المجهر

📅 آخر تحديث: ٢٣ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٣ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 29 صور
الموسوعة الحرة
صورة مجهرية إلكترونية ماسحة لحبوب اللقاح (ألوان زائفة)
الفحص المجهري في مختبر الكيمياء الحيوية

المجهرية هي المجال التقني الذي يستخدم المجاهر لرؤية الأجسام الصغيرة جدًا بحيث لا يمكن رؤيتها بالعين المجردة (الأجسام التي لا تقع ضمن نطاق دقة العين الطبيعية). [ 1 ] وهناك ثلاثة فروع معروفة للمجهرية: المجهرية الضوئية ، والمجهرية الإلكترونية ، ومجهر المسح المجهري ، بالإضافة إلى مجال مجهر الأشعة السينية الناشئ . [ 2 ]

تعتمد المجهرية الضوئية والإلكترونية على حيود أو انعكاس أو انكسار الإشعاع الكهرومغناطيسي /حزم الإلكترونات المتفاعلة مع العينة ، وجمع الإشعاع المتناثر أو أي إشارة أخرى لتكوين صورة. يمكن إجراء هذه العملية إما بتعريض العينة لإشعاع واسع المجال (كما في المجهرية الضوئية التقليدية والمجهرية الإلكترونية النافذة ) أو بمسح العينة بشعاع دقيق (كما في المجهرية الليزرية الماسحة البؤرية والمجهرية الإلكترونية الماسحة ). أما مجهرية المسح المجهري فتعتمد على تفاعل مسبار المسح مع سطح الجسم المراد دراسته. أحدث تطوير المجهرية ثورة في علم الأحياء ، وأدى إلى ظهور علم الأنسجة ، ولذا لا تزال تقنية أساسية في علوم الحياة والعلوم الفيزيائية . تتميز مجهرية الأشعة السينية بأنها ثلاثية الأبعاد وغير مدمرة، مما يسمح بتصوير العينة نفسها بشكل متكرر لإجراء دراسات في الموقع أو دراسات رباعية الأبعاد، كما تتيح إمكانية "رؤية ما بداخل" العينة قيد الدراسة قبل إخضاعها لتقنيات ذات دقة أعلى. يستخدم المجهر ثلاثي الأبعاد للأشعة السينية تقنية التصوير المقطعي المحوسب ( microCT )، حيث يُدار النموذج 360 درجة ويُعاد بناء الصور. يُجرى التصوير المقطعي المحوسب عادةً باستخدام شاشة عرض مسطحة. يستخدم المجهر ثلاثي الأبعاد للأشعة السينية مجموعة من العدسات الشيئية، مثلاً من 4X إلى 40X، ويمكن أن يتضمن أيضاً شاشة عرض مسطحة.

تاريخ

أنتوني فان ليفينهوك (1632–1723)

يعود تاريخ علم المجهر ( المجهر الضوئي ) إلى القرن السابع عشر على الأقل. أما المجاهر القديمة، وهي عبارة عن عدسات مكبرة أحادية ذات تكبير محدود، فتعود إلى القرن الثالث عشر على الأقل، بالتزامن مع الاستخدام الواسع للعدسات في النظارات [ 3 ] . لكن المجاهر المركبة الأكثر تطورًا ظهرت لأول مرة في أوروبا حوالي عام 1620 [ 4 ] [ 5 ]. ومن أوائل رواد علم المجهر غاليليو غاليلي ، الذي اكتشف عام 1610 أنه يستطيع تركيز تلسكوبه بدقة لرؤية الأجسام الصغيرة عن قرب [ 6 ] [ 7 ] ، وكورنيليس دريبل ، الذي يُعتقد أنه اخترع المجهر المركب حوالي عام 1620 [ 8 ] [ 9 ]. وقد طور أنطوني فان ليفينهوك مجهرًا بسيطًا عالي التكبير في سبعينيات القرن السابع عشر، ويُعتبر غالبًا أول عالم مجهر وعالم أحياء دقيقة معترف به [ 10 ] [ 11 ] .

المجهر الضوئي

مجهر ستيريو

تعتمد المجهرية الضوئية على تمرير الضوء المرئي، سواءً كان منقولاً عبر العينة أو منعكساً منها، من خلال عدسة واحدة أو عدة عدسات، مما يسمح برؤية العينة مكبرة. [ 12 ] ويمكن رؤية الصورة الناتجة مباشرةً بالعين المجردة، أو تصويرها على لوحة فوتوغرافية ، أو التقاطها رقمياً . تتكون المجهرية الضوئية الأساسية من عدسة واحدة مع ملحقاتها، أو نظام العدسات ومعدات التصوير، بالإضافة إلى معدات الإضاءة المناسبة، ومنصة العينة، ودعامة لها. أما أحدث التطورات فهي المجهرية الرقمية ، التي تستخدم كاميرا CCD للتركيز على العينة المراد فحصها. تُعرض الصورة على شاشة الكمبيوتر، مما يُغني عن استخدام العدسات العينية. [ 13 ]

