الحمض النووي الريبي المتداخل الصغير

📅 آخر تحديث: ٢٥ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٥ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 6 صور
الموسوعة الحرة

التوسط في تداخل الحمض النووي الريبوزي في الخلايا الثديية المستزرعة.

الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير ( siRNA )، المعروف أحيانًا باسم الحمض النووي الريبوزي المتداخل القصير أو الحمض النووي الريبوزي المُثبِّط ، هو فئة من جزيئات الحمض النووي الريبوزي غير المشفرة ثنائية السلسلة ، يتراوح طولها عادةً بين 20 و24 زوجًا من القواعد ، وهي مشابهة للحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA)، وتعمل ضمن مسار تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi). يتداخل هذا الحمض مع التعبير عن جينات محددة ذات تسلسلات نيوكليوتيدية مكملة عن طريق تحطيم الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) بعد عملية النسخ ، مما يمنع الترجمة . [ 1 ] [ 2 ] وقد اكتُشف عام 1998 على يد أندرو فاير في مؤسسة كارنيجي للعلوم في واشنطن العاصمة، وكريغ ميلو في جامعة ماساتشوستس في ووستر.

بناء

تتميز جزيئات siRNA الطبيعية ببنية محددة جيدًا، وهي عبارة عن جزيء RNA مزدوج السلسلة قصير (عادةً من 20 إلى 24 زوجًا قاعديًا ) ذي نهايات 5' مُفسفرة ونهايات 3' مُهدرجة مع نيوكليوتيدين متدليين. في عام 2001، اقتُرح أن إنزيمًا يُسمى Dicer يُحفز "خطوة بدء التداخل RNA" (إنتاج جزيئات siRNA من جزيئات dsRNA الطويلة وجزيئات RNA الصغيرة ذات البنية الحلقية ). [ 3 ]

يمكن أيضًا إدخال جزيئات siRNA إلى الخلايا عن طريق النقل الجيني . وبما أنه من حيث المبدأ، يمكن تثبيط أي جين بواسطة جزيء siRNA اصطناعي ذي تسلسل مكمل، فإن جزيئات siRNA تُعد أداة مهمة للتحقق من وظيفة الجينات واستهداف الأدوية في "عصر ما بعد الجينوم" .

تاريخ

في عام ١٩٩٨، اكتشف أندرو فاير من مؤسسة كارنيجي للعلوم في واشنطن العاصمة، وكريغ ميلو من جامعة ماساتشوستس في ووستر، آلية التداخل الرناوي (RNAi) أثناء عملهما على التعبير الجيني في الدودة الأسطوانية Caenorhabditis elegans . [ ٤ ] وقد فاز العالمان بجائزة نوبل لأبحاثهما في مجال التداخل الرناوي عام ٢٠٠٦. [ ٥ ] واكتشف فريق ديفيد بولكومب في مختبر سينسبري في نورويتش، إنجلترا، الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير ( siRNA) ودوره في إسكات الجينات بعد النسخ (PTGS) في النباتات ، وهو اكتشاف نُشر في مجلة ساينس عام ١٩٩٩. [ ٦ ] وسرعان ما أفاد توماس توشل وزملاؤه في مجلة نيتشر أن الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير الاصطناعي (siRNA) قادر على تحفيز التداخل الرناوي في خلايا الثدييات. [ ٧ ] وقد أدت هذه الاكتشافات إلى زيادة الاهتمام بتسخير التداخل الرناوي في البحوث الطبية الحيوية وتطوير الأدوية .

حتى عام 2017، واجهت التطبيقات البشرية لتقنية siRNA عقبات كبيرة أمام نجاحها، من بينها "التأثيرات الجانبية". [ 2 ] ومع اقتراب نهاية ذلك العقد، نوقشت إمكانية أن تحفز هذه العلاجات المناعة الفطرية . [ 4 ]وحتى عام 2019، لم تنجح النماذج الحيوانية في تمثيل مدى هذه الاستجابة بدقة لدى البشر؛ [ 4 ]وبالتالي، فإن دراسة آثار علاجات siRNA تمثل تحديًا.

اعتبارًا من عام 2020، تمت الموافقة على علاجات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) (على سبيل المثال، من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية)، وتم وضع طرق جديدة للتغلب على التحديات؛ وتشمل هذه العلاجات المعتمدة والمتوفرة تجاريًا، والعديد من العلاجات الأخرى قيد التطوير للحصول على الموافقة، وغيرها في مراحل مبكرة من التطوير. [ 8 ][ 9 ]

الآلية

تتم الآلية التي تتسبب بها جزيئات siRNA الطبيعية في إسكات الجينات من خلال كبح الترجمة على النحو التالي:

آلية عمل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA)
  1. يتم شطر الحمض النووي الريبي المزدوج الطويل (الذي يمكن أن يأتي من الحمض النووي الريبي الحلقي، والحمض النووي الريبي التكميلي، وبوليميراز الحمض النووي الريبي المعتمد على الحمض النووي الريبي) بواسطة إنزيم نووي داخلي يسمى دايسر . يقوم دايسر بقطع الحمض النووي الريبي المزدوج الطويل لتكوين الحمض النووي الريبي المتداخل القصير أو siRNA؛ وهذا ما يمكّن الجزيئات من تكوين مركب إسكات الحمض النووي الريبي المحفز (RISC).
  2. بمجرد دخول siRNA إلى الخلية، يتم دمجه في بروتينات أخرى لتشكيل RISC .
  3. بمجرد أن يصبح siRNA جزءًا من مركب RISC، يتم فك siRNA لتشكيل siRNA أحادي السلسلة.
  4. يتم اختيار السلسلة الأقل استقرارًا من الناحية الديناميكية الحرارية بسبب اقتران القواعد عند الطرف 5' لتبقى جزءًا من مركب RISC.
  5. يمكن الآن لجزيء siRNA أحادي السلسلة، والذي يعد جزءًا من مركب RISC، أن يقوم بمسح والعثور على mRNA مكمل.
  6. بمجرد أن يرتبط الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير أحادي السلسلة (جزء من مركب RISC) بالحمض النووي الريبوزي الرسول المستهدف، فإنه يحفز انقسام الحمض النووي الريبوزي الرسول .
  7. يتم الآن قطع الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) والتعرف عليه كجزيء غير طبيعي من قبل الخلية. يؤدي هذا إلى تحلل الحمض النووي الريبوزي الرسول، وبالتالي عدم ترجمته إلى أحماض أمينية ثم إلى بروتينات، مما يؤدي إلى إسكات الجين المسؤول عن ترميز هذا الحمض النووي الريبوزي الرسول.

يُشبه الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA ) الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA) ؛ إلا أن الحمض النووي الريبوزي الميكروي يُشتق من منتجات الحمض النووي الريبوزي الحلقي الجذعي الأقصر. عادةً ما يُسكت الحمض النووي الريبوزي الميكروي الجينات عن طريق كبح الترجمة ، وله نطاق عمل أوسع، بينما يعمل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير عادةً بنطاق عمل أعلى عن طريق قطع الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) قبل الترجمة، مع تكامل تام بنسبة 100%. [ 10 ] [ 11 ]

تحفيز التداخل الرناوي باستخدام الرنا المتداخل الصغير أو سلائفه الحيوية

بروتين دايسر ملون حسب نطاق البروتين .

إن تثبيط الجينات عن طريق نقل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) الخارجي مؤقت، خاصةً في الخلايا سريعة الانقسام. ويمكن التغلب على ذلك بإنشاء ناقل تعبير للحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير. يتم تعديل تسلسل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير لإدخال حلقة قصيرة بين السلسلتين. والناتج هو نسخة من الحمض النووي الريبوزي القصير ذي الحلقة الدبوسية (shRNA)، والذي يمكن معالجته إلى حمض نووي ريبوزي متداخل صغير وظيفي بواسطة إنزيم دايسر بالطريقة المعتادة. [ 12 ] تستخدم كاسيتات النسخ النموذجية محفز بوليميراز الحمض النووي الريبوزي III (مثل U6 أو H1) لتوجيه نسخ الحمض النووي الريبوزي النووي الصغير (snRNAs، حيث يشارك U6 في ربط الحمض النووي الريبوزي ؛ وH1 هو مكون RNase من RNase P البشري). ويُفترض أن نسخة الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير الناتجة تتم معالجتها بعد ذلك بواسطة إنزيم دايسر .

يمكن أيضًا تحسين كفاءة تثبيط الجينات باستخدام ضغط الخلايا . [ 13 ]

يعتمد نشاط جزيئات siRNA في عملية التداخل الرناوي (RNAi) بشكل كبير على قدرتها على الارتباط بمركب إسكات الرنا المُحفَّز (RISC). يتبع ارتباط جزيء siRNA المزدوج بمركب RISC عملية فكّ الالتفاف وقطع السلسلة الموجبة بواسطة إنزيمات نوكلياز داخلية. بعد ذلك، يمكن لمركب السلسلة السالبة-RISC المتبقي الارتباط بجزيئات mRNA المستهدفة لبدء عملية إسكات النسخ. [ 14 ]

تنشيط الحمض النووي الريبي

إضافةً إلى دورها في التداخل الرناوي (RNAi)، تستطيع جزيئات الرنا المتداخلة الصغيرة (siRNAs) تنشيط التعبير الجيني، وهي ظاهرة تُعرف باسم " تنشيط الرنا " أو RNAa. وقد لوحظت هذه الظاهرة لأول مرة عندما وُجد أن جزيئات الرنا المتداخلة الصغيرة الاصطناعية، والتي تُسمى " الرنا المنشط الصغير " (saRNA)، والتي تستهدف محفزات الجينات، تُحفز تنشيطًا قويًا لنسخ الجينات المستهدفة. [ 15 ] وقد ثبت أن RNAa آلية محفوظة، لوحظت عبر أنواع مختلفة من الكائنات الحية، بدءًا من الحشرات والديدان الأسطوانية (C. elegans ) والنباتات، وصولًا إلى الثدييات (بما في ذلك البشر). [ 16 ] [ 17 ] [ 18 ] [ 19 ]

تتضمن آلية تنشيط النسخ بواسطة الحمض النووي الريبوزي (RNAa) استهداف مناطق المحفز بواسطة جزيئات الحمض النووي الريبوزي الصغيرة (saRNAs)، مما يؤدي إلى استقطاب آليات النسخ وإحداث تغييرات فوق جينية تعزز التعبير الجيني. غالبًا ما تتضمن هذه العملية مُركب تنشيط النسخ المُحفز بواسطة الحمض النووي الريبوزي (RITA)، والذي يشمل بروتينات أرجونوت (وخاصة Ago2)، وإنزيم فك لولب الحمض النووي الريبوزي A (RHA)، وCTR9. [ 20 ] [ 21 ] كما يمكن لجزيئات الحمض النووي الريبوزي الميكروية الداخلية أن تتوسط في تنشيط النسخ بواسطة الحمض النووي الريبوزي، مما يوسع الأدوار التنظيمية لهذه الجزيئات الصغيرة من الحمض النووي الريبوزي لتتجاوز إسكات الجينات.

