (17): 7746-7749 . Bibcode : 2008JAFC...56.7746L . doi : 10.1021/jf801318v . PMID 18690688 . 
  17. ↑ كونواي، والتر د. (2011). "الكروماتوغرافيا بالتيار المعاكس: عملية بسيطة ومصطلحات مربكة". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1218 (36): 6015-6023 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.03.056 . PMID 21536295 . 
  18. ↑ يويتشيرو إيتو (2005). "القواعد الذهبية والمزالق في اختيار الظروف المثلى لكروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1065 (2): 145-168 . doi : 10.1016/j.chroma.2004.12.044 . PMID 15782961 . 
  19. ↑ إيتو، يويتشيرو (2014). "الحركة المعاكسة في كروماتوغرافيا التيار المعاكس" . مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1372 : 128-132 . doi : 10.1016 / j.chroma.2014.09.033 . PMC 4250308. PMID 25301393 .  
  20. ↑ براون، ليزلي؛ لو، ترينه أ. (2010). "مقدمة للمناقشات حول منهجيات اختيار المذيب ثنائي الطور وأجهزة كروماتوغرافيا الفصل السائل-السائل/التيار المعاكس/الطرد المركزي لتحضير المركبات المستهدفة من المصفوفات المعقدة". مجلة علوم الفصل . 33 (8): 999-1003 . doi : 10.1002/jssc.200900814 . PMID 20175092 . 
  21. ↑ بيرثود، آلان (2014). "تعليقات على مقال "الحركة المعاكسة في كروماتوغرافيا التيار المعاكس" ليويتشيرو إيتو". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1372 : 260-261 . doi : 10.1016/j.chroma.2014.10.103 . PMID 25465023 . 
  22. ↑ ساذرلاند، إيان أ. (2007). "التقدم الأخير في التوسع الصناعي لتقنية كروماتوغرافيا التيار المعاكس". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1151 ( 1-2 ): 6-13 . doi : 10.1016/j.chroma.2007.01.143 . PMID 17386930 . 
  23. ↑ إغناتوفا، سفيتلانا؛ وود، فيليب؛ هاوز، ديفيد؛ جاناواي، لي؛ كي، ديفيد؛ ساذرلاند، إيان (2007). "جدوى التوسع من المرحلة التجريبية إلى مرحلة الإنتاج". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1151 ( 1-2 ): 20-24 . doi : 10.1016/j.chroma.2007.02.084 . PMID 17383663 . 
  24. ↑ فريزن، ج. برنت؛ باولي، غيدو ف. (2008). "خصائص أداء الفصل بالتيار المعاكس في تحليل المنتجات الطبيعية ذات الأهمية الزراعية". مجلة الكيمياء الزراعية والغذائية . 56 (1): 19-28 . Bibcode : 2008JAFC...56...19F . doi : 10.1021/jf072415a . PMID 18069794 . 
  25. ↑ برنت فريزن، ج.؛ باولي، غيدو ف. (2005). "GUESS - تقدير مفيد عمومًا لأنظمة المذيبات في كروماتوغرافيا الطرد المركزي". مجلة كروماتوغرافيا السوائل والتقنيات ذات الصلة . 28 (17): 2777-2806 . doi : 10.1080/10826070500225234 . S2CID 93207587 . 
  26. ↑ فريزن، ج. برنت؛ باولي، غيدو ف. (2007). "التطوير العقلاني لعائلات أنظمة المذيبات في كروماتوغرافيا التيار المعاكس". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1151 ( 1-2 ): 51-59 . Bibcode : 2007JChA.1151...51F . doi : 10.1016/j.chroma.2007.01.126 . PMID 17320092 . 
  27. ↑ فريزن، ج. برنت؛ باولي، غيدو ف. (2009). "تحسين فصل التيار المعاكس بالاستخلاص والبثق باستخدام برنامج GUESSmix". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1216 (19): 4225-4231 . doi : 10.1016/j.chroma.2008.12.053 . PMID 19135676 . 
  28. ↑ بيرثود، أ.؛ كاردا-بروش، س. (2004). "استخدام السائل الأيوني 1-بيوتيل-3-ميثيل إيميدازوليوم سداسي فلوروفوسفات في كروماتوغرافيا التيار المعاكس". الكيمياء التحليلية والكيمياء الحيوية التحليلية . 380 (1): 168-177 . doi : 10.1007/s00216-004-2717-8 . PMID 15365674. S2CID 37856161 .  