القيود

تكمن قيود المجهر الضوئي القياسي ( مجهر المجال الساطع ) في ثلاثة مجالات؛

  • لا يمكن لهذه التقنية تصوير الأجسام المظلمة أو ذات الانكسار القوي بشكل فعال إلا.
  • توجد دقة محدودة بالحيود تعتمد على الطول الموجي الساقط؛ في النطاق المرئي، تقتصر دقة المجهر الضوئي على حوالي 0.2 ميكرومتر ( انظر: المجهر ) والحد العملي للتكبير إلى حوالي 1500 مرة. [ 14 ] 
  • يؤدي الضوء غير المركز من النقاط خارج مستوى التركيز إلى تقليل وضوح الصورة. [ 15 ]

تفتقر الخلايا الحية عمومًا إلى التباين الكافي لدراستها بنجاح، نظرًا لأن بنيتها الداخلية عديمة اللون وشفافة. والطريقة الأكثر شيوعًا لزيادة التباين هي تلوين هذه البنية بأصباغ انتقائية، لكن هذا غالبًا ما يستلزم قتل العينة وتثبيتها . [ 16 ] قد يُدخل التلوين أيضًا شوائب ، وهي تفاصيل بنيوية ظاهرة ناتجة عن معالجة العينة، وبالتالي فهي ليست من خصائصها. [ 17 ] بشكل عام، تستفيد هذه التقنيات من الاختلافات في معامل انكسار بنية الخلية. يُشبه المجهر ذو المجال الساطع النظر من خلال نافذة زجاجية: لا يرى المرء الزجاج نفسه، بل يرى الأوساخ العالقة به. ثمة فرق، فالزجاج مادة أكثر كثافة، وهذا يُحدث فرقًا في طور الضوء المار من خلاله. لا تُدرك العين البشرية هذا الفرق في الطور، ولكن تم ابتكار حلول بصرية ذكية لتحويل هذا الفرق في الطور إلى فرق في السعة (شدة الضوء).

التقنيات

لتحسين تباين العينة أو إبراز التراكيب فيها، يجب استخدام تقنيات خاصة. تتوفر مجموعة واسعة من تقنيات المجهر لزيادة التباين أو وسم العينة.

مجال ساطع

يُعدّ المجهر ذو المجال الساطع أبسط تقنيات المجهر الضوئي. يتم إضاءة العينة عبر ضوء أبيض نافذ، أي تُضاء من الأسفل وتُشاهد من الأعلى. من عيوبه انخفاض تباين معظم العينات البيولوجية وانخفاض الدقة الظاهرية بسبب ضبابية المادة غير المركزة. لكن بساطة هذه التقنية والحد الأدنى من تحضير العينة المطلوب يُعدّان من أهم مزاياها.

الإضاءة المائلة

يُضفي استخدام الإضاءة المائلة (من الجانب) على الصورة مظهرًا ثلاثي الأبعاد، ويُمكنه إبراز تفاصيل غير مرئية. ومن التقنيات الحديثة القائمة على هذه الطريقة تقنية هوفمان لتعديل التباين ، وهي نظام يُستخدم في المجاهر المقلوبة لزراعة الخلايا. تُحسّن الإضاءة المائلة التباين حتى في العينات الشفافة؛ إلا أنه نظرًا لدخول الضوء من خارج المحور، سيبدو موضع الجسم وكأنه يتغير عند تغيير التركيز. هذا القيد يجعل تقنيات مثل التصوير المقطعي البصري أو القياس الدقيق على المحور z غير ممكنة.

داركفيلد

المجهر ذو الحقل المظلم تقنية لتحسين تباين العينات الشفافة غير المصبوغة. [ 18 ] يستخدم هذا المجهر مصدر ضوء مُحاذى بدقة لتقليل كمية الضوء المنقول مباشرةً (غير المُشتت) الداخل إلى مستوى الصورة، حيث يجمع فقط الضوء المُشتت بواسطة العينة. يُمكن للمجهر ذي الحقل المظلم تحسين تباين الصورة بشكلٍ كبير، خاصةً للأجسام الشفافة، مع الحاجة إلى القليل من تجهيز المعدات أو تحضير العينة. مع ذلك، تُعاني هذه التقنية من انخفاض شدة الإضاءة في الصورة النهائية للعديد من العينات البيولوجية، ولا تزال تتأثر بانخفاض الدقة الظاهرية.

دياتوم تحت إضاءة راينبرغ

إضاءة راينبرغ هي نوع من أنواع إضاءة الحقل المظلم، حيث تُوضع مرشحات شفافة ملونة قبل المكثف مباشرةً ، بحيث تكون أشعة الضوء عند الفتحة الكبيرة مختلفة اللون عن تلك عند الفتحة الصغيرة (أي أن خلفية العينة قد تكون زرقاء بينما يظهر الجسم بلون أحمر مضيء ذاتيًا). توجد تركيبات لونية أخرى ممكنة، لكن فعاليتها متفاوتة للغاية. [ 19 ]

تلوين التشتت

التلوين التشتتي هو تقنية بصرية تُنتج صورة ملونة لجسم عديم اللون. هذه التقنية بصرية بالكامل، ولا تتطلب استخدام أي مواد تلوين أو أصباغ. تُستخدم خمسة تكوينات مجهرية مختلفة في هذه التقنية، وهي: التلوين بخط بيك في المجال المضيء، والتلوين المائل، والتلوين في المجال المظلم، والتلوين بتباين الطور، والتلوين باستخدام فتحة العدسة.