تخضع حاليًا العديد من العلاجات القائمة على الحمض النووي الريبوزي الصغير المنشط (saRNA) للتطوير السريري. يستهدف عقار MTL-CEBPA، الذي طورته شركة MiNA Therapeutics، جين CEBPA ، وهو في المرحلة الثانية من التجارب السريرية لعلاج سرطان الكبد. [ 22 ] أما عقار RAG-01، الذي طورته شركة Ractigen Therapeutics، فيستهدف جين p21 ، وهو في المرحلة الأولى من التجارب السريرية لعلاج سرطان المثانة غير الغازي للعضلات (NMIBC). [ 23 ] تمثل هذه التجارب السريرية خطوة هامة نحو ترجمة ظاهرة الحمض النووي الريبوزي الصغير المنشط (RNAa) إلى استراتيجيات علاجية جديدة.

إسكات الجينات بعد النسخ

ذكر ريتشارد كارثيو وزملاؤه في دراستهم التي أجروها عام 2004 حول مسارات إسكات الجينات بواسطة siRNA/miRNA في ذبابة الفاكهة، أن إسكات الجينات بعد النسخ الناتج عن siRNA يبدأ بتكوين معقد إسكات الجينات المُحفز بواسطة الحمض النووي الريبوزي (RISC). يقوم RISC بإسكات التعبير عن جينات معينة عن طريق شطر جزيئات mRNA التي تشفر تلك الجينات. [ 24 ] وللبدء في هذه العملية، ذكروا أن أحد شريطي siRNA، وهو الشريط الدليل المضاد ، يُحمّل في RISC بينما يتحلل الشريط الآخر، وهو الشريط المرافق المتوافق . وأضافوا أن بعض إنزيمات Dicer في ذبابة الفاكهة قد تكون مسؤولة عن تحميل الشريط الدليل في RISC. [ 24 ] ثم، في منظور من عام 2009، طُرحت فكرة أن "siRNA يمسح ويوجه RISC" إلى تسلسل مكمل تمامًا على جزيئات mRNA. [ 25 ]

يُعتقد أن انشطار جزيئات mRNA يتم تحفيزه بواسطة نطاق Piwi لبروتينات Argonaute في مركب RISC؛ ثم يُقطع جزيء mRNA بدقة عن طريق كسر الرابطة الفوسفودايسترية بين النيوكليوتيدات المستهدفة المرتبطة ببقايا siRNA رقم 10 و11، بدءًا من الطرف 5'. [ 26 ] وكما أشار أوربان وإيزورالدي في دراسة أخرى على خلايا ذبابة الفاكهة ، "بعد هذا الانشطار الداخلي الأولي، يتحلل mRNA بشكل أكبر" بواسطة الإكسونوكليازات الخلوية ؛ وقد أظهرا أنه في هذا النظام، "تتحلل شظايا 5' بسرعة من نهاياتها 3' بواسطة الإكسوسومات ، بينما تتحلل شظايا 3' من نهاياتها 5' بواسطة XRN1 "، وهو إكسوريبونوكلياز 5'-3'. [ 27 ] يسمح انفصال سلسلة mRNA المستهدفة عن RISC بعد الانقسام بإسكات المزيد من mRNA؛ ومن المرجح أن يتم تعزيز عملية الانفصال هذه بواسطة عوامل خارجية مدفوعة بتحلل ATP . [ 26 ]

أحيانًا، لا يحدث انقسام جزيء mRNA المستهدف. في بعض الحالات، قد يُثبط الانقسام الداخلي للهيكل الفوسفودايستري بسبب عدم تطابق siRNA وmRNA المستهدف بالقرب من موقع الانقسام. وفي أحيان أخرى، تفتقر بروتينات أرجونوت في مركب RISC إلى نشاط الإندونوكلياز حتى عندما يكون mRNA المستهدف وsiRNA متطابقين تمامًا. [ 26 ] في مثل هذه الحالات، يتم إسكات التعبير الجيني بواسطة آلية مُحفزة بواسطة miRNA. [ 2 ] [ 25 ]

نسخة مبسطة من آلية بينغ بونغ، ​​تتضمن بروتينات أوبيرجين (Aub) وأرغونوت-3 (Ago3) التي تقوم بفصل نهايتي 3' و 5' من piRNA.

تُعدّ الحموض النووية الريبية المتفاعلة مع بروتين Piwi (piRNAs) فئةً حديثة الاكتشاف من الحموض النووية الريبية الصغيرة غير المشفرة (ncRNAs)، ويتراوح طولها بين 21 و35 نيوكليوتيدًا. وتلعب دورًا في تنظيم التعبير الجيني، وكبت العناصر المتحركة، وتثبيط العدوى الفيروسية. وكما ذكر مونغا وبانيرجي في ملخص تقريرهما الرئيسي، "بعد أن كانت تُعتبر "مادةً مظلمةً" من الحموض النووية الريبية غير المشفرة، برزت الحموض النووية الريبية المتفاعلة مع بروتين Piwi كعناصر فاعلة مهمة في وظائف خلوية متعددة في مختلف الكائنات الحية." [ 28 ] وعلى وجه الخصوص، تم تصنيفها في عام 2019 على أنها ليست siRNAs، وأنها مسؤولة عن كبت العناصر المتحركة. [ 29 ]

إسكات الجينات على مستوى النسخ

استُخدمت العديد من الكائنات النموذجية، مثل النباتات ( Arabidopsis thaliana ) والخميرة ( Saccharomyces cerevisiae ) والذباب ( Drosophila melanogaster ) والديدان ( C. elegans )، لدراسة إسكات الجينات النسخي الموجه بواسطة الحمض النووي الريبوزي الصغير غير المشفر. في الخلايا البشرية، لُوحظ إسكات الجينات النسخي الموجه بواسطة الحمض النووي الريبوزي قبل عقد من الزمن عندما قامت جزيئات siRNA الخارجية بإسكات مُحفِّز عامل الاستطالة 1α المُعدَّل وراثيًا الذي يُحفِّز جينًا مُخبِرًا للبروتين الفلوري الأخضر (GFP). [ 30 ] تشمل الآليات الرئيسية لإسكات الجينات النسخي (TGS) التي تتضمن آلية التداخل الريبوزي (RNAi) مثيلة الحمض النووي، وتعديلات ما بعد الترجمة للهيستونات ، وإعادة تشكيل الكروماتين اللاحقة حول الجين المستهدف إلى حالة كروماتينية غير متجانسة. [ 30 ]

مجمعات RITS

يمكن دمج جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) في مركب إسكات النسخ المحفز بالحمض النووي الريبوزي (RITS). ويحفز مركب RITS النشط تكوين الكروماتين المغاير حول الحمض النووي المطابق لجزيء siRNA، مما يؤدي فعليًا إلى إسكات الجينات في تلك المنطقة من الحمض النووي.

التطبيقات

من أبرز تطبيقات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) قدرته على التمييز بين التسلسل المستهدف وغير المستهدف بناءً على اختلاف نيوكليوتيد واحد. يُعتبر هذا النهج بالغ الأهمية علاجيًا لكبح اضطرابات اكتساب الوظيفة السائدة (GOF)، حيث يختلف الأليل الطافر المسبب للمرض عن الأليل الطبيعي بنيوكليوتيد واحد. تُسمى هذه الأنواع من الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير، القادرة على التمييز بين اختلاف نيوكليوتيد واحد، بالحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير الخاص بالأليل. [ 2 ]

يُعدّ ASP-RNAi فئةً مبتكرةً من تقنية RNAi، تهدف إلى كبح الأليل الطافر السائد مع الحفاظ على التعبير عن الأليل الطبيعي المقابل، وذلك من خلال خصوصية الاختلافات في النوكليوتيدات المفردة بينهما. [ 2 ] تُشكّل جزيئات ASP-siRNA بديلاً علاجياً جديداً وواعداً لعلاج الاضطرابات الوراثية السائدة، لا سيما في الحالات التي يكون فيها التعبير عن الأليل الطبيعي ضرورياً لبقاء الكائن الحي، مثل داء هنتنغتون (HD)، وخلل التوتر العضلي DYT1 (غونزاليس-أليغري وآخرون، 2003، 2005)، وداء الزهايمر (سيرانت وآخرون، 2011)، وداء باركنسون (PD) (تاكاهاشي وآخرون، 2015)، والتصلب الجانبي الضموري (ALS) (شوارتز وآخرون، 2006)، وداء ماتشادو-جوزيف (ألفيس وآخرون، 2008). كما تم تقييم إمكاناتها العلاجية في علاج العديد من الأمراض الجلدية مثل انحلال البشرة الفقاعي البسيط (أتكينسون وآخرون، 2011)، وتقرن الجلد الراحي الأخمصي الانحلالي (ليو وآخرون، 2016)، وضمور القرنية الشبكي من النوع الأول (كورتني وآخرون، 2014). [ 2 ]