  29. ↑ بيرثود، أ.؛ رويز-أنجيل، م. ج.؛ كاردا-بروش، س. (2008). "السوائل الأيونية في تقنيات الفصل". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1184 ( 1-2 ): 6-18 . Bibcode : 2008JChA.1184....6B . doi : 10.1016/j.chroma.2007.11.109 . PMID 18155711 . 
  30. ↑ إيتو، واي؛ نايت، إم؛ فين، تي إم (2013). "الكروماتوغرافيا الحلزونية ذات التيار المعاكس" . مجلة علوم الكروماتوغرافيا . 51 (7): 726-38 . doi : 10.1093/chromsci/bmt058 . PMC 3702229. PMID 23833207 .  
  31. 1 2 فريزن، ج. برنت؛ ماك ألبين، جيمس ب.؛ تشين، شاو نونغ؛ باولي، غيدو ف. (2015). " الفصل المعاكس للمنتجات الطبيعية: تحديث" . مجلة المنتجات الطبيعية . 78 (7): 1765-1796 . Bibcode : 2015JNAtP..78.1765F . doi : 10.1021/np501065h . PMC 4517501. PMID 26177360 .  
  32. ↑ باولي، غيدو ف.؛ برو، صموئيل م.؛ فريزن، ج. برنت (2008). "الفصل المعاكس للمنتجات الطبيعية". مجلة المنتجات الطبيعية . 71 (8): 1489-1508 . Bibcode : 2008JNAtP..71.1489P . doi : 10.1021/np800144q . PMID 18666799 . 
  33. ↑ تانيمورا، ت.؛ بيسانو، ج. ج.؛ إيتو، ي.؛ بومان، ر. ل. (1970). "كروماتوغرافيا التيار المعاكس للقطرات". مجلة ساينس . 169 (3940): 54-56 . Bibcode : 1970Sci...169...54T . doi : 10.1126/science.169.3940.54 . PMID 5447530. S2CID 32380725 .  
  34. ↑ هوستتمان، كورت؛ هوستتمان-كالداس، ماريز؛ ستيتشر، أوتو (1979). "تطبيق كروماتوغرافيا التيار المعاكس للقطرات لعزل المنتجات الطبيعية". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 186 : 529-534 . doi : 10.1016/S0021-9673(00)95273-7 .
  35. ↑ إيتو، ي.؛ وينشتاين، م.؛ آوكي، إ.؛ هارادا، ر.؛ كيمورا، إ.؛ نونوغاكي، ك. (1966). "جهاز الطرد المركزي الكوكبي الحلزوني". مجلة نيتشر . 212 (5066): 985-987 . Bibcode : 1966Natur.212..985I . doi : 10.1038/212985a0 . PMID: 21090480. S2CID : 46151444 .  
  36. ↑ إيتو، ي.؛ باومان، ر. ل. (1971). "الكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس باستخدام جهاز طرد مركزي كوكبي ذي ملف تدفق مستمر" . مجلة ساينس . 173 (3995): 420-422 . رمز Bibcode : 1971Sci...173..420I . doi : 10.1126/science.173.3995.420 . PMID 5557320. S2CID 42302144 .  
  37. ↑ إيتو، ي؛ سوادو، ج؛ بومان، ر. (1975). "جهاز طرد مركزي جديد ذو تدفق مستمر بدون أختام دوارة يُطبق على فصل البلازما". مجلة ساينس . 189 (4207): 999-1000 . Bibcode : 1975Sci...189..999I . doi : 10.1126/science.1220011 . PMID 1220011 . 
  38. ↑ إيتو، يويتشيرو (1981). "الكروماتوغرافيا ذات التيار المعاكس". مجلة الأساليب البيوكيميائية والبيوفيزيائية . 5 (2): 105-129 . doi : 10.1016/0165-022X(81)90011-7 . PMID 7024389 . 
  39. ↑ فريزن، جيه بي؛ باولي، جي إف (2009). "المفاهيم الثنائية والتوحيد القياسي في تقنية الفصل بالتيار المعاكس". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1216 (19): 4237-4244 . doi : 10.1016/j.chroma.2009.01.048 . PMID 19203761 . 
  40. ↑ إيتو، يويتشيرو (2005). "أصل وتطور جهاز الطرد المركزي الكوكبي ذي الملف اللولبي: تأملات شخصية حول 40 عامًا من البحث والتطوير في مجال الطرد المركزي الكوكبي" . مراجعات الفصل والتنقية . 34 (2): 131-154 . doi : 10.1080/15422110500322883 . S2CID 98715984 . 