تباين الطور

صورة مجهرية ضوئية بتباين الطور لغضروف زجاجي غير منزوع الكالسيوم تُظهر الخلايا الغضروفية والعضيات والفجوات والمادة خارج الخلوية
في المجهر الإلكتروني : التصوير بتباين الطور

ستُظهر التقنيات الأكثر تطورًا اختلافات نسبية في الكثافة الضوئية. يُعدّ تباين الطور تقنية شائعة الاستخدام تُظهر اختلافات معامل الانكسار كاختلاف في التباين. طوّرها الفيزيائي الهولندي فريتس زيرنيكه في ثلاثينيات القرن العشرين (وحاز بفضلها على جائزة نوبل عام 1953). على سبيل المثال، ستظهر نواة الخلية داكنةً مقارنةً بالسيتوبلازم المحيط بها. التباين ممتاز، إلا أنه غير مناسب للأجسام السميكة. غالبًا ما تتشكل هالة حتى حول الأجسام الصغيرة، مما يحجب التفاصيل. يتكون النظام من حلقة دائرية في المكثف، تُنتج مخروطًا ضوئيًا. يُركّب هذا المخروط على حلقة مماثلة الحجم داخل عدسة الطور. لكل عدسة حلقة بحجم مختلف، لذا يجب اختيار إعداد مكثف مختلف لكل عدسة. تتميز الحلقة في العدسة بخصائص بصرية خاصة: فهي، أولًا، تُقلل من شدة الضوء المباشر، والأهم من ذلك، أنها تُنشئ فرق طور اصطناعيًا يُقارب ربع الطول الموجي. مع تغير الخصائص الفيزيائية لهذا الضوء المباشر، يحدث تداخل مع الضوء المنحرف، مما ينتج عنه صورة تباين الطور. ومن عيوب مجهر تباين الطور تكوّن الهالة (حلقة الضوء الهالية).

تباين التداخل التفاضلي

يُعدّ استخدام تقنية التباين التداخلي خيارًا متفوقًا وأكثر تكلفة . تظهر الاختلافات في الكثافة الضوئية على شكل اختلافات في التضاريس. ففي نظام التباين التداخلي التفاضلي الأكثر استخدامًا، تظهر نواة الخلية على شكل كرة، وفقًا لجورج نومارسكي . مع ذلك، يجب الأخذ في الاعتبار أن هذا تأثير بصري ، وأن التضاريس لا تُطابق بالضرورة الشكل الحقيقي. يتميز هذا النظام بتباين ممتاز، ويمكن استخدام فتحة المكثف مفتوحة بالكامل، مما يُقلل من عمق المجال ويُحسّن الدقة إلى أقصى حد.

يتكون النظام من موشور خاص ( موشور نومارسكي ، موشور وولاستون ) في المكثف، يقوم بفصل الضوء إلى شعاع عادي وشعاع غير عادي. ويكون الفرق المكاني بين الشعاعين ضئيلاً للغاية (أقل من أقصى دقة للعدسة الشيئية). بعد مرور الشعاعين عبر العينة، يتم تجميعهما مرة أخرى بواسطة موشور مماثل في العدسة الشيئية.

في العينة المتجانسة، لا يوجد فرق بين الشعاعين، ولا يتولد أي تباين. مع ذلك، بالقرب من حد فاصل انكساري (مثلاً نواة داخل السيتوبلازم)، يُحدث الفرق بين الشعاع العادي والشعاع غير العادي تباينًا في الصورة. يتطلب التباين التداخلي التفاضلي مصدر ضوء مستقطبًا ليعمل؛ إذ يجب تركيب مرشحين استقطابيين في مسار الضوء، أحدهما أسفل المكثف (المستقطب)، والآخر فوق العدسة الشيئية (المحلل).

ملاحظة: في الحالات التي ينتج فيها التصميم البصري للمجهر فصلًا جانبيًا ملحوظًا للشعاعين، لدينا حالة المجهر التداخلي الكلاسيكي ، والذي لا ينتج عنه صور بارزة، ولكن يمكن استخدامه مع ذلك لتحديد سماكة كتلة الأجسام المجهرية كميًا.

انعكاس التداخل

تُعدّ مجهرية الانعكاس التداخلي (المعروفة أيضًا باسم تباين التداخل الانعكاسي، أو RIC) تقنية إضافية تستخدم التداخل . وتعتمد هذه التقنية على التصاق الخلايا بالشريحة لإنتاج إشارة تداخل. فإذا لم تكن هناك خلية ملتصقة بالزجاج، فلن يكون هناك تداخل.

يمكن الحصول على مجهر الانعكاس التداخلي باستخدام نفس العناصر المستخدمة في تقنية التباين التفاضلي التداخلي (DIC)، ولكن بدون الموشورات. كما أن الضوء الذي يتم رصده ينعكس ولا ينتقل كما هو الحال عند استخدام تقنية التباين التفاضلي التداخلي.