التحديات

يتداخل التداخل الرناوي (RNAi) مع عدد من المسارات الأخرى؛ ففي عام 2010، لم يكن من المستغرب أن تُحفز بعض التجارب التي تُدخل فيها جزيئات siRNA تأثيرات غير محددة. [ 31 ] [ 32 ] عندما تصادف خلية ثديية جزيء رنا مزدوج السلسلة، مثل siRNA، فقد تخطئ في اعتباره ناتجًا ثانويًا لفيروس ما، فتُطلق استجابة مناعية. علاوة على ذلك، ولأن جزيئات الرنا الميكروي (microRNA) ذات الصلة التركيبية تُعدّل التعبير الجيني بشكل كبير عبر تفاعلات أزواج القواعد التكميلية غير الكاملة مع جزيء mRNA المستهدف ، فإن إدخال siRNA قد يُسبب استهدافًا غير مقصود. كما أن التعديلات الكيميائية على siRNA قد تُغير الخصائص الديناميكية الحرارية، مما يؤدي أيضًا إلى فقدان خصوصية النوكليوتيد المفرد. [ 33 ]

المناعة الفطرية

قد يؤدي إدخال عدد كبير جدًا من جزيئات siRNA إلى أحداث غير محددة نتيجة لتنشيط الاستجابات المناعية الفطرية. [ 34 ] تشير معظم الأدلة المتوفرة حتى الآن إلى أن هذا يرجع على الأرجح إلى تنشيط مستشعر dsRNA، وهو PKR، على الرغم من احتمال تورط جين RIG-I المُحفَّز بحمض الريتينويك أيضًا. [ 35 ] كما وُصِفَ تحفيز السيتوكينات عبر مستقبل تول-لايك 7 (TLR7). يُستخدم التعديل الكيميائي لجزيئات siRNA لتقليل تنشيط الاستجابة المناعية الفطرية لأغراض وظيفية جينية وتطبيقات علاجية. إحدى الطرق الواعدة لتقليل التأثيرات غير المحددة هي تحويل siRNA إلى microRNA. [ 36 ] توجد جزيئات microRNA بشكل طبيعي، ومن خلال تسخير هذا المسار الداخلي، يُمكن تحقيق تثبيط جيني مماثل بتركيزات منخفضة نسبيًا من جزيئات siRNA الناتجة، وذلك لتقليل التأثيرات غير المحددة.

خارج الاستهداف

يُعدّ الاستهداف غير المقصود تحديًا آخر لاستخدام جزيئات siRNA كأداة لكبح التعبير الجيني. [ 32 ] في هذه الحالة، تُخفّض جزيئات siRNA التعبير عن الجينات ذات التكامل غير الكامل دون قصد (حيث تعمل جزيئات siRNA فعليًا كجزيئات miRNA)، مما يؤدي إلى مشاكل في تفسير البيانات واحتمالية حدوث سمية. مع ذلك، يمكن معالجة هذا جزئيًا من خلال تصميم تجارب تحكم مناسبة، ويجري حاليًا تطوير خوارزميات تصميم جزيئات siRNA لإنتاج جزيئات خالية من الاستهداف غير المقصود. ويمكن بعد ذلك استخدام تحليل التعبير الجيني على مستوى الجينوم، على سبيل المثال، باستخدام تقنية المصفوفات الدقيقة، للتحقق من ذلك ومواصلة تحسين الخوارزميات. تشير ورقة بحثية نُشرت عام 2006 من مختبر أناستاسيا خفوروفا إلى أن امتدادات بطول 6 أو 7 أزواج قاعدية من الموضع 2 فصاعدًا تُساهم في تطابق جزيئات siRNA مع مناطق 3'UTR في الجينات المستهدفة غير المقصودة. [ 37 ] أداة التنبؤ بالتأثيرات الجانبية لـ siRNA متاحة على الرابط http://crdd.osdd.net/servers/aspsirna/asptar.php ومنشورة كمورد ASPsiRNA. [ 2 ]

الاستجابات المناعية التكيفية

قد تكون جزيئات الحمض النووي الريبوزي (RNA) البسيطة ضعيفة في تحفيز الاستجابة المناعية، ولكن يمكن بسهولة تكوين أجسام مضادة ضد معقدات الحمض النووي الريبوزي والبروتين. وتُلاحظ هذه الأنواع من الأجسام المضادة في العديد من أمراض المناعة الذاتية. ولم تُسجّل حتى الآن أي تقارير عن أجسام مضادة ضد الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) المرتبط بالبروتينات. تعتمد بعض طرق توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير على ربط البولي إيثيلين جلايكول (PEG) بالأوليغونوكليوتيد، مما يقلل من إفرازه ويُحسّن من عمره النصفي في الدورة الدموية. ومع ذلك، اضطرت شركة ريغادو للعلوم الحيوية إلى إيقاف تجربة سريرية واسعة النطاق من المرحلة الثالثة لجزيء الحمض النووي الريبوزي المُرتبط بالبولي إيثيلين جلايكول والمُوجّه ضد العامل التاسع، وذلك بسبب رد فعل تحسسي شديد تجاه جزء البولي إيثيلين جلايكول من الحمض النووي الريبوزي. وقد أدى هذا التفاعل إلى الوفاة في بعض الحالات، مما يُثير مخاوف جدية بشأن توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير عند استخدام الأوليغونوكليوتيدات المرتبطة بالبولي إيثيلين جلايكول. [ 38 ]

تشبع آلية التداخل الرناوي

يؤدي نقل جزيئات siRNA إلى الخلايا عادةً إلى خفض التعبير عن العديد من الجينات؛ ومع ذلك، يُلاحظ أيضًا ارتفاع في التعبير عن بعض الجينات. ويمكن تفسير ارتفاع التعبير الجيني جزئيًا بالأهداف الجينية المتوقعة لجزيئات miRNA الداخلية. تدعم التحليلات الحاسوبية لأكثر من 150 تجربة نقل siRNA نموذجًا يُشير إلى أن جزيئات siRNA الخارجية قد تُشبع آلية RNAi الداخلية، مما يؤدي إلى إزالة تثبيط الجينات التي تُنظمها جزيئات miRNA الداخلية. [ 39 ] وبالتالي، في حين أن جزيئات siRNA قد تُحدث تأثيرات جانبية غير مرغوب فيها، مثل الانخفاض غير المقصود في مستوى mRNA عبر تطابق جزئي في التسلسل بين siRNA والهدف، فإن تشبع آلية RNAi يُعد تأثيرًا غير محدد آخر، يتضمن إزالة تثبيط الجينات التي تُنظمها جزيئات miRNA، وينتج عنه مشاكل مماثلة في تفسير البيانات وسمية محتملة. [ 40 ]

التعديل الكيميائي

تم تعديل جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) كيميائيًا لتعزيز خصائصها العلاجية. يجب إيصال الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) إلى موقع التأثير في خلايا الأنسجة المستهدفة لكي يحقق التداخل الريبوزي (RNAi) وعوده العلاجية. توجد قاعدة بيانات مفصلة لجميع هذه التعديلات الكيميائية مُفهرسة يدويًا تحت اسم siRNAmod في الأدبيات العلمية. [ 41 ] قد يؤدي التعديل الكيميائي لجزيئات siRNA أيضًا، دون قصد، إلى فقدان خصوصية النوكليوتيد المفرد. [ 42 ]

التطبيقات العلاجية

نظراً لقدرتها على تعطيل أي جين ذي أهمية، فقد أثارت تقنية التداخل الرناوي عبر جزيئات الرنا المتداخلة الصغيرة اهتماماً كبيراً في كل من علم الأحياء الأساسي [ 43 ] والتطبيقي. [ 44 ]

يُعدّ التوصيل داخل الخلايا أحد أكبر التحديات التي تواجه العلاجات القائمة على الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) وتداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi). [ 45 ] كما يتميز الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) بضعف استقراره وسلوكه الحركي الدوائي . [ 46 ] وقد أظهر توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) عبر الجسيمات النانوية نتائج واعدة. [ 45 ] إلا أن جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA ) قليلة النوكليوتيدات في الجسم الحي عُرضة للتلف بواسطة إنزيمات النوكليوتيدات الداخلية والخارجية الموجودة في البلازما والأنسجة. [ 47 ] وقد أظهرت فعالية محدودة فقط في مواقع التوصيل الموضعية، مثل عين الإنسان. [ 48 ] ويُعدّ توصيل الحمض النووي النقي إلى الكائنات المستهدفة أمرًا صعبًا نظرًا لكبر حجمه وبنيته التي تمنعه ​​من الانتشار بسهولة عبر الأغشية . [ 45 ] وتتغلب جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) قليلة النوكليوتيدات على هذه المشكلة بفضل صغر حجمها الذي يتراوح بين 21 و23 نيوكليوتيدًا. [ 49 ] وهذا ما يسمح بتوصيلها عبر ناقلات نانوية تُسمى النواقل النانوية. [ 48 ]

يجب أن يحمي الناقل النانوي الجيد لتوصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) هذا الحمض من التحلل، وأن يزيد تركيزه في العضو المستهدف، وأن يُسهّل امتصاصه الخلوي. [ 47 ] تُصنّف النواقل النانوية لـ siRNA إلى ثلاث مجموعات رئيسية: النواقل القائمة على الدهون، والنواقل العضوية غير الدهنية، والنواقل غير العضوية. [ 47 ] تُعدّ النواقل النانوية القائمة على الدهون ممتازة لتوصيل siRNA إلى الأورام الصلبة، [ 47 ] ولكن قد تتطلب أنواع أخرى من السرطان نواقل نانوية عضوية غير دهنية مختلفة، مثل الجسيمات النانوية القائمة على السيكلودكسترين . [ 47 ] [ 50 ]

أظهرت الدراسات أن جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) المُحملة عبر جسيمات نانوية دهنية تمتلك إمكانات علاجية لاضطرابات الجهاز العصبي المركزي . [ 51 ] ورغم شيوع اضطرابات الجهاز العصبي المركزي، إلا أن الحاجز الدموي الدماغي (BBB) ​​غالباً ما يعيق وصول العلاجات المحتملة إلى الدماغ . [ 51 ] وقد ثبت أن جزيئات siRNA التي تستهدف بروتينات الإخراج على سطح الحاجز الدموي الدماغي وتُثبطها، تُؤدي إلى زيادة نفاذية هذا الحاجز. [ 51 ] كما أن جزيئات siRNA المُحملة عبر جسيمات نانوية دهنية قادرة على عبور الحاجز الدموي الدماغي بالكامل. [ 51 ]

تُعدّ مشكلة الاستهداف غير المقصود من أبرز الصعوبات في توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA). [ 45 ] [ 48 ] ونظرًا لأن الجينات تُقرأ في كلا الاتجاهين، فمن المحتمل أنه حتى لو قُرئ شريط siRNA المضاد المقصود وأدى إلى تعطيل mRNA المستهدف، فقد يستهدف شريط siRNA المتوافق بروتينًا آخر يشارك في وظيفة مختلفة. [ 52 ]

أظهرت نتائج المرحلة الأولى من أول تجربتين علاجيتين باستخدام تقنية RNAi (المخصصة لعلاج التنكس البقعي المرتبط بالعمر ، والمعروف أيضًا باسم AMD) في نهاية عام 2005 أن جزيئات siRNA جيدة التحمل ولها خصائص حركية دوائية مناسبة. [ 53 ]

في تجربة سريرية من المرحلة الأولى، خضع 41 مريضًا مصابًا بسرطان متقدم منتشر إلى الكبد للعلاج بتقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi) باستخدام جسيمات نانوية دهنية . استهدفت هذه التقنية جينين يُشفّران بروتينين أساسيين في نمو الخلايا السرطانية، وهما عامل نمو بطانة الأوعية الدموية ( VEGF ) وبروتين المغزل الحركي ( KSP ). أظهرت النتائج فوائد سريرية، حيث استقر السرطان بعد ستة أشهر، أو تراجع انتشاره لدى بعض المرضى. وكشف التحليل الدوائي لعينات الخزعة المأخوذة من المرضى عن وجود جزيئات RNAi في العينات، مما يثبت وصولها إلى الهدف المنشود. [ 54 ] [ 55 ]

أشارت التجارب التي أثبتت المفهوم إلى أن جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNAs) التي تستهدف فيروس إيبولا قد تكون فعالة كوقاية بعد التعرض للفيروس لدى البشر، حيث نجا 100% من الرئيسيات غير البشرية من جرعة قاتلة من فيروس إيبولا زائير، وهو السلالة الأكثر فتكًا. [ 56 ]

تُصنّع جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) حاليًا كيميائيًا، ولذلك تُصنّف قانونيًا في الاتحاد الأوروبي والولايات المتحدة كمنتجات طبية بسيطة. ولكن مع تطوير جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير المُهندسة حيويًا (BERAs)، سيتم تصنيفها كمنتجات طبية بيولوجية، على الأقل في الاتحاد الأوروبي. ويثير تطوير تقنية BERAs تساؤلًا حول تصنيف الأدوية التي لها نفس آلية العمل ولكنها تُنتج كيميائيًا أو بيولوجيًا. ينبغي معالجة هذا التباين. [ 57 ]

التوصيل داخل الخلايا

تتمتع تقنية التداخل الرناوي (RNAi) بإمكانات هائلة للاستخدام العلاجي في إسكات أي جين بشكل مؤقت. ولتحقيق هذه الإمكانات، يجب إيصال جزيئات الرنا المتداخلة الصغيرة (siRNA) إلى موقع عملها في خلايا الأنسجة المستهدفة. إلا أن إيجاد آليات إيصال آمنة وفعالة يُعدّ عقبة رئيسية أمام تحقيق الإمكانات الكاملة للعلاجات القائمة على siRNA. فجزيئات siRNA غير المعدلة غير مستقرة في مجرى الدم، ولها القدرة على إحداث استجابة مناعية ، كما أنها تواجه صعوبة في اختراق أغشية الخلايا بسهولة. [ 58 ] ونتيجة لذلك، يلزم إجراء تعديلات كيميائية و/أو استخدام أدوات إيصال لنقل siRNA بأمان إلى موقع عملها. [ 58 ] توجد ثلاث تقنيات رئيسية لإيصال siRNA تختلف في كفاءتها وسميتها.

نقل الجينات

في هذه التقنية، يجب أولاً تصميم جزيء siRNA ليستهدف الجين المستهدف. بعد ذلك، يتم توصيله بفعالية عبر بروتوكول نقل الجينات. ويتم التوصيل عادةً باستخدام الليبوسومات الكاتيونية ، وجزيئات البوليمر النانوية، والاقتران بالدهون. [ 59 ] تتميز هذه الطريقة بقدرتها على توصيل siRNA إلى معظم أنواع الخلايا، وكفاءتها العالية، وقابليتها للتكرار، وتوفرها تجارياً. ومن أكثر الكواشف التجارية شيوعاً لنقل siRNA هما Lipofectamine وNeon Transfection. مع ذلك، فهي غير متوافقة مع جميع أنواع الخلايا، وكفاءتها منخفضة في الجسم الحي. [ 60 ] [ 61 ]

التثقيب الكهربائي

تُستخدم النبضات الكهربائية أيضًا لإيصال جزيئات siRNA إلى داخل الخلايا. يتكون غشاء الخلية من الفوسفوليبيدات، مما يجعله حساسًا للمجال الكهربائي. عند إطلاق نبضات كهربائية سريعة وقوية، تعيد جزيئات الدهون توجيه نفسها، وتخضع في الوقت نفسه لتحولات طورية حرارية نتيجة التسخين. ينتج عن ذلك مسامات محبة للماء واضطرابات موضعية في الطبقة الدهنية الثنائية لغشاء الخلية، وفقدان مؤقت للنفاذية الجزئية . يسمح هذا بخروج محتويات الخلية (الأيونات، والمستقلبات، وما إلى ذلك) وكذلك بامتصاص الأدوية، والمجسات الجزيئية، والأحماض النووية.

بالنسبة للخلايا التي يصعب نقل الجينات إليها ، يُعدّ التثقيب الكهربائي مفيدًا؛ إلا أن احتمالية موت الخلايا تزداد مع هذه التقنية. وقد استُخدمت هذه الطريقة لإيصال الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) الذي يستهدف عامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF) إلى الأورام المزروعة في الفئران العارية، مما أدى إلى كبح نمو الورم بشكل ملحوظ. [ 62 ]

التوصيل بوساطة الفيروسات

تكون تأثيرات إسكات الجينات الناتجة عن نقل جزيئات siRNA المصممة مؤقتة في الغالب، ولكن يمكن التغلب على هذه الصعوبة باستخدام تقنية التداخل الرناوي (RNAi). ويمكن إيصال هذه الجزيئات من قوالب الحمض النووي (DNA) عبر عدة نواقل فيروسية مُعاد تركيبها تعتمد على الفيروسات القهقرية، والفيروسات المرتبطة بالغدانية، والفيروسات الغدية ، والفيروسات البطيئة . [ 63 ] وبحسب الأبحاث الأولية التي أُجريت عام 2006، كان الفيروس البطيء الأكثر فعالية في إيصال جزيئات siRNA بشكل مستقر إلى الخلايا المستهدفة، إذ يمكن استخدامه لنقل الجينات إلى الخلايا غير المنقسمة، بالإضافة إلى استهداف النواة مباشرةً. [ 64 ] وقد صُممت هذه النواقل الفيروسية خصيصًا لتسهيل نقل جزيئات siRNA غير القابلة للعدوى إلى الخلايا.

في بعض الحالات، يمكن دمج جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) في جينوم الخلية باستخدام نواقل فيروسية اصطناعية، مما يسمح بالتعبير المستقر عن هذه الجزيئات وإسكات الجينات على المدى الطويل. تتميز هذه التقنية بكونها طريقة حيوية داخل الجسم الحي ، ويمكن أن تكون فعالة حتى مع الخلايا التي يصعب نقل الجينات إليها. مع ذلك، تظهر بعض المشاكل لأنها قد تحفز استجابات مضادة للفيروسات في بعض أنواع الخلايا، مما يؤدي إلى آثار طفرية ومناعية.

وقد ثبت أن هذه الطريقة لديها إمكانية استخدامها في إسكات جينات الجهاز العصبي المركزي، على سبيل المثال، في علاج مرض هنتنغتون . [ 65 ]

العلاجات

بعد عقد من اكتشاف آلية التداخل الرناوي (RNAi) عام ١٩٩٨، استثمر قطاع الأدوية بكثافة في البحث والتطوير لعلاج التداخل الرناوي المتداخل الصغير (siRNA). يتميز هذا العلاج بعدة مزايا مقارنةً بالجزيئات الصغيرة والأجسام المضادة، إذ يمكن إعطاؤه كل ثلاثة أشهر أو ستة أشهر. ومن مزاياه الأخرى أنه، على عكس الجزيئات الصغيرة والأجسام المضادة وحيدة النسيلة التي تتطلب التعرف على بنية بروتينية محددة، يعمل التداخل الرناوي المتداخل الصغير (siRNA) عن طريق اقتران قواعد واتسون-كريك مع الرنا المرسال (mRNA). وبالتالي، يمكن اختيار أي جزيء مستهدف يتطلب معالجة عالية الدقة والنوعية إذا توفر تسلسل النيوكليوتيدات المناسب. [ ٤٦ ] كان من أكبر التحديات التي واجهها الباحثون تحديد نظام توصيل فعال يسمح بدخول العلاجات إلى الجسم. ومن التحديات الأخرى أن الجهاز المناعي غالبًا ما يخطئ في تمييز علاجات التداخل الرناوي (RNAi) عن بقايا عوامل معدية، مما قد يؤدي إلى استجابة مناعية. [ ٤ ] لم تُحاكي النماذج الحيوانية بدقة درجة الاستجابة المناعية التي تُلاحظ لدى البشر، وعلى الرغم من النتائج الواعدة لهذا العلاج، فقد سحب المستثمرون استثماراتهم من التداخل الرناوي (RNAi). [ ٤ ]

مع ذلك، واصلت بعض الشركات تطوير علاجات التداخل الرناوي (RNAi) للبشر. ومن بين هذه الشركات : ألنيلام للأدوية ، وسيرنا ثيرابيوتكس ، وديسيرنا للأدوية، التي لا تزال تعمل على طرح علاجات التداخل الرناوي في السوق. وقد تبين أن معظم علاجات التداخل الرناوي المتداخل الصغير (siRNA) التي تُعطى عن طريق مجرى الدم تتراكم في الكبد. ولذلك، كانت معظم الأهداف الدوائية المبكرة أمراضًا تصيب الكبد. كما ساهمت الأبحاث التطويرية المتكررة في تحسين التركيب الكيميائي لجزيء الرنا لتقليل الاستجابة المناعية، مما يؤدي إلى آثار جانبية قليلة أو معدومة. [ 66 ] فيما يلي بعض العلاجات المعتمدة أو قيد التطوير.

شركة ألنيلام للأدوية

في عام ٢٠١٨، أصبحت شركة ألنيلام للأدوية أول شركة تحصل على موافقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية ( FDA ) لعلاج باستخدام تقنية الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) . وقد تمت الموافقة على دواء أونباترو (باتيسيران) لعلاج اعتلال الأعصاب المتعدد الناتج عن داء النشواني الوراثي بوساطة الترانسثيريتين (hATTR) لدى البالغين. يُعدّ داء النشواني الوراثي بوساطة الترانسثيريتين حالة نادرة ومُنهكة تدريجيًا. خلال الإصابة بهذا الداء، يترسب بروتين الترانسثيريتين (TTR) المطوي بشكل خاطئ في الفراغ خارج الخلوي. في الظروف الطبيعية، تتكون رباعيات بروتين الترانسثيريتين من أربعة مونومرات. ينجم داء النشواني الوراثي بوساطة الترانسثيريتين عن خلل أو طفرة في جين الترانسثيريتين (TTR)، وهي طفرة وراثية. يؤدي تغيير حمض أميني واحد فقط إلى تغيير بروتينات الترانسثيريتين الرباعية، مما ينتج عنه بروتين ترانسثيريتين رباعي غير مستقر يتجمع في مونومرات ويُشكّل رواسب نشوانية غير قابلة للذوبان خارج الخلية. يُسبب تراكم الأميلويد في مختلف أجهزة الجسم اعتلال عضلة القلب، واعتلال الأعصاب المتعدد، واضطرابات الجهاز الهضمي. ويُصيب هذا المرض 50,000 شخص حول العالم. ولإيصال الدواء مباشرةً إلى الكبد، يُغلّف الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) بجزيئات نانوية دهنية. يعمل جزيء siRNA على إيقاف إنتاج بروتينات الأميلويد عن طريق التدخل في إنتاج الحمض النووي الريبوزي (RNA) لبروتينات TTR غير الطبيعية. وهذا يمنع تراكم هذه البروتينات في مختلف أعضاء الجسم، ويساعد المرضى على السيطرة على هذا المرض. [ 67 ] [ 68 ]

تقليديًا، كان زرع الكبد العلاج القياسي لداء النشواني الوراثي الناتج عن بروتين الترانسثيريتين؛ إلا أن فعاليته قد تكون محدودة بسبب استمرار ترسب بروتين الترانسثيريتين الطبيعي بعد الزرع. كما توجد أدوية جزيئية صغيرة توفر راحة مؤقتة. قبل طرح دواء أونباترو، كانت خيارات علاج داء النشواني الوراثي الناتج عن بروتين الترانسثيريتين محدودة. بعد الموافقة على أونباترو، منحت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية شركة ألنيلام تصنيف العلاج المبتكر، وهو تصنيف يُمنح للأدوية التي تهدف إلى علاج حالة خطيرة وتُمثل تحسنًا كبيرًا مقارنةً بأي علاج متاح. كما مُنحت الشركة تصنيف دواء اليتيم، وهو تصنيف يُمنح للعلاجات التي تهدف إلى علاج الحالات التي تُصيب أقل من 200,000 شخص بأمان. [ 69 ]

إلى جانب أونباترو، تم تطوير دواء باتيسيران، وهو دواء علاجي آخر يعتمد على تقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi)، والذي يتميز بقدرته على تثبيط تخليق الترانسثيريتين في الكبد. ونتيجة لذلك، يتم شطر الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) المستهدف بواسطة جزيئات صغيرة من الحمض النووي الريبوزي المتداخل (siRNA) المرتبطة بمركب إسكات الحمض النووي الريبوزي . يستخدم باتيسيران، وهو دواء علاجي يعتمد على تقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi)، هذه العملية لتقليل إنتاج الترانسثيريتين المتحور والطبيعي عن طريق شطر المنطقة غير المترجمة 3' من الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) الخاص بالترانسثيريتين. [ 70 ]

في عام ٢٠١٩، وافقت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية على العلاج الثاني بتقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi)، وهو جيفلاري (جيفوسيران)، المستخدم لعلاج البورفيريا الكبدية الحادة. ينجم هذا المرض عن تراكم جزيئات البورفوبيلينوجين السامة ، التي تتكون أثناء إنتاج الهيم. تتراكم هذه الجزيئات في أعضاء مختلفة، مما قد يؤدي إلى ظهور أعراض أو نوبات البورفيريا الكبدية الحادة.

جيفلاري هو دواء من نوع siRNA يعمل على تثبيط التعبير عن إنزيم أمينوليفولينيك أسيد سينثاز 1 (ALAS1)، وهو إنزيم كبدي يشارك في خطوة مبكرة من إنتاج الهيم. ويؤدي تثبيط ALAS1 إلى خفض مستويات المركبات الوسيطة السامة للأعصاب التي تسبب أعراض فرط الاستقطاب التحسسي. [ 46 ]

أدت سنوات من البحث إلى فهم أعمق لعلاجات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) التي لا تقتصر على الكبد فقط. ففي عام ٢٠١٩، انخرطت شركة ألنيلام للأدوية في تطوير علاجات قد تعالج داء النشواني واضطرابات الجهاز العصبي المركزي مثل داء هنتنغتون وداء الزهايمر . [ ٤ ] كما عقدت شراكة مع شركة ريجينيرون للأدوية لتطوير علاجات لأمراض الجهاز العصبي المركزي والعين والكبد.

اعتبارًا من عام 2020، أصبح دواءا أونباترو وجيفلاري متاحين للاستخدام التجاري، كما تم تقديم طلبين للحصول على ترخيص دواء جديد من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) لاثنين من جزيئات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA)، وهما لوماسيران (ALN-GO1) وإنكليسيران . وتخضع العديد من جزيئات siRNA حاليًا لدراسات سريرية من المرحلة الثالثة، بينما لا يزال المزيد من المرشحين في المراحل المبكرة من التطوير. [ 46 ] وفي عام 2020، أعلنت شركتا ألنيلام وفير للأدوية عن شراكة وبدأتا العمل على علاج بتقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi) لعلاج الحالات الشديدة من كوفيد-19. [ 71 ]

ومن بين الشركات الأخرى التي حققت نجاحًا في تطوير مجموعة من علاجات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA)، شركة ديسيرنا للأدوية، بالشراكة مع شركة إيلي ليلي ، وشركة أروهيد للأدوية ، بالشراكة مع شركة جونسون آند جونسون . كما استثمرت العديد من شركات الأدوية الكبرى الأخرى، مثل أمجن وأسترازينيكا ، بكثافة في علاجات الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA)، نظرًا لما رأته من إمكانات واعدة في هذا المجال من الأدوية البيولوجية. [ 72 ]

للمزيد من القراءة

فيما يلي، في معظمها، مصادر ثانوية حديثة، تُقدم كمحتوى إضافي موثوق لدعم هذه المقالة.

  • هانون، جي جي، وروسي، جي جي (سبتمبر 2004). "إطلاق العنان لإمكانات الجينوم البشري باستخدام تقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي". مجلة نيتشر . 431 (7006): 371-378 . رمز Bibcode : 2004Natur.431..371H . doi : 10.1038/nature02870 . PMID 15372045. S2CID 4410723 .  مصدر ثانوي، 2004

انظر أيضاً

* التداخل الرناوي

مراجع

  1. ^ Laganà A، Veneziano D، Russo F، Pulvirenti A، Giugno R، Croce CM، Ferro A (2015). “التصميم الحسابي لجزيئات الحمض النووي الريبي الاصطناعية لتنظيم الجينات”. المعلوماتية الحيوية RNA . طرق في البيولوجيا الجزيئية. المجلد. 1269. الصفحات من 393 إلى 412. دوى : 10.1007/978-1-4939-2291-8_25 . رقم ISBN   978-1-4939-2290-1. PMC 4425273 . PMID 25577393 .  
  2. 1 2 3 4 5 6 7 مونغا، آي.، قريشي، أ.، ثاكور، ن.، غوبتا، أ.ك.، كومار، م. (2017). "ASPsiRNA: مورد لـ ASP-siRNAs ذات إمكانات علاجية للاضطرابات الوراثية البشرية وخوارزمية للتنبؤ بفعاليتها التثبيطية" . G3: الجينات، الجينومات، علم الوراثة . 7 ( 9 ): 2931-2943 . doi : 10.1534/g3.117.044024 . PMC 5592921. PMID 28696921. تاريخ الاسترجاع: 14 مايو 2026 .  
  3. ↑ بيرنشتاين إي ، كودي إيه إيه، هاموند إس إم، هانون جي جي (يناير 2001). "دور إنزيم الريبونيوكلياز ثنائي السن في خطوة بدء التداخل الرناوي". نيتشر . 409 ( 6818): 363-366 . Bibcode : 2001Natur.409..363B . doi : 10.1038/35053110 . PMID 11201747. S2CID 4371481 .  
  4. 1 2 3 4 5 6 أيزنشتاين م (16 أكتوبر 2019). "علاقة شركات الأدوية المتقلبة مع علاجات الحمض النووي الريبي". مجلة نيتشر . 574 (7778): S4– S6. Bibcode : 2019Natur.574S...4E . doi : 10.1038/d41586-019-03069-3 . S2CID 204741280 . 
  5. ↑ "جائزة نوبل في الطب أو علم وظائف الأعضاء لعام 2006" . NobelPrize.org . تم الاطلاع عليه بتاريخ 3 يونيو 2026 .
  6. ↑ هاميلتون إيه جيه، بولكومب دي سي (أكتوبر 1999). " نوع من الحمض النووي الريبوزي المضاد الصغير في إسكات الجينات بعد النسخ في النباتات". مجلة ساينس . 286 (5441): 950-952 . doi : 10.1126/science.286.5441.950 . PMID 10542148. S2CID 17480249 .  لا يمكن للمصادر الأولية أن تثبت تاريخ الاكتشاف الأول.
  7. ↑ البشير، إس. إم.، هاربورث، ج.، لينديكل، و.، يالتشين، أ.، ويبر، ك.، توشل، ت. (مايو 2001). "تتوسط ثنائيات الحمض النووي الريبوزي المكونة من 21 نيوكليوتيدًا عملية التداخل الريبوزي في الخلايا الثديية المستزرعة". مجلة نيتشر . 411 (6836): 494-498 . Bibcode : 2001Natur.411..494E . doi : 10.1038/35078107 . PMID: 11373684. S2CID : 710341 .  لا يمكن للمصادر الأولية أن تثبت تاريخ الاكتشاف الأول.
  8. ↑ تشين، تشيهانغ؛ كريشناماتشاري، بالاجي؛ باتشيكو-توريس، خيسوس؛ بينيه، ماري-فرانس؛ بهوجوالا، زافر م. (مارس 2020). "جسيمات نانوية من الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير ذات خصائص تشخيصية وعلاجية في الطب النانوي الدقيق للسرطان" . مجلة WIREs للطب النانوي والتكنولوجيا النانوية الحيوية . 12 (2) e1595. doi : 10.1002/wnan.1595 . ISSN 1939-5116 . PMC 7360334. PMID 31642207 .   
  9. ↑ لوفوس، بيتر (10 أغسطس 2018). "نوع جديد من الأدوية، يعمل على إسكات الجينات، يحصل على موافقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية" . صحيفة وول ستريت جورنال . تم الاطلاع عليه بتاريخ 26 مارس 2021 .
  10. ↑ قريشي أ، ثاكور ن، مونغا إ، ثاكور أ، كومار م (1 يناير 2014). "VIRmiRNA: مورد شامل لـ miRNAs الفيروسية التي تم التحقق منها تجريبياً وأهدافها" . قاعدة البيانات . 2014 bau103. doi : 10.1093/database/bau103 . PMC 4224276. PMID 25380780 .  
  11. ↑ ماك، جي إس (يونيو 2007). "الميكرو آر إن إيه يبدأ العمل". مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 25 (6): 631-638 . doi : 10.1038/nbt0607-631 . PMID 17557095. S2CID 35357127 .  
  12. ↑ "تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi)" . تم الاطلاع عليه بتاريخ 27 يوليو 2018 .
  13. ↑ شاري أ، زولدان ج، أدامو أ، سيم واي، تشو ن، جاكسون إي، وآخرون . (فبراير 2013). "منصة ميكروفلويدية خالية من النواقل للتوصيل داخل الخلايا" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 110 (6): 2082-2087 . Bibcode : 2013PNAS..110.2082S . doi : 10.1073 / pnas.1218705110 . PMC 3568376. PMID 23341631 .   
  14. ↑ داني هولت، ب. (2006). "معلومات متقدمة: تداخل الحمض النووي الريبي". جائزة الرواية في علم وظائف الأعضاء أو الطب .
  15. ↑ لي إل سي، أوكينو إس تي، تشاو إتش، بوكوت دي، بليس آر إف، أوراكامي إس، إينوكيدا إتش، داهيا آر (نوفمبر 2006). "تحفز جزيئات الحمض النووي الريبوزي المزدوجة الصغيرة التنشيط النسخي في الخلايا البشرية" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 103 (46): 17337-42 . Bibcode : 2006PNAS..10317337L . doi : 10.1073 / pnas.0607015103 . PMC 1859931. PMID 17085592 .  
  16. ↑ هوانغ ف، تشين ي، وانغ ج، وانغ إكس، بليس آر إف، لين ج، لو تي إف، لي إل سي (يناير 2010). جين دي واي (محرر). "يُحفظ الحمض النووي الريبوزي ألفا في خلايا الثدييات" . PLOS ONE . 5 (1) e8848. Bibcode : 2010PLoSO...5.8848H . doi : 10.1371/journal.pone.0008848 . PMC 2809750. PMID 20107511 .  
  17. ↑ دي هاير إل، أسد إس، حسين إم، وأسغاري إس (2020). "تنشيط الحمض النووي الريبوزي في الحشرات: التنشيط الموجه للجينات الداخلية والخارجية". الكيمياء الحيوية الجزيئية للحشرات . 119 103325. Bibcode : 2020IBMB..11903325D . doi : 10.1016/j.ibmb.2020.103325 . PMID 31981686 . 
  18. ↑ كلايكومب جيه إم، باتيستا بي جيه، بانغ كيه إم، وآخرون (2009). "يُعدّ بروتين أرجونوت CSR-1 وعوامله المساعدة 22G-RNA ضروريين لانفصال الكروموسومات الهولوسنترية" . مجلة Cell . 139 (1): 123-134 . doi : 10.1016/j.cell.2009.09.014 . PMC 2762760. PMID 19804756 .   
  19. ↑ شيبويا ك، فوكوشيما س، وتاكاتسوجي هـ (2009). "يحفز مثيلة الحمض النووي الموجهة بواسطة الحمض النووي الريبي تنشيط النسخ في النباتات" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 106 (5): 1660-1665 . Bibcode : 2009PNAS..106.1660S . doi : 10.1073/pnas.0809294106 . PMC 2629447. PMID 19164525 .  
  20. ↑ بورتنوي، في.، لين، إس. إتش.، لي، كيه. إتش.، بورلينغيم، إيه.، هو، زد. إتش.، لي، إتش.، لي، إل. سي. (مارس 2016). " استهداف Ago2 بواسطة saRNA لمركب RITA إلى المحفزات لتحفيز النسخ" . أبحاث الخلية . 26 (3): 320-335 . doi : 10.1038/cr.2016.22 . PMC 4783471. PMID 26902284 .  
  21. ↑ فوتيلا ج، ريبي ف، روبرتس ت.س، بروتوبابا ب، أندريكاكو ب، بلاكي د.س، حبيب ر، هوبر هـ، سيتروم ب، روسي ج.ج، حبيب ن.أ (ديسمبر 2017). "تطوير وآلية عمل الحمض النووي الريبوزي المنشط الصغير الذي يستهدف CEBPA، وهو علاج جديد قيد التجارب السريرية لسرطان الكبد" . العلاج الجزيئي . 25 (12): 2705-2714 . doi : 10.1016/j.ymthe.2017.07.018 . PMC 5768526. PMID 28882451 .  
  22. ↑ ساركير د، بلامر ر، ماير ت، وآخرون (2020). "MTL-CEBPA، وهو علاج RNA صغير مُنشِّط يُحفِّز C/EBP-alpha، لدى مرضى سرطان الكبد المتقدم: أول تجربة سريرية من المرحلة الأولى، متعددة المراكز، مفتوحة التسمية، على البشر" . مجلة أبحاث السرطان السريرية . 26 (15): 3936-3946 . doi : 10.1212/WNL.0000000000009491 . PMC 7403143. PMID 32354749 .   
  23. ↑ فريق راكتيجين (26 أبريل 2024). "راكتيجين ثيرابيوتكس تعلن عن موافقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية على RAG-01، وهو علاج رائد من نوعه بتقنية saRNA لسرطان المثانة غير الغازي المقاوم لعلاج BCG" (بيان صحفي) . Ractigen.com . تم الاطلاع عليه في 20 مايو 2026 .
  24. 1 2 لي واي إس، ناكاهارا كيه، فام جيه دبليو، كيم كيه، هي زد، سونثيمر إي جيه، كارثيو آر دبليو (أبريل 2004). "أدوار متميزة لـ Dicer-1 و Dicer-2 في ذبابة الفاكهة في مسارات إسكات siRNA/miRNA" . مجلة Cell . 117 (1): 69-81 . Bibcode : 2004Cell..117...69L . doi : 10.1016/s0092-8674(04)00261-2 . PMID 15066283. S2CID 6683459. تاريخ الاسترجاع: 20 مايو 2026 .  
  25. 1 2 كارثيو، آر دبليو، وسونثيمر، إي جيه (فبراير 2009). "أصول وآليات عمل الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNA) والحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA)" . مجلة Cell . 136 (4): 642-655 . doi : 10.1016/j.cell.2009.01.035 . PMC 2675692. PMID 19239886. تاريخ الاسترجاع: 20 مايو 2026 .  
  26. توماري واي ، زامور بي دي (مارس 2005). "منظور: آلات لتداخل الحمض النووي الريبوزي" . الجينات والتطور . 19 (5): 517-29 . doi : 10.1101/gad.1284105 . PMID 15741316. تاريخ الاسترجاع: 20 مايو 2026 . 
  27. ↑ أوربان تي آي، إيزورالدي إي (أبريل 2005). "تحلل الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) المستهدف بواسطة معقد RISC يتطلب XRN1، ومعقد Ski، والإكسوسوم" . RNA . 11 (4): 459-69 . doi : 10.1261/rna.7231505 . PMC 1370735. PMID 15703439. درسنا مسار تحلل الحمض النووي الريبوزي الرسول ( mRNA) المستهدف بواسطة معقد RISC في خلايا ذبابة الفاكهة. أظهرنا أن شظايا الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) من الطرف 5' الناتجة عن انقسام معقد RISC تتحلل بسرعة من نهاياتها 3' بواسطة الإكسوسوم، بينما تتحلل شظايا الطرف 3' من نهاياتها 5' بواسطة XRN1.  
  28. ↑ مونغا، آي.، وبانيرجي، آي. (2019). "التعرف الحاسوبي على جزيئات piRNA باستخدام خصائص تعتمد على تسلسل الحمض النووي الريبي، وبنيته، وخصائصه الديناميكية الحرارية والفيزيائية والكيميائية" ( ملف PDF) . علم الجينوم الحالي . 20 (2): 508-518 . doi : 10.2174/1389202920666191129112705 . PMC 7327968. PMID 32655289 .  
  29. ↑ أوزاتا دي إم، جاينتدينوف آي، زوش إيه، فيليب دي، زامور بي دي (2019). "الحمض النووي الريبوزي المتفاعل مع بروتين PIWI: جزيئات صغيرة ذات وظائف كبيرة" (ملف PDF) . مجلة Nature Reviews Genetics . 20 (2): 89-108 . doi : 10.1038/s41576-018-0073-3 . PMID 30446728. S2CID 53565676 .  
  30. 1 2 مارك إس، واينبرغ؛ كيفن في، موريس (أغسطس 2016). "إسكات الجينات النسخي في البشر" . أبحاث الأحماض النووية . 44 (14): 6505-6517 . doi : 10.1093/nar/ gkw139 . PMC 5001580. PMID 27060137 .  
  31. ↑ جاكسون، أ. ل.، ولينسلي، ب. س. (يناير 2010). "التعرف على التأثيرات الجانبية لجزيئات siRNA وتجنبها لتحديد الهدف والتطبيق العلاجي". مجلة Nature Reviews Drug Discovery ، 9 (1): 57-67 . Bibcode : 2010NRvDD...9...57J . doi : 10.1038/nrd3010 . PMID: 20043028. S2CID : 20903257 .  
  32. 1 2 وولف، تي إم، ميلتون، دي إيه، جينينغز، سي جي (أغسطس 1992). "خصوصية قليل النوكليوتيدات المضادة للجينات في الجسم الحي" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 89 (16): 7305-9 . Bibcode : 1992PNAS...89.7305W . doi : 10.1073/pnas.89.16.7305 . PMC 49698. PMID 1380154 .  
  33. ↑ دوا ب، يو جيه دبليو، كيم إس، لي دي كيه (سبتمبر 2011). "بنية siRNA معدلة مع انتفاخ نيوكليوتيد واحد تتغلب على إسكات الجينات خارج الهدف بوساطة siRNA التقليدية" . العلاج الجزيئي . 19 (9): 1676-1687 . doi : 10.1038/mt.2011.109 . PMC 3182346. PMID 21673662 .  
  34. ↑ وايت هيد، ك. أ.، دالمان، ج. إ.، لانجر، ر. س.، أندرسون، د. ج. (17 يونيو 2011). "التثبيط أم التحفيز؟ توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) والجهاز المناعي". المراجعة السنوية للهندسة الكيميائية والبيولوجية الجزيئية . 2 (1): 77-96 . doi : 10.1146/annurev-chembioeng-061010-114133 . PMID 22432611. S2CID 28803811 .  
  35. ↑ ماتسوميا تي، ستافوريني دي إم (2010). " وظيفة وتنظيم الجين-1 المحفز بحمض الريتينويك" . مراجعات نقدية في علم المناعة . 30 (6): 489-513 . doi : 10.1615/critrevimmunol.v30.i6.10 . PMC 3099591. PMID 21175414 .  
  36. ↑ باروي تي، سورنسن ك، ليندبيرغ إم إم، فرينجن إي (يونيو 2010). "بنى التعبير عن الحمض النووي الريبوزي المتداخل القصير (shRNA) المصممة مباشرةً من تسلسلات قليل النوكليوتيدات للحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA)". التكنولوجيا الحيوية الجزيئية . 45 (2): 116-120 . doi : 10.1007/s12033-010-9247-8 . PMID 20119685. S2CID 24309609 .  
  37. ↑ برمنغهام أ، أندرسون إي إم، رينولدز أ، إيلسلي-تايري د، ليك د، فيدوروف ي، وآخرون (مارس 2006). " تطابقات البذور في منطقة 3' غير المترجمة، وليس التطابق الكلي، مرتبطة بالأهداف غير المستهدفة لتقنية التداخل الرناوي". مجلة نيتشر ميثودز . 3 (3): 199-204 . doi : 10.1038/nmeth854 . PMID 16489337. S2CID 52809577 .   
  38. ↑ ويتروب أ، ليبرمان ج (سبتمبر 2015). "القضاء على المرض: تقرير مرحلي عن العلاجات باستخدام الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير" . مجلة نيتشر ريفيوز. علم الوراثة . 16 (9): 543-552 . doi : 10.1038/nrg3978 . PMC 4756474. PMID 26281785 .  
  39. ↑ خان، أ.أ.، بيتيل، د.، ميلر، م.ل.، ساندر، س.، ليزلي، س.س.، ماركس، د.س. (يونيو 2009). "نقل الحمض النووي الريبوزي الصغير يُخلّ بتنظيم الجينات بواسطة الحمض النووي الريبوزي الميكروي الداخلي على مستوى الجينوم" . مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 27 (6): 549-555 . doi : 10.1038/nbt.1543 . PMC 2782465. PMID 19465925 .  
  40. ↑ غريم د، ستريتز ك ل، جوبلينغ س ل، ستورم ت أ، باندي ك، ديفيس س ر، وآخرون . (مايو 2006). "وفاة في الفئران نتيجة الإفراط في تشبع مسارات الحمض النووي الريبوزي الميكروي/الحمض النووي الريبوزي القصير ذي الحلقة الدبوسية". نيتشر . 441 ( 7092): 537-41 . Bibcode : 2006Natur.441..537G . doi : 10.1038/nature04791 . PMID 16724069. S2CID 15118504 .   
  41. ↑ دار إس إيه، ثاكور إيه، قريشي إيه، كومار إم (يناير 2016). "siRNAmod: قاعدة بيانات لـ siRNAs المعدلة كيميائيًا والمُثبتة تجريبيًا" . التقارير العلمية . 6 (1) 20031. Bibcode : 2016NatSR...620031D . doi : 10.1038/srep20031 . PMC 4730238. PMID 26818131 .  
  42. ↑ هيكرسون آر بي، سميث إف جيه، ريفز آر إي، كونتاج سي إتش، ليك دي، ليتشمان إس إيه، وآخرون . (مارس 2008). "استهداف الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) الخاص بالنيوكليوتيدات المفردة في نموذج جلدي سائد سلبي". مجلة الأمراض الجلدية الاستقصائية . 128 (3): 594-605 . CiteSeerX 10.1.1.465.8240 . doi : 10.1038/sj.jid.5701060 . PMID 17914454 .   
  43. ↑ أليكسييف أو إم، ريتشاردسون آر تي، أليكسييف أو، أوراند إم جي (مايو 2009). "تحليل أنماط التعبير الجيني في خلايا هيلا استجابةً لفرط التعبير أو استنزاف NASP بوساطة siRNA" . علم الأحياء التناسلية والغدد الصماء . 7 (1) 45. doi : 10.1186/1477-7827-7-45 . PMC 2686705. PMID 19439102 .  
  44. ↑ محفوظ أ، خان م أ، ساجيب إ ح، ديب أ، محمود س، حسن م، سها أ، إسلام أ، رحمان م م (أغسطس 2022). "تصميم جزيئات siRNA محتملة لإسكات جين بروتين النيوكليوكابسيد لفيروس نيباه: دراسة حسابية" . العدوى، علم الوراثة والتطور: مجلة علم الأوبئة الجزيئية وعلم الوراثة التطوري في الأمراض المعدية . 102 105310. Bibcode : 2022InfGE.10205310M . doi : 10.1016/j.meegid.2022.105310 . ISSN 1567-7257 . PMID 35636695 .  
  45. 1 2 3 4 بيتروكا ف، ليبرمان ج (فبراير 2011). "وعد وتحدي العلاج القائم على تداخل الحمض النووي الريبوزي للسرطان". مجلة علم الأورام السريري . 29 (6): 747-54 . doi : 10.1200/JCO.2009.27.6287 . PMID 21079135. S2CID 15337692 .  
  46. ١ ٢ ٣ ٤ هو ب، تشونغ ل، وينغ ي، بينغ ل، هوانغ ي، تشاو ي، ليانغ إكس جيه (يونيو ٢٠٢٠). "العلاج باستخدام الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير : أحدث التقنيات" . نقل الإشارة والعلاج الموجه . ٥ (١) ١٠١. doi : 10.1038/s41392-020-0207-x . PMC ٧٣٠٥٣٢٠. PMID ٣٢٥٦١٧٠٥ .  
  47. شين هـ ، صن ت، فيراري م (يونيو 2012). "توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA ) باستخدام ناقلات نانوية لعلاج السرطان" . العلاج الجيني للسرطان . 19 (6): 367-373 . doi : 10.1038/cgt.2012.22 . PMC 3842228. PMID 22555511 .  
  48. 1 2 3 بورنيت جيه سي، روسي جيه جيه (يناير 2012). "العلاجات القائمة على الحمض النووي الريبي: التقدم الحالي والآفاق المستقبلية" . الكيمياء والبيولوجيا . 19 (1): 60-71 . doi : 10.1016/j.chembiol.2011.12.008 . PMC 3269031. PMID 22284355 .  
  49. ↑ البشير، إس. إم.، لينديكل، دبليو.، توشل، تي. (يناير 2001). "التداخل الرناوي يتوسطه الرنا المكون من 21 و22 نيوكليوتيدًا" . الجينات والتطور . 15 (2): 188-200 . doi : 10.1101/gad.862301 . PMC 312613. PMID 11157775 .  
  50. ↑ هايدل، جيه دي، يو، زد، ليو، جيه واي، ريل، إس إم، ليانغ، واي، زيدان، آر كيه، وآخرون . (أبريل 2007). "إعطاء جرعات متزايدة عن طريق الوريد من جسيمات نانوية موجهة تحتوي على الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA ) للوحدة الفرعية M2 من إنزيم اختزال الريبونوكليوتيد في الرئيسيات غير البشرية" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 104 (14): 5715-21 . Bibcode : 2007PNAS..104.5715H . doi : 10.1073/pnas.0701458104 . PMC 1829492. PMID 17379663 .   
  51. 1 2 3 4 غوميز إم جيه، دراير جيه، بروير جيه، مارتينز إس، براندل إم، سارمينتو بي (أبريل 2016). "نهج جديد لنموذج حاجز الدم الدماغي قائم على حويصلات الفوسفوليبيد: تطور الغشاء ونفاذية الجسيمات النانوية المحملة بـ siRNA". مجلة علوم الأغشية . 503 : 8-15 . doi : 10.1016/j.memsci.2016.01.002 .
  52. ↑ شوكلا آر إس، تشين بي، تشينغ كيه (أكتوبر 2014). "الببتيدات المستخدمة في توصيل الحمض النووي الريبوزي الصغير غير المشفر" . الصيدلة الجزيئية . 11 (10): 3395-408 . doi : 10.1021/mp500426r . PMC 4186677. PMID 25157701 .  
  53. ↑ تانسي ب (11 أغسطس 2006). "دواء واعد للعين من شركة في سان فرانسيسكو / علاج التنكس البقعي يتداخل مع رسائل الحمض النووي الريبي" . SFGATE .
  54. ↑ «دراسة أولية على البشر تُظهر التأثير العلاجي لتثبيط الجينات بتقنية RNAi في علاج السرطان» (بيان صحفي). معهد فال ديهيبرون للأورام. ١١ فبراير ٢٠١٣.
  55. ↑ تابيرنيرو ج، شابيرو جي آي، لوروسو بي إم، سيرفانتس أ، شوارتز جي كي، فايس جي جي، وآخرون . (أبريل 2013). "أول تجربة سريرية على البشر لعلاج تداخل الحمض النووي الريبوزي (RNAi) يستهدف عامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF) وبروتين KSP لدى مرضى السرطان المصابين بتلف الكبد" . مجلة Cancer Discovery . 3 (4): 406-17 . doi : 10.1158/2159-8290.CD-12-0429 . PMID 23358650 .  
  56. ↑ جيسبرت تي دبليو، لي إيه سي، روبنز إم، جيسبرت جيه بي، هونكو إيه إن، سود في، وآخرون . (مايو 2010). "الحماية بعد التعرض لفيروس إيبولا المميت لدى الرئيسيات غير البشرية باستخدام تقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي: دراسة لإثبات المفهوم" . مجلة لانسيت . 375 (9729): 1896-1905 . doi : 10.1016/S0140-6736(10)60357-1 . PMC 7138079. PMID 20511019 .   
  57. ↑ غيريو، ماثيو؛ كوهلي، إيفلين (2022). "الأدوية القائمة على الحمض النووي الريبي وتنظيمها: نحو تطور ضروري للتعريفات الصادرة عن تشريعات الاتحاد الأوروبي" . فرونتيرز إن ميديسين . 9 1012497. doi : 10.3389/fmed.2022.1012497 . ISSN 2296-858X . PMC 9618588. PMID 36325384 .   
  58. 1 2 روزماري، كاناستي (2013). "مواد توصيل العلاجات بتقنية siRNA". نات ماتير . 12 (11): 967-977 . Bibcode : 2013NatMa..12..967K . doi : 10.1038/nmat3765 . PMID 24150415 . 
  59. ↑ فانيلي أ (2016). "النقل الجيني: النقل الجيني في المختبر " . تم الاطلاع عليه بتاريخ 5 ديسمبر 2017 .
  60. ↑ جينسن ك، أندرسون جيه إيه، جلاس إي جيه (أبريل 2014). "مقارنة توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) إلى البلاعم المشتقة من الخلايا الوحيدة البقرية عن طريق النقل الجيني والتحفيز الكهربائي" . علم المناعة البيطرية وعلم الأمراض المناعية . 158 ( 3-4 ): 224-232 . doi : 10.1016/j.vetimm.2014.02.002 . PMC 3988888. PMID 24598124 .  
  61. ↑ تشاترجيا إم إن (2012). كتاب الكيمياء الحيوية الطبية ( الطبعة الثامنة). نيودلهي: دار جايبي براذرز للنشر الطبي. ص 304.  
  62. ↑ تاكي واي (2014). "إيصال الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) إلى الأورام بوساطة التثقيب الكهربائي". بروتوكولات التثقيب الكهربائي . طرق في البيولوجيا الجزيئية. المجلد 1121. الصفحات 131-138 . doi : 10.1007/978-1-4614-9632-8_11 . ISBN   978-1-4614-9631-1PMID 24510818​​ 
  63. ↑ تالوار جي بي، حسنين إس، سارين إس كيه (يناير 2016). كتاب في الكيمياء الحيوية، والتكنولوجيا الحيوية، والطب المساعد والطب الجزيئي ( الطبعة الرابعة). دار نشر بي إتش آي ليرنينج الخاصة المحدودة. ص 873. ISBN   978-81-203-5125-7.
  64. ↑ موريس كيه في، روسي جيه جيه (مارس 2006). "توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) بواسطة الفيروسات البطيئة للعلاج المضاد للفيروسات" . العلاج الجيني . 13 (6): 553-558 . doi : 10.1038/sj.gt.3302688 . PMC 7091755. PMID 16397511 .  
  65. ↑ كامبون ك، ديجلون ن (2013). "نقل الجينات بواسطة الفيروسات البطيئة لجزيئات siRNA لعلاج مرض هنتنغتون". بروتوكولات تكرار النيوكليوتيدات الثلاثية . طرق في البيولوجيا الجزيئية. المجلد 1010. الصفحات 95-109 . doi : 10.1007/978-1-62703-411-1_7 . ISBN   978-1-62703-410-4PMID 23754221​​ 
  66. ↑ تيمان ك، روسي جيه جيه (يونيو 2009). "العلاجات القائمة على تقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي - الوضع الحالي والتحديات والآفاق" . مجلة EMBO للطب الجزيئي . 1 (3): 142-151 . doi : 10.1002/emmm.200900023 . PMC 3378126. PMID 20049714 .  
  67. ↑ يونيزاوا، سي؛ كويدي، هيرويوكي؛ أساي، توموهيرو (2020). "التطورات الحديثة في توصيل الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) بواسطة الجسيمات النانوية الدهنية" . مراجعات توصيل الأدوية المتقدمة . 154 : 64-78 . doi : 10.1016/j.addr.2020.07.022 . ISSN 0169-409X . PMC 7406478. PMID 32768564 .   
  68. ↑ مكتب المفوض (24 مارس 2020). "إدارة الغذاء والدواء الأمريكية توافق على أول علاج من نوعه يعتمد على الحمض النووي الريبوزي الموجه لعلاج مرض نادر" . إدارة الغذاء والدواء الأمريكية . مؤرشف من الأصل في 31 مايو 2019. تم الاطلاع عليه في 24 مايو 2021 .
  69. ↑ « إدارة الغذاء والدواء الأمريكية توافق على أول علاج من نوعه يعتمد على الحمض النووي الريبوزي الموجه لعلاج مرض نادر» (بيان صحفي). إدارة الغذاء والدواء الأمريكية. ١٠ أغسطس ٢٠١٨. مؤرشف من الأصل في ٣١ مايو ٢٠١٩.
  70. ↑ ديفيد، آدامز (5 يوليو 2018). "باتيسيران، علاج بتقنية تداخل الحمض النووي الريبوزي، لداء النشواني الوراثي الناتج عن بروتين الترانسثيريتين" . مجلة نيو إنجلاند الطبية . 379 (1): 11-21 . doi : 10.1056/NEJMoa1716153 . hdl : 2445/138257 . PMID 29972753 . 
  71. ↑ "فير وألنيلام توسعان تعاونهما للنهوض بالعلاجات التجريبية بتقنية RNAi التي تستهدف عوامل المضيف لـ t" . علاقات المستثمرين | شركة ألنيلام للأدوية . تم الاطلاع عليه بتاريخ 24 مايو 2021 .
  72. ↑ "أصبحت شركتا ألنيلام وديسيرنا صديقتين الآن، وهو ما قد يُنذر بمتاعب لشركة أروهيد" . بيوفارما دايف . تم الاطلاع عليه بتاريخ 24 مايو 2021 .