  41. ↑ إيتو، يويتشيرو؛ ساندلين، جيسي؛ باورز، ويليام ج. (1982). "الكروماتوغرافيا التحضيرية عالية السرعة ذات التيار المعاكس باستخدام جهاز طرد مركزي كروماتوغرافي حلزوني". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 244 (2): 247-258 . doi : 10.1016/S0021-9673(00)85688-5 .
  42. ↑ فاليس، هنري م.؛ بانيل، لويس ك.؛ سوكولوسكي، إدوارد أ.؛ كارميسي، بيتر. (1985). "فصل البنفسجي الميثيلي 2B بواسطة كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة وتحديد هويته بواسطة مطياف الكتلة بالبلازما المُمَثِّلة للكالسيوم-252". الكيمياء التحليلية . 57 (1): 376-378 . Bibcode : 1985AnaCh..57..376F . doi : 10.1021/ac00279a089 .
  43. ↑ كونواي، والتر د. (1990). كروماتوغرافيا التيار المعاكس: الأجهزة والنظرية والتطبيقات . نيويورك: دار نشر VCH. ISBN 978-0-89573-331-3.
  44. ↑ "رثاء إد تشو". مجلة الكروماتوغرافيا السائلة والتقنيات ذات الصلة . 28 ( 12-13 ): 1789-1791 . 2005. doi : 10.1081/JLC-200063429 . S2CID 216113805 . 
  45. ↑ ساذرلاند، آي إيه؛ براون، إل؛ فوربس، إس؛ جيمس، جي؛ هاوز، دي؛ هوستتمان، ك؛ ماكيريل، إي إتش؛ مارستون، إيه؛ ويتلي، دي؛ وود، بي. (1998). "الكروماتوغرافيا بالتيار المعاكس (CCC) وتطبيقاتها المتعددة كعملية تنقية وإنتاج صناعية". مجلة الكروماتوغرافيا السائلة والتقنيات ذات الصلة . 21 (3): 279-298 . doi : 10.1080/10826079808000491 .
  46. ↑ بيرثود، أ. (2002). كروماتوغرافيا التيار المعاكس: الطور الثابت السائل الخالي من الدعامة . كيمياء ويلسون وويلسون التحليلية الشاملة، المجلد 38. بوسطن: إلسيفير ساينس المحدودة، الصفحات 1-397 . ISBN  978-0-444-50737-2.
  47. ↑ كونواي، والتر د.؛ بيتروسكي، ريتشارد ج. (1995). كروماتوغرافيا التيار المعاكس الحديثة . سلسلة ندوات الجمعية الكيميائية الأمريكية رقم 593. منشورات الجمعية الكيميائية الأمريكية. doi : 10.1021/bk-1995-0593 . ISBN 978-0-8412-3167-2.
  48. ↑ إيتو، يويتشيرو؛ كونواي، والتر د. (1995). كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة . التحليل الكيميائي: سلسلة من الدراسات حول الكيمياء التحليلية وتطبيقاتها (الكتاب 198). نيويورك: جون وايلي وأولاده. ISBN 978-0-471-63749-3.
  49. ^ ماندافا، ن. بوشان؛ إيتو، يويتشيرو (1988). اللوني المضاد للتيار: النظرية والتطبيق . سلسلة العلوم الكروماتوغرافية، المجلد. 44. نيويورك: شركة مارسيل ديكر ISBN 978-0-8247-7815-6.
  50. ↑ مينيه، جان ميشيل؛ ثيبو، ديدييه (1999). كروماتوغرافيا التيار المعاكس . سلسلة علوم الكروماتوغرافيا، المجلد 82. نيويورك: مطبعة سي آر سي. رقم ISBN 978-0-8247-9992-2.
  51. ↑ هاجر غوزليك وآخرون (2009). "مقارنة الأداء باستخدام خليط GUESS لتقييم أجهزة كروماتوغرافيا التيار المعاكس". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1216 (19): 4181-4186 . doi : 10.1016/j.chroma.2009.02.091 . PMID 19344911 .  
  52. 1 2 سومنر، نيل (2011). "تطوير كروماتوغرافيا التيار المعاكس لتلبية احتياجات اكتشاف الأدوية" . مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1218 (36): 6107-6113 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.05.001 . PMID 21612783 . 
  53. ^ واتارو موراياما. تيتسويا كوباياشي؛ ياسوتاكا كوسوجي؛ هيديكي يانو1؛ يوشياكي نونوجاكي؛ كانيتشي نونوغاكي (1982). “كروماتوجرافيا مضادة للتيار المركزي جديدة وتطبيقاتها”. مجلة اللوني أ . 239 : 643–649 . دوى : 10.1016/S0021-9673(00)82022-1 .{{cite journal}}: صيانة CS1: الأسماء الرقمية: قائمة المؤلفين ( رابط )
  54. ↑ مارغراف، رودولف؛ إنتيس، أوليفييه؛ رينو، جان-هوغ؛ غاريه، بيير (2005). "بارتيترون 25، جهاز كروماتوغرافيا طرد مركزي صناعي متعدد الأغراض: تصميم الدوار والنتائج الأولية المتعلقة بالكفاءة واحتجاز الطور الثابت". مجلة الكروماتوغرافيا السائلة والتقنيات ذات الصلة . 28 ( 12-13 ): 1893-1902 . doi : 10.1081/JLC-200063539 . S2CID 94589809 . 
  55. ↑ حمزاوي، محمود؛ هوبير، جين؛ حاج سالم، جميلة؛ ريتشارد، برنارد؛ حراكات، دومينيك؛ مارشال، لوك؛ فوكو، آلان؛ لافو، كاثرين؛ رينو، جان هيوز (2011). "استخلاص مكثف للمنتجات الطبيعية المتأينة بواسطة استخلاص التقسيم المركزي للأزواج الأيونية". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1218 (31): 5254-5262 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.06.018 . PMID 21724190 . 
  56. ↑ ساذرلاند، إيان؛ هيويتسون، بيتر؛ سيبرز، ريك؛ فان دن هوفيل، ريمكو؛ أربينز، ليليان؛ كينكل، يواكيم؛ فيشر، ديريك (2011). "توسيع نطاق تنقية البروتينات باستخدام أنظمة الطورين المائيين: مقارنة كروماتوغرافيا الملف الحلقي متعدد الطبقات مع كروماتوغرافيا التقسيم بالطرد المركزي". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1218 (32): 5527-5530 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.04.013 . PMID 21571280 . 
  57. ↑ فور، كارين؛ بوجو، إيلودي؛ سوشيه، بولين؛ بيرثود، آلان (2013). "استخدام الليمونين في كروماتوغرافيا التيار المعاكس: بديل ألكان صديق للبيئة". الكيمياء التحليلية . 85 (9): 4644-4650 . Bibcode : 2013AnaCh..85.4644F . doi : 10.1021/ac4002854 . PMID : 23544458 . 
  58. ↑ مارشال، ل.؛ فوكو، أ.؛ باتيسييه، ج.؛ روزان، ج.م.؛ ليجراند، ج. (2000). "تأثير أنماط التدفق على كفاءة الفصل الكروماتوغرافي في كروماتوغرافيا التقسيم بالطرد المركزي". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 869 ( 1-2 ): 339-352 . doi : 10.1016/S0021-9673(99)01184-X . PMID 10720249 . 
  59. ↑ إنغكانينان، ك.؛ هازيكامب، أ.؛ هوك، أ.س.؛ بالكوني، س.؛ فيربورت، ر. (2000). "تطبيق كروماتوغرافيا التقسيم بالطرد المركزي في إجراء عام للفصل وإزالة التكرار لمستخلصات النباتات". مجلة كروماتوغرافيا السوائل والتقنيات ذات الصلة . 23 (14): 2195-2208 . doi : 10.1081/JLC-100100481 . S2CID 93342623 . 
  60. ↑ بيرثود، آلان؛ رويز-أنجيل، ماريا خوسيه؛ كاردا-بروش، صموئيل (2003). "الكروماتوغرافيا العكسية بالاستخلاص والبثق. استخدام الطبيعة السائلة للطور الثابت لتوسيع نطاق كراهية الماء". الكيمياء التحليلية . 75 (21): 5886-5894 . Bibcode : 2003AnaCh..75.5886B . doi : 10.1021/ac030208d . PMID 14588030 . 
  61. ↑ وو، دينغ فانغ؛ كاو، شياوجي؛ وو، شيهوا (2012). "الكروماتوغرافيا المتداخلة بالاستخلاص والتدفق المعاكس: طريقة جديدة لتنقية الأندروغرافوليدات السامة للخلايا الطبيعية من نبات الأندروغرافيس بانيكولاتا بكفاءة عالية". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1223 : 53-63 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.12.036 . PMID 22227359 . 
  62. ↑ كاو، شولي؛ وانغ، تشياو؛ لي، يان؛ باي، غي؛ رين، هونغ؛ شو، تشونمينغ؛ إيتو، يويتشيرو (2011). "عزل وتنقية سلسلة من المكونات النشطة بيولوجيًا من نبات سانت جون (Hypericum perforatum L.) باستخدام كروماتوغرافيا التيار المعاكس" . مجلة الكروماتوغرافيا ب . 879 ( 7-8 ): 480-488 . doi : 10.1016/j.jchromb.2011.01.007 . PMC 3084551. PMID 21306961 .  
  63. ↑ إغناتوفا، سفيتلانا؛ سومنر، نيل؛ كولكلو، نيكولا؛ ساذرلاند، إيان (2011). "الاستخلاص المتدرج في كروماتوغرافيا التيار المعاكس: تصميم جديد لمسار قديم". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1218 (36): 6053-6060 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.02.052 . PMID 21470614 . 
  64. ↑ أنييلي، م؛ ثيبو، د (1997). "الكروماتوغرافيا ثنائية الوضع عالية السرعة ذات التيار المعاكس: الاحتفاظ، والفصل، والأمثلة". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 790 ( 1-2 ): 17-30 . doi : 10.1016/S0021-9673(97)00742-5 .
  65. ↑ إيتو، يويتشيرو (1985). "الكروماتوغرافيا الرغوية ذات التيار المعاكس القائمة على نظام التيار المعاكس المزدوج". مجلة الكروماتوغرافيا السائلة . 8 (12): 2131-2152 . doi : 10.1080/01483918508074122 .
  66. ↑ لي، واي.-دبليو.؛ كوك، سي إي؛ إيتو، واي. (1988). "الكروماتوغرافيا المزدوجة ذات التيار المعاكس". مجلة الكروماتوغرافيا السائلة . 11 (1): 37-53 . doi : 10.1080/01483919808068313 .
  67. ↑ فان دن هوفيل، ريمكو؛ ساذرلاند، إيان (2007). "ملاحظات حول التدفق المزدوج المُثبت في ملف كروماتوغرافي حلزوني مزدوج التدفق ذي تيار معاكس". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1151 ( 1-2 ): 99-102 . doi : 10.1016/j.chroma.2007.01.099 . PMID 17303150 . 
  68. ↑ إغناتوفا، سفيتلانا؛ هيويتسون، بيتر؛ ماثيوز، بن؛ ساذرلاند، إيان (2011). "تقييم كروماتوغرافيا التدفق المزدوج المعاكس واستخلاص التيار المعاكس المتقطع". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1218 (36): 6102-6106 . doi : 10.1016/j.chroma.2011.02.032 . PMID 21397905 . 
  69. ↑ سيدانا، ياسمين؛ جوشي، لوكيش كومار (2013). "إعادة تدوير HPLC: أداة فعالة لتنقية المنتجات الطبيعية" . مجلة أبحاث الكروماتوغرافيا الدولية . 2013 : 1-7 . doi : 10.1155/2013/509812 .
  70. ↑ دو، كيو.-زد.؛ كي، سي.-كيو.؛ إيتو، واي. (1998). "إعادة تدوير كروماتوغرافيا التيار المعاكس عالي السرعة لفصل تاكسول وسيفالومانين". مجلة كروماتوغرافيا السوائل والتقنيات ذات الصلة . 21 ( 1-2 ): 157-162 . doi : 10.1080/10826079808001944 .
  71. ↑ مينغ، جي؛ يانغ، تشي؛ ليانغ، جونلينغ؛ غو، مينغزي؛ وو، شيهوا (2014). "الكروماتوغرافيا متعددة القنوات ذات التيار المعاكس لإعادة التدوير لعزل المنتجات الطبيعية: التانشينونات كأمثلة". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1327 : 27-38 . doi : 10.1016/j.chroma.2013.12.069 . PMID 24418233 . 