التألق

قد تحتوي الصور أيضًا على تشوهات . هذه صورة مجهرية فلورية ماسحة ليزرية بؤرية لمئبر نبات الرشاد (جزء من السداة ). تُظهر الصورة، من بين أمور أخرى، بنية حمراء متدفقة تشبه الطوق أسفل المئبر مباشرةً. مع ذلك، لا تحتوي سداة نبات الرشاد السليمة على مثل هذا الطوق، وهذا ناتج عن عملية التثبيت: فقد قُطعت السداة أسفل إطار الصورة، وانفصلت بشرة (الطبقة العليا من الخلايا) ساق السداة، مما أدى إلى تكوين بنية غير طبيعية. الصورة: هيتي بافيس من جامعة تالين للتكنولوجيا .

عند تسليط ضوء عالي الطاقة على بعض المركبات، فإنها تُصدر ضوءًا بتردد أقل. تُعرف هذه الظاهرة باسم التألق الذاتي . غالبًا ما تُظهر العينات صورتها المميزة للتألق الذاتي ، بناءً على تركيبها الكيميائي.

تُعدّ هذه الطريقة بالغة الأهمية في علوم الحياة الحديثة، إذ تتميز بحساسية فائقة تُمكّن من الكشف عن جزيئات منفردة. ويمكن استخدام العديد من الأصباغ الفلورية لتلوين التراكيب أو المركبات الكيميائية. ومن الطرق الفعّالة دمج الأجسام المضادة المرتبطة بصبغة فلورية، كما في التلوين المناعي . ومن الأمثلة على الصبغات الفلورية الشائعة الاستخدام : الفلورسين والرودامين .

يمكن تصميم الأجسام المضادة خصيصًا لمركب كيميائي معين. على سبيل المثال، تتمثل إحدى الاستراتيجيات الشائعة في الإنتاج الاصطناعي للبروتينات، استنادًا إلى الشفرة الوراثية (DNA). يمكن استخدام هذه البروتينات لتحصين الأرانب، مما يؤدي إلى تكوين أجسام مضادة ترتبط بالبروتين. بعد ذلك، تُربط الأجسام المضادة كيميائيًا بصبغة فلورية وتُستخدم لتتبع البروتينات في الخلايا قيد الدراسة.

تم تطوير بروتينات فلورية عالية الكفاءة، مثل البروتين الفلوري الأخضر (GFP)، باستخدام تقنية دمج الجينات في البيولوجيا الجزيئية ، وهي عملية تربط التعبير عن المركب الفلوري بالبروتين المستهدف. هذا البروتين الفلوري المدمج، بشكل عام، غير سام للكائن الحي ونادرًا ما يتداخل مع وظيفة البروتين قيد الدراسة. تُعبّر الخلايا أو الكائنات المعدلة وراثيًا مباشرةً عن البروتينات الموسومة بالفلورة، مما يُمكّن من دراسة وظيفة البروتين الأصلي داخل الكائن الحي .

ينتج عن نمو بلورات البروتين بلورات بروتينية وبلورات ملحية. وكلاهما عديم اللون ومجهري. يتطلب استخلاص بلورات البروتين تصويرها، ويمكن القيام بذلك عن طريق قياس التألق الذاتي للبروتين أو باستخدام المجهر الإلكتروني النافذ. تتطلب كلتا الطريقتين مجهرًا فوق بنفسجيًا لأن البروتينات تمتص الضوء عند 280  نانومتر. كما يتألق البروتين عند حوالي 353  نانومتر عند إثارته  بضوء طول موجته 280 نانومتر. [ 20 ]

بما أن انبعاث الفلورة يختلف في طول موجته (لونه) عن ضوء الإثارة، فإن الصورة الفلورية المثالية تُظهر فقط البنية المراد دراستها والتي تم وسمها بالصبغة الفلورية. وقد أدت هذه الخصوصية العالية إلى الاستخدام الواسع النطاق لمجهر الفلورة الضوئي في البحوث الطبية الحيوية. ويمكن استخدام أصباغ فلورية مختلفة لتلوين تراكيب بيولوجية مختلفة، والتي يمكن الكشف عنها في آنٍ واحد، مع الحفاظ على خصوصيتها بفضل لون الصبغة المميز.

لمنع وصول ضوء الإثارة إلى المُشاهد أو الكاشف، يلزم استخدام مجموعات مرشحات عالية الجودة. تتكون هذه المجموعات عادةً من مرشح إثارة يختار نطاق أطوال موجات الإثارة ، ومرآة ثنائية اللون ، ومرشح انبعاث يحجب ضوء الإثارة. تعمل معظم مجاهر التألق الضوئي في وضع الإضاءة فوق السطحية (الإضاءة والكشف من جانب واحد من العينة) لتقليل كمية ضوء الإثارة الداخل إلى الكاشف بشكل أكبر.

انظر أيضًا: مجهر التألق بالانعكاس الداخلي الكلي، علم الأعصاب

المجهر متحد البؤر

يستخدم المجهر الماسح الليزري متحد البؤر شعاع ليزر مركز (مثل 488  نانومتر) يُمسح به سطح العينة لتحفيز التألق نقطة بنقطة. يُوجَّه الضوء المنبعث عبر ثقب صغير لمنع وصول الضوء غير المركز إلى الكاشف، وهو عادةً أنبوب مضاعف ضوئي . تُنشأ الصورة في الحاسوب، حيث تُرسم شدة التألق المقاسة وفقًا لموقع ليزر التحفيز. بالمقارنة مع إضاءة العينة بالكامل، يوفر المجهر متحد البؤر دقة جانبية أعلى قليلاً ويُحسِّن بشكل ملحوظ التصوير المقطعي البصري (الدقة المحورية). لذلك، يُستخدم المجهر متحد البؤر بشكل شائع عندما تكون البنية ثلاثية الأبعاد مهمة.

تُعدّ مجاهر القرص الدوّار نوعًا فرعيًا من المجاهر البؤرية، وهي قادرة على مسح نقاط متعددة في وقت واحد عبر العينة. ويقوم قرص مزود بفتحات دقيقة بحجب الضوء غير البؤري. أما كاشف الضوء في مجهر القرص الدوّار فهو كاميرا رقمية، عادةً ما تكون من نوع EM-CCD أو sCMOS .

المجهر ثنائي الفوتون

المجهر ثنائي الفوتون هو نوع من المجاهر الماسحة بالليزر، ولكنه يستخدم ليزرًا نبضيًا يعمل بالأشعة تحت الحمراء بدلًا من الأشعة فوق البنفسجية أو الزرقاء أو الخضراء. تكون شدة الليزر عالية بما يكفي لتوليد التألق الضوئي عبر الإثارة ثنائية الفوتون فقط في بؤرة الليزر الدقيقة ، مما يعني عدم وجود تألق ضوئي خارج نطاق التركيز، وبالتالي لا حاجة إلى ثقب صغير لتنقية الصورة. [ 21 ] يتيح ذلك التصوير في أعماق الأنسجة المشتتة للضوء، حيث لا يستطيع المجهر متحد البؤر جمع الفوتونات بكفاءة. [ 22 ] تُستخدم المجاهر ثنائية الفوتون ذات مجال الكشف الواسع بكثرة في التصوير الوظيفي، مثل تصوير الكالسيوم في أنسجة المخ. [ 23 ] تُسوّق هذه المجاهر تحت مسمى مجاهر متعددة الفوتونات من قبل عدة شركات، على الرغم من أن فوائد استخدام الإثارة ثلاثية الفوتونات بدلًا من ثنائية الفوتون ضئيلة.

المجهر الضوئي أحادي المستوى ومجهر التألق الضوئي الصفائحي

باستخدام مستوى ضوئي مُشكَّل بتركيز الضوء عبر عدسة أسطوانية بزاوية ضيقة، أو بمسح خط ضوئي في مستوى عمودي على محور العدسة الشيئية، يُمكن الحصول على مقاطع بصرية عالية الدقة. [ 24 ] [ 25 ] [ 26 ] كما يُمكن تحقيق إضاءة مستوى واحد، أو إضاءة صفيحة ضوئية، باستخدام تقنيات تشكيل الحزمة الضوئية التي تتضمن موسعات حزمة متعددة الموشورات . [ 27 ] [ 28 ] تُلتقط الصور بواسطة أجهزة CCD. وتتيح هذه الأنواع التقاط صور سريعة جدًا وبنسبة إشارة إلى ضوضاء عالية.

المجهر متعدد الفوتونات واسع المجال

يشير المجهر متعدد الفوتونات واسع المجال [ 29 ] [ 30 ] [ 31 ] [ 32 ] إلى تقنية تصوير بصري غير خطية، حيث تُضاء مساحة كبيرة من الجسم وتُصوَّر دون الحاجة إلى المسح. تتطلب هذه التقنية شدة إضاءة عالية لتحفيز العمليات البصرية غير الخطية، مثل التألق ثنائي الفوتون أو توليد التوافقي الثاني . في مجاهر المسح متعدد الفوتونات، تُحقق شدة الإضاءة العالية من خلال تركيز الضوء بدقة، وتُحصل الصورة عن طريق مسح الحزمة. أما في المجهر متعدد الفوتونات واسع المجال، فيُفضل استخدام مصدر ليزر نبضي مُضخَّم بصريًا للحصول على مجال رؤية واسع (حوالي 100  ميكرومتر) [ 29 ] [ 30 ] [ 31 ] . في هذه الحالة، تُحصل الصورة كإطار واحد باستخدام كاميرا CCD دون الحاجة إلى المسح، مما يجعل هذه التقنية مفيدة بشكل خاص لتصوير العمليات الديناميكية في وقت واحد عبر الجسم المراد دراسته. باستخدام المجهر متعدد الفوتونات ذي المجال الواسع، يمكن زيادة معدل الإطارات حتى 1000 ضعف مقارنة بالمجهر الماسح متعدد الفوتونات . [ 30 ] ومع ذلك، في الأنسجة المشتتة، تتدهور جودة الصورة بسرعة مع زيادة العمق.

فك التشفير

يُعدّ المجهر الفلوري تقنيةً فعّالةً لإظهار تراكيب مُحدّدة ضمن بيئة معقدة، ولتوفير معلومات ثلاثية الأبعاد عن التراكيب البيولوجية. مع ذلك، تتشوش هذه المعلومات بسبب انبعاث الضوء من جميع التراكيب المُوسومة بالفلورة عند إضاءتها، بغض النظر عن كونها في بؤرة التركيز أم لا. لذا، فإن صورة أي تركيب تكون مشوشةً دائمًا بسبب تداخل الضوء الصادر من التراكيب غير المُركّزة. تُؤدي هذه الظاهرة إلى فقدان التباين، خاصةً عند استخدام عدسات ذات قدرة تحليلية عالية، كالعدسات الزيتية ذات الفتحة العددية العالية.

دالة انتشار النقطة المصممة رياضياً لنظام تصوير ليزر تيراهيرتز نبضي. [ 33 ]

مع ذلك، لا ينتج التشويش عن عمليات عشوائية، مثل تشتت الضوء، بل يمكن تحديده بدقة من خلال الخصائص البصرية لتكوين الصورة في نظام التصوير المجهري. إذا نظرنا إلى مصدر ضوء فلوري صغير (بقعة مضيئة أساسًا)، فإن الضوء المنبعث من هذه البقعة ينتشر بعيدًا عن منظورنا كلما أصبحت البقعة خارج نطاق التركيز. في الظروف المثالية، ينتج عن ذلك شكل "ساعة رملية" لهذا المصدر النقطي في البعد الثالث (المحوري). يُطلق على هذا الشكل اسم دالة انتشار النقطة (PSF) لنظام التصوير المجهري. بما أن أي صورة فلورية تتكون من عدد كبير من مصادر الضوء الفلورية الصغيرة هذه، يُقال إن الصورة "مُدمجة بدالة انتشار النقطة". تظهر دالة انتشار النقطة المُنمذجة رياضيًا لنظام تصوير نبضي ليزري تيراهيرتز على اليمين.

يمكن وصف مخرجات نظام التصوير باستخدام المعادلة التالية:

s(x،y)=PSF(x،y)*o(x،y)+ن{\displaystyle s(x,y)=PSF(x,y)*o(x,y)+n}

حيث n هو الضوضاء المضافة. [ 34 ] معرفة دالة انتشار النقطة هذه [ 35 ] تعني أنه من الممكن عكس هذه العملية إلى حد ما باستخدام طرق حاسوبية تُعرف باسم مجهر إزالة التشويش . [ 36 ] تتوفر خوارزميات متنوعة لإزالة التشويش ثنائي وثلاثي الأبعاد. يمكن تصنيفها تقريبًا إلى طرق غير ترميمية وطرق ترميمية . بينما تُحسّن الطرق غير الترميمية التباين عن طريق إزالة الضوء غير المركز من مستويات التركيز، فإن الطرق الترميمية فقط هي التي تُعيد توجيه الضوء إلى مصدره الصحيح. تُعد معالجة الصور الفلورية بهذه الطريقة ميزةً مقارنةً بالحصول على الصور مباشرةً دون ضوء غير مركز، مثل صور المجهر متحد البؤر ، لأن إشارات الضوء التي تُزال عادةً تُصبح معلومات مفيدة. لإزالة التشويش ثلاثي الأبعاد، يُقدّم عادةً سلسلة من الصور المأخوذة من مستويات تركيز مختلفة (تُسمى مجموعة Z) بالإضافة إلى معرفة دالة انتشار النقطة، والتي يمكن اشتقاقها تجريبيًا أو نظريًا من معرفة جميع معلمات المجهر.

تقنيات الانعراج الفرعي

مثال على المجهر فائق الدقة. صورة لـ Her3 و Her2 ، وهما هدف دواء تراستوزوماب لعلاج سرطان الثدي ، داخل خلية سرطانية.

لقد تم تطوير العديد من تقنيات المجهر فائقة الدقة في الآونة الأخيرة والتي تتجاوز حد الانعراج .

يتحقق ذلك في الغالب من خلال تصوير عينة ثابتة بدرجة كافية عدة مرات، إما بتعديل ضوء الإثارة أو بملاحظة التغيرات العشوائية في الصورة. تُستخدم طرق إزالة التشويش الموصوفة في القسم السابق، والتي تزيل التشويش الناتج عن دالة انتشار النقطة (PSF) وتُحدد مصدرًا "صحيحًا" رياضيًا للضوء، مع اختلاف طفيف في فهم معنى قيمة البكسل. بافتراض أن جزيء فلوري واحد يُساهم في أغلب الأحيان في تكوين بقعة واحدة في الصورة الملتقطة، يُمكن استبدال البقع في الصور بمواقعها المحسوبة، مما يُحسّن الدقة بشكل كبير إلى ما دون حد الانعراج.

لتحقيق هذا الافتراض، تُعدّ معرفة الخصائص الضوئية للفلوروفور والتحكم الكيميائي بها جوهر هذه التقنيات، والتي من خلالها يتم الحصول على دقة تصل إلى حوالي 20 نانومترًا. [ 37 ] [ 38 ]

المجهر المضخم المشفر زمنيًا التسلسلي

المجهر المضخم المشفر زمنيًا التسلسلي (STEAM) هو أسلوب تصوير يوفر سرعة غالق فائقة ومعدل إطارات مرتفع، وذلك باستخدام تضخيم الصورة الضوئي لتجاوز المفاضلة الأساسية بين الحساسية والسرعة، وكاشف ضوئي أحادي البكسل للاستغناء عن مصفوفة الكاشفات وقيود وقت القراءة [ 39 ]. يُعد هذا الأسلوب أسرع بما لا يقل عن 1000 مرة من أحدث كاميرات CCD و CMOS . وبالتالي، فهو ذو فائدة محتملة للتطبيقات العلمية والصناعية والطبية الحيوية التي تتطلب معدلات عالية لالتقاط الصور، بما في ذلك التشخيص والتقييم الفوري للموجات الصدمية، والموائع الدقيقة ، وأنظمة MEMS ، وجراحة الليزر [ 40 ] .

الإضافات

توفر معظم الأجهزة الحديثة حلولاً بسيطة للتصوير المجهري وتسجيل الصور إلكترونياً. مع ذلك، لا تتوفر هذه الإمكانيات دائماً، وقد يفضل خبير المجهر الأكثر خبرة الرسم اليدوي على الصورة الفوتوغرافية. والسبب في ذلك هو أن خبير المجهر الملمّ بالموضوع يستطيع تحويل الصورة ثلاثية الأبعاد بدقة إلى رسم ثنائي الأبعاد دقيق. أما في الصورة الفوتوغرافية أو أي نظام آخر لالتقاط الصور، فلا يكون سوى مستوى واحد رقيق واضحاً تماماً.

يتطلب الحصول على صور مجهرية دقيقة استخدام تقنية مجهرية تعتمد على عدسة أحادية. من الضروري أن تكون كلتا العينين مفتوحتين، وأن تُركّز العين غير المُستخدمة في المجهر على ورقة موضوعة على طاولة العمل بجانب المجهر. مع الممارسة، ودون تحريك الرأس أو العينين، يُمكن تتبع الأشكال المرصودة بدقة من خلال "رؤية" رأس القلم في الصورة المجهرية في الوقت نفسه.

تحسينات أخرى

التحليل الطيفي المجهري: التحليل الطيفي باستخدام المجهر

الأشعة السينية

بما أن دقة الصورة تعتمد على طول موجة الضوء، فقد طُوِّر المجهر الإلكتروني منذ ثلاثينيات القرن العشرين، وهو يستخدم حزم الإلكترونات بدلاً من الضوء. وبسبب قصر طول موجة حزمة الإلكترونات، تكون دقة الصورة أعلى بكثير.

على الرغم من أنها أقل شيوعاً، فقد تم تطوير المجهر بالأشعة السينية منذ أواخر الأربعينيات. تقع دقة المجهر بالأشعة السينية بين دقة المجهر الضوئي والمجهر الإلكتروني.

المجهر الإلكتروني

قبل اختراع المجهر ذي الدقة دون حد الانعراج، كان طول موجة الضوء يحد من دقة المجهر التقليدي إلى حوالي 0.2 ميكرومتر. وللحصول على دقة أعلى، يُستخدم في المجاهر الإلكترونية شعاع إلكتروني ذو طول موجة أقصر بكثير.

  • يُشبه المجهر الإلكتروني النافذ (TEM) إلى حد كبير المجهر الضوئي المركب، حيث يتم تمرير حزمة إلكترونية عبر شريحة رقيقة جدًا من العينة. وكانت دقة التصوير في عام 2005 حوالي 0.05 نانومتر، ولم تشهد تحسنًا ملحوظًا منذ ذلك الحين.
  • يُتيح المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) تصوير تفاصيل أسطح العينات، ويُقدم رؤية ثلاثية الأبعاد فائقة الوضوح. ويُعطي نتائج مشابهة لتلك التي يُقدمها المجهر الضوئي المجسم. وقد بلغت أفضل دقة للمجهر الإلكتروني الماسح في عام 2011 نحو 0.4 نانومتر.

تُتيح المجاهر الإلكترونية المُجهزة بتقنية التحليل الطيفي للأشعة السينية إجراء تحليل نوعي وكمي للعناصر. ويُعدّ هذا النوع من المجاهر الإلكترونية، المعروف أيضاً بالمجهر الإلكتروني التحليلي، أداةً بالغة الأهمية لدراسة المواد النانوية . [ 41 ]

المجهر الماسح للمسبار

هذه تقنية دون مستوى الانعراج. من أمثلة مجاهر المسح المجهري: مجهر القوة الذرية (AFM)، ومجهر المسح النفقي ، ومجهر القوة الضوئية ، ومجهر تتبع التكرار . تستخدم جميع هذه الطرق التلامس المباشر لطرف مسبار صلب لمسح سطح جسم يُفترض أن يكون شبه مستوٍ.

القوة فوق الصوتية

طُوِّرت تقنية المجهرية الصوتية فائقة القوة (UFM) لتحسين تفاصيل وتباين الصور في المناطق المستوية التي تكون فيها صور المجهر الذري (AFM) محدودة التباين. يتيح الجمع بين تقنيتي AFM وUFM توليد صورة مجهرية صوتية قريبة المدى. تُستخدم رأس المجهر الذري (AFM) للكشف عن الموجات فوق الصوتية، مما يتغلب على محدودية الطول الموجي في المجهرية الصوتية. وباستخدام التغيرات المرنة تحت رأس المجهر الذري (AFM)، يمكن توليد صورة بتفاصيل أدق بكثير من تلك التي توفرها تضاريس المجهر الذري (AFM).

تتيح مجهرية القوة فوق الصوتية رسم خرائط موضعية للمرونة في مجهرية القوة الذرية عن طريق تطبيق اهتزازات فوق صوتية على الناتئ أو العينة. ولتحليل نتائج مجهرية القوة فوق الصوتية كميًا، يتم قياس منحنى القوة-المسافة بتطبيق اهتزازات فوق صوتية على قاعدة الناتئ، ثم تُقارن النتائج بنموذج لديناميكيات الناتئ وتفاعل طرفه مع العينة، وذلك باستخدام تقنية الفروق المحدودة.

المجهر فوق البنفسجي

للمجاهر فوق البنفسجية غرضان رئيسيان. الأول هو استخدام الطول الموجي الأقصر للطاقة الكهرومغناطيسية فوق البنفسجية لتحسين دقة الصورة بما يتجاوز حد حيود المجاهر الضوئية التقليدية. تُستخدم هذه التقنية للفحص غير المتلف للأجهزة ذات المكونات الدقيقة جدًا، مثل تلك الموجودة في أشباه الموصلات الحديثة. أما التطبيق الثاني للمجاهر فوق البنفسجية فهو تحسين التباين، حيث يتم تعزيز استجابة العينات الفردية، مقارنةً بمحيطها، نتيجةً لتفاعل الضوء مع الجزيئات داخل العينة نفسها. ومن الأمثلة على ذلك نمو بلورات البروتين . تتشكل بلورات البروتين في محاليل ملحية. ولأن كلاً من الملح وبلورات البروتين تتشكلان في عملية النمو، وكلاهما شفاف للعين المجردة، فلا يمكن التمييز بينهما باستخدام المجهر الضوئي التقليدي. ولأن التربتوفان الموجود في البروتين يمتص الضوء عند 280  نانومتر، فإن التصوير باستخدام مجهر فوق بنفسجي مزود  بمرشحات نطاق تمرير 280 نانومتر يُسهّل التمييز بين نوعي البلورات. تظهر بلورات البروتين داكنة اللون، بينما تكون بلورات الملح شفافة.

المجهر بالأشعة تحت الحمراء

يشير مصطلح المجهرية بالأشعة تحت الحمراء إلى المجهرية التي تُجرى عند أطوال موجية تحت الحمراء . في التكوين النموذجي للجهاز، يُدمج مطياف الأشعة تحت الحمراء بتحويل فورييه (FTIR) مع مجهر ضوئي وكاشف للأشعة تحت الحمراء . يمكن أن يكون كاشف الأشعة تحت الحمراء كاشفًا نقطيًا أحاديًا، أو مصفوفة خطية، أو مصفوفة ثنائية الأبعاد في المستوى البؤري. يوفر مطياف FTIR إمكانية إجراء التحليل الكيميائي عبر مطيافية الأشعة تحت الحمراء ، ويتيح المجهر والكاشف النقطي أو المصفوفي إجراء هذا التحليل الكيميائي بدقة مكانية، أي في مناطق مختلفة من العينة. ولذلك، تُسمى هذه التقنية أيضًا بالمطيافية المجهرية بالأشعة تحت الحمراء [ 42 ] [ 43 ]. يتضمن تصميم بديل يُسمى التصوير المباشر بالأشعة تحت الحمراء بالليزر (LDIR) دمج مصدر ضوء تحت أحمر قابل للضبط وكاشف نقطي أحادي على عدسة موضوعية متحركة. تُستخدم هذه التقنية بكثرة في التصوير الكيميائي بالأشعة تحت الحمراء ، حيث يتحدد تباين الصورة باستجابة مناطق العينة الفردية لأطوال موجية محددة من الأشعة تحت الحمراء يختارها المستخدم، وعادةً ما تكون نطاقات امتصاص محددة للأشعة تحت الحمراء ورنينات جزيئية مرتبطة بها . من أبرز عيوب التحليل الطيفي المجهري بالأشعة تحت الحمراء التقليدية محدودية الدقة المكانية بسبب حيود الضوء. وتحديدًا، تُحدد الدقة المكانية بقيمة مرتبطة بطول موجة الضوء. في المجاهر العملية بالأشