التنظير الداخلي البؤري

تقنية pCLE، التي طورتها شركة ماونا كيا تكنولوجيز ، عبارة عن حزمة ألياف ضوئية تمر عبر  قناة العمل (الفتحة المجوفة) بقطر 2.8 مم في المنظار الداخلي القياسي إلى الجهاز الهضمي. ^{[ 1 ]} وبفضل مستوى التصوير الثابت، تعمل كل ليف ضوئي كفتحة صغيرة لتصفية التشويش غير المرغوب فيه. ويتراوح معدل الإطارات بين 9 و12 صورة في الثانية. ^{[ 1 ]}

يُعدّ جهاز eCLE، الذي طورته شركة بنتاكس ، مجهرًا متحد البؤر يُثبّت في نهاية أنبوب المنظار. يتميز جهاز eCLE المدمج بقطر أكبر من جهاز pCLE، مما يجعل إدخال أنبوب المنظار في الجهاز الهضمي أكثر صعوبة. وقد توقف إنتاج جهاز eCLE تجاريًا بسبب عدم مرونة كاميرته. ^{[ 1 ]}

يُعدّ التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE) فعالاً في الكشف عن الآفات ما قبل السرطانية ، بما في ذلك مريء باريت ، والآفات الخبيثة ( السرطانية ) في الجزء العلوي من الجهاز الهضمي. ^{[ 3 ] [ 6 ] [ 7 ]} ويمكن تحديد التغيرات التي تطرأ على الغشاء المخاطي، والتي تظهر في الفحص النسيجي كمؤشر على الخباثة، باستخدام التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر، مثل خلل التنسج عالي الدرجة . كما يُمكن استخدام التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر في علاج مريء باريت عن طريق قياس الامتداد الجانبي للورم . ^{[ 3 ] [ 7 ]}

يُعد تصنيف ميامي النظام الأكثر شيوعًا في تشخيص التهاب المريء المزمن بالمنظار. ^{[ 6 ] [ 8 ]}

على غرار المريء، يُمكن لتقنية التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE) الكشف عن سرطان المعدة في مراحله المبكرة ، بالإضافة إلى الحالات ما قبل السرطانية، مثل التهاب المعدة والتحول المعوي . ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 6 ]} تستطيع هذه التقنية الكشف عن أنماط حفر المعدة وتمييزها لتحديد المرض وفقًا لتصنيف ميامي، الذي تم تحسينه في عام 2016 ليشمل أنماط الحفر وبنية الأوعية الدموية. ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 8 ] [ 9 ]} يُتيح هذا التصنيف المُحسّن للأطباء التمييز بين الآفات الورمية وغير الورمية. ^{[ 9 ]}

يمكن أيضاً تحديد وجود جرثومة الملوية البوابية باستخدام المجهر الضوئي ذي العدسة المتقاطعة من خلال معاينة التغيرات المورفولوجية في الأنسجة. ^{[ 10 ] [ 11 ]}

يكشف الفحص المجهري بالليزر متحد البؤر عن نمط يشبه كرة القدم للأوعية الدموية الشعرية الضيقة في الأورام اللمفاوية الخبيثة؛ وبنية مشوهة وتسرب الفلورسين من تجويف الأمعاء في سرطان غدي قولوني؛ وزغابات وخبايا ذات شكل غير حاد وزيادة في الخلايا اللمفاوية داخل الظهارة في مرض السيلياك. ^{[ 1 ] [ 2 ] [ 12 ]}

يمكن استخدام التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE) لتحديد الأورام الحميدة والأورام في سلائل القولون والمستقيم والآفات . [ ^{13 ] [ 14 ] يوفر} تصنيف ميامي إرشادات للأطباء للتمييز بين الآفات الورمية وغير الورمية. ^{[ 8 ]}

باستخدام التنظير الداخلي بالموجات فوق الصوتية (EUS)، يُمكن لتقنية التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE) تشخيص آفات البنكرياس الكيسية بدقة ، بما في ذلك الآفات المخاطية وغير المخاطية. ^{[ 2 ] [ 16 ]} تُستخدم إبر خاصة لجمع السوائل وأنسجة جدار الكيس لإجراء الاختبارات. ^{[ 16 ]} كما يُمكن رؤية سرطان غدي قنوي البنكرياس (PDAC) باستخدام تقنية CLE. ^{[ 4 ]} من خلال مراقبة الآفات الكيسية وسرطان غدي قنوي البنكرياس، يستطيع الأطباء تحديد التهاب البنكرياس المزمن في مراحله المبكرة وتحديد مدى خباثة الآفات. ^{[ 4 ]}

يمكن رؤية تضيق القناة الصفراوية بواسطة التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE). ^{[ 1 ]} يمكن تكييف تصنيفي ميامي وباريس للتمييز بين الأسباب السرطانية والالتهابية . ^{[ 17 ]}

يمكن التمييز بين الالتهاب والأورام الخبيثة في الرئة والجهاز البولي باستخدام تقنية التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE)، وهذا الأمر قيد البحث حاليًا. ^{[ 10 ] [ 18 ]} وقد اقتُرحت بعض الاستخدامات الأخرى، مثل تشخيص سرطان الفم وسرطانات الرأس والرقبة الأخرى. ^{[ 19 ] [ 20 ]}

تُستخدم الأجسام المضادة للأهداف الجزيئية لتشخيص أمراض الجهاز الهضمي عن طريق الفحص النسيجي. ^{[ 21 ] [ 22 ]} يلتقط التصوير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE ) الفلورة الناتجة عن ارتباط أجسام مضادة محددة بعامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF). وبمقارنة الفرق الكبير في شدة الفلورة، يستطيع الأطباء التمييز بين الأنسجة الطبيعية والأنسجة السرطانية . ويمكن تطبيق التصوير الجزيئي باستخدام الأجسام المضادة على التصوير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE) كمعيار تشخيصي نظرًا لارتباطه الوثيق بالمجهر خارج الجسم الحي . ^{[ 21 ]}

يمكن استخدام تقنية التصوير الجزيئي بطريقة مماثلة في فحص سرطان الرأس والرقبة باستخدام المجهر الليزري متحد البؤر، على الرغم من أن الأهداف التشخيصية قد تختلف عن تلك الموجودة في الجهاز الهضمي. ^{[ 20 ] [ 23 ]}

ينعكس شعاع الليزر المنبعث من تقنية CLE عبر ثقب صغير بواسطة مقسم الشعاع أو مرآة ثنائية اللون ، ثم يُركز بواسطة عدسة موضوعية . يُثار الصبغ الفلوري في النسيج المستهدف، فيُصدر طولًا موجيًا محددًا. بعد ذلك، تُجمع الأشعة المنبعثة من مستوى بؤرة النسيج بواسطة العدسة الموضوعية ومقسم الشعاع. يُرشح شعاع الليزر في النهاية بواسطة ثقب صغير لتقليل التشويش الناتج عن عدم التركيز قبل دخوله إلى الكاشف أو أنبوب المضاعف الضوئي . ^{[ 1 ]} من خلال تضمين الضوء المنعكس من نفس مستوى البؤرة فقط، واستبعاد أي تشتت انعكاسي آخر، يلتقط النظام مقطعًا صغيرًا عالي الدقة من النسيج. تُكرر عملية الإضاءة والكشف هذه عبر عينة النسيج بأكملها لتكوين صورة كاملة. يسمح تحديد مستوى البؤرة بهذه الطريقة بالتقطيع البصري، مما يقلل من الضبابية الملاحظة في المجهر الضوئي التقليدي.

الأصباغ الوريدية

يُعدّ الفلورسين الصبغة الأكثر شيوعًا في الحقن الوريدي لتصوير القرنية بالمنظار. وهو صبغة معتمدة من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية، ويُستخدم بشكل روتيني في عيادات طب العيون نظرًا لظهوره باللون الأخضر تحت ضوء الكوبالت الأزرق. [12] يُستخدم الفلورسين موضعيًا لتشخيص أمراض القرنية ^{باستخدام مجهر المصباح} الشقي، بما في ذلك سحجات القرنية والقرح والالتهابات ؛ أو يُحقن وريديًا لتشخيص أمراض الشبكية باستخدام تصوير الأوعية الدموية، بما في ذلك التنكس البقعي واعتلال الشبكية السكري . في تصوير القرنية بالمنظار، يُعطى الفلورسين عادةً وريديًا مباشرةً قبل إدخال أنبوب المنظار . وقد ذُكر أن الفلورة تكون في أوجها خلال فترة تتراوح من بضع ثوانٍ إلى 8 دقائق. ^{[ 1 ]} يتخلص الجسم من الفلورسين ببطء ؛ لذا تتلاشى الفلورة تدريجيًا حتى تصل إلى أدنى مستوى يمكن رصده بعد ساعة واحدة، مما يتيح للأطباء فرصةً لإجراء الفحوصات اللازمة. ^{[ 1 ]}

يُصعّب مجال الرؤية الضيق لتقنية التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE) على الأطباء تحديد موقع ومسار المسبار، مما يجعل مطابقة الصورة الملتقطة مع موقع الآفة واتجاهها أمرًا صعبًا. وقد اقترحت الأبحاث خوارزمية للتعرف على التجاويف ، تتنبأ بإزاحة البكسل بناءً على زاوية الحركة والمسافة. ومن خلال استعادة مسار الاستكشاف في تقنية CLE، يستطيع الأطباء تحديد المواقع المهمة وتحسين كفاءة التشخيص . ^{[ 24 ]}

تُحدد دقة الصورة الناتجة بواسطة الفتحة العددية (NA) للعدسة الشيئية، ومعامل انكسار الوسط المحيط (η)، وطول موجة الضوء (λ)، وحجم الثقب الدقيق. يسمح الطول الموجي الأقصر بتمييز التفاصيل الأصغر، بينما تسمح الفتحة العددية الأكبر للنظام بتجميع المزيد من الضوء ورؤية تفاصيل أدق. وبالمثل، يمكن للثقوب الدقيقة الأصغر حجب الضوء المتناثر، ولكن إذا كانت صغيرة جدًا فقد تُقلل من شدة الإشارة. يؤثر معامل انكسار الوسط المحيط بالنسيج أيضًا على جودة الصورة النهائية من خلال التأثير على كيفية تركيز ضوء الليزر. في النهاية، يمكن تعريف الدقة الجانبية والمحورية بما يلي:

R _lateral = 0.4λ / NA ^{[ 25 ]}

R _{المحوري} = 1.4η / (NA) ^{2 [ 25 ]}

اقترحت الأبحاث طريقة تقييم جديدة لفلترة الصور الناتجة عن التصوير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE). ونظرًا لأن التصوير المجهري بالليزر متحد البؤر غالبًا ما يواجه تشوهات في الصورة ، فإن تدهور جودة الصورة وفقدان معلوماتها يزيدان من صعوبة التشخيص الدقيق . ^{[ 26 ]} وتقوم طريقة تقييم جودة الصورة الجديدة (IQA)، التي تستخدم قانون ويبر والمؤشرات المحلية، بتقييم جودة الصور وفلترة الصور ذات القيمة التشخيصية المنخفضة. ^{[ 26 ]}

قد يؤدي استخدام التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر (CLE)، على غرار تقنيات التنظير التشخيصية الأخرى، إلى التهاب البنكرياس عند فحص البنكرياس. ^{[ 13 ] [ 27 ]} ويزداد احتمال الإصابة بالتهاب البنكرياس بشكل خاص عند استخدام التنظير المجهري بالليزر متحد البؤر بالإبرة. ويمكن تقليل حدوث ذلك عن طريق تقصير مدة الفحص وتجنب تحريك الإبرة بشكل مفرط داخل جدار الكيس البنكرياسي. ^{[ 13 ]}

تشمل الآثار الجانبية الخفيفة، وهي نادرة، ^{[ 1 ]}

• غثيان
• التقيؤ مع ألم خفيف في أعلى البطن
• طفح جلدي في موضع الحقن
• انخفاض ضغط الدم العابر بدون صدمة
• احمرار منتشر

يمكن السيطرة على هذه الآثار ما لم يكن لدى المرضى تجارب سابقة معها. ^{[ 1 ]}

تم الإبلاغ عن حالات تأق (صدمة تحسسية) نتيجة استخدام الفلورسين في طب العيون. يمكن أن يقلل الاستخدام الوقائي لمضادات الهيستامين من احتمالية حدوث ردود فعل تحسسية، أو يمكن لاختبارات وخز الجلد تحديد خطر حدوث ردود فعل تحسسية. ^{[ 1 ]}

يُعد الأكري فلافين، وهو عامل تباين آخر يُستخدم في التصوير المجهري بالليزر متحد البؤر، مادةً مُسرطنةً محتملةً للإنسان نظرًا لقدرته المعروفة على إحداث الطفرات . ولذلك، لم تُجز إدارة الغذاء والدواء الأمريكية استخدام هذه الصبغة. ^{[ 13 ]}