  72. ↑ إنجليرت، مايكل؛ براون، ليزلي؛ فيتر، والتر (2015). "الكروماتوغرافيا ثنائية الأبعاد ذات التيار المعاكس بتقنية القطع القلبي باستخدام جهاز واحد". الكيمياء التحليلية . 87 (20): 10172-10177 . Bibcode : 2015AnaCh..8710172E . doi : 10.1021/acs.analchem.5b02859 . PMID 26383896 . 
  73. ↑ كيو، فينغ؛ فريزن، ج. برنت؛ ماك ألبين، جيمس ب.؛ باولي، غيدو ف. (2012). " تصميم فصل تيار معاكس للاكتونات التربينية لنبات الجنكة بيلوبا باستخدام الرنين المغناطيسي النووي" . مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1242 : 26-34 . doi : 10.1016/j.chroma.2012.03.081 . PMC 3388899. PMID 22579361 .  
  74. ^ ماسيوك، الكسندر. رينو، جان هوج؛ مارغراف، رودولف. تريبوشيه، فيليب؛ زيشيس هانروت، مونيك؛ نوزيلارد، جان مارك (2004). “تحليل كروماتوغرافيا التقسيم بالطرد المركزي لتبادل الأنيون”. الكيمياء التحليلية . 76 (21): 6179–6186 . بيب كود : 2004AnaCh..76.6179M . دوى : 10.1021/ac049499w . بميد 15516108 . 
  75. ↑ توريبو، أليكس؛ نوزيلارد، جان مارك؛ رينو، جان هيوز (2007). "الكروماتوغرافيا التقسيمية الطاردة المركزية للتبادل الأيوني القوي كطريقة فعالة لتنقية الجلوكوزينولات على نطاق واسع". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1170 ( 1-2 ): 44-51 . doi : 10.1016/j.chroma.2007.09.004 . PMID 17904564 . 
  76. ↑ إيتو، يويتشيرو (2013). "الكروماتوغرافيا المعاكسة التيار لتنقية نطاق الأس الهيدروجيني: الأصل، والآلية، والإجراء، والتطبيقات" . مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1271 (1): 71-85 . doi : 10.1016/j.chroma.2012.11.024 . PMC 3595508. PMID 23219480 .  
  77. ↑ فانغ، لي؛ تشو، جي؛ لين، يون ليانغ؛ وانغ، شياو؛ صن، تشينغلي؛ لي، جيا ليان؛ هوانغ، لوكي (2013). "فصل واسع النطاق للقلويدات من نبات جيلسيميوم إليغانس باستخدام كروماتوغرافيا التيار المعاكس مع تنقية منطقة الأس الهيدروجيني وطريقة فحص جديدة لنظام المذيبات". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1307 : 80-85 . doi : 10.1016/j.chroma.2013.07.069 . PMID 23915643 . 
  78. ↑ إنجليرت، مايكل؛ فيتر، والتر (2015). "التغلب على قاعدة طول السلسلة المكافئ باستخدام كروماتوغرافيا التيار المعاكس لتنقية منطقة الأس الهيدروجيني للفصل التحضيري للأحماض الدهنية". الكيمياء التحليلية والكيمياء الحيوية التحليلية . 407 (18): 5503-5511 . doi : 10.1007/s00216-015-8723-1 . PMID 25943261. S2CID 23194800 .  
  79. ↑ مكاوي، ناظم؛ فور، كارين؛ بيرثود، آلان (2012). "تطورات في كروماتوغرافيا التيار المعاكس لفصل البروتينات". التحليل الحيوي . 4 (7): 833-844 . doi : 10.4155/bio.12.27 . PMID 22512800 . 
  80. ↑ كيندال، د.؛ بوث، أ. ج.؛ ليفي، م. س.؛ لاي، ج. ج. (2001). "فصل الحمض النووي البلازميدي فائق الالتفاف والحمض النووي البلازميدي ذي الشكل الدائري المفتوح باستخدام كروماتوغرافيا التيار المعاكس السائل-السائل". رسائل التكنولوجيا الحيوية . 23 (8): 613-619 . doi : 10.1023/A:1010362812469 . S2CID 19919861 . 
  81. ↑ SelectScience. "استخدام CCS في تنقية الكانابينويدات - شركة جيلسون" . www.selectscience.net . تاريخ الاسترجاع: 22-10-2018 .
  82. ^ ماك ألبين، جيمس ب. فريسين، ج. برنت؛ باولي، غيدو ف. (2012). “فصل المنتجات الطبيعية عن طريق اللوني المعاكس”. في ساتياجيت د. ساركر؛ لطفون نهار (محرران). عزل المنتجات الطبيعية . طرق في البيولوجيا الجزيئية. المجلد. 864. توتووا، نيوجيرسي: مطبعة هيومانا. ص 221 – 254. دوى : 10.1007 / 978-1-61779-624-1_9 . رقم ISBN   978-1-61779-623-4PMID 22367899​​ 
  83. ↑ كوروميا، كاتسويوكي؛ ساكاموتو، تيتسوتو؛ أوكادا، يوشيهيتو؛ كاجيوارا، ماساهيرو (1988). "تطبيق كروماتوغرافيا التيار المعاكس للقطرات لعزل فيتامين ب12". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 435 (1): 235-240 . doi : 10.1016/S0021-9673(01)82181-6 . PMID 3350896 . 
  84. ↑ أراكي، ت.؛ أوكازاوا، ت.؛ كوبو، ي.؛ أندو، هـ.؛ أساي، هـ. (1988). "فصل أيونات المعادن الأرضية النادرة الخفيفة بواسطة كروماتوغرافيا التيار المعاكس بالطرد المركزي باستخدام حمض ثنائي (2-إيثيل هكسيل) الفوسفوريك". مجلة الكروماتوغرافيا السائلة . 11 (1): 267-281 . doi : 10.1080/01483919808068328 .
  85. ↑ إيتو، يوكو؛ غوتو، تومومي؛ يامادا، ساداجي أ.؛ أونو، تسوتومو؛ ماتسوموتو، هيروشي؛ أوكا، هيساو؛ إيتو، يويتشيرو (2008). "التحديد السريع لمبيدات الكاربامات في الأغذية باستخدام كروماتوغرافيا التيار المعاكس المزدوج المتصلة مباشرة بقياس الطيف الكتلي". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1187 ( 1-2 ): 53-57 . doi : 10.1016/j.chroma.2008.01.078 . PMID 18295222 . 
  86. ↑ آلان بيرثود، محرر (2010). التمييز الكيرالي في طرق الفصل: الآليات والتطبيقات . هايدلبرغ ؛ نيويورك: سبرينغر. 
  87. ↑ كاو، شولي؛ يانغ، تشونلي؛ باي، هايرون؛ لي، شينغهونغ؛ شو، شياوباي؛ إيتو، يويتشيرو (2012). "تطبيق كروماتوغرافيا التيار المعاكس كطريقة معالجة مسبقة جديدة لتحديد الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات في المياه البيئية" . مجلة علوم الفصل . 35 (4): 596-601 . doi : 10.1002/jssc.201100852 . PMC 3270381. PMID 22282420 .  
  88. ↑ بالدرمان، سوزان؛ موليادي، أندرياتي ن.؛ يانغ، زيين؛ موراتا، أرياكا؛ فليشمان، بيتر؛ وينترهالتر، بيتر؛ نايت، مارثا؛ فين، توماس م.؛ واتانابي، ناوهارو (2011). "تطبيق كروماتوغرافيا الترسيب بالطرد المركزي وكروماتوغرافيا التيار المعاكس عالية السرعة المزودة بدوار داعم للأنابيب الحلزونية لعزل وتوصيف جزئي للإنزيمات الشبيهة بإنزيمات انشطار الكاروتينويد في طحلب Enteromorpha compressa". مجلة علوم الفصل . 34 (19): 2759-2764 . doi : 10.1002/jssc.201100508 . PMID 21898817 . 
  89. ↑ تشانغ، مين؛ خريبين، قسطنطين ي.؛ فاجان، جيفري أ.؛ ماكفي، بيتر؛ إيتو، يويتشيرو؛ تشنغ، مينغ (2014). "التجزئة الكاملة أحادية الخطوة لأنابيب الكربون النانوية أحادية الجدار بواسطة كروماتوغرافيا التيار المعاكس" . الكيمياء التحليلية . 86 (8): 3980-3984 . Bibcode : 2014AnaCh..86.3980Z . doi : 10.1021/ac5003189 . PMC 4037701. PMID 24673411 .  
  90. ↑ ساذرلاند، إيان أ. (2007). "التقدم الأخير في التوسع الصناعي لتقنية كروماتوغرافيا التيار المعاكس". مجلة الكروماتوغرافيا أ . 1151 ( 1-2 ): 6-13 . doi : 10.1016/j.chroma.2007.01.143 . PMID 17386930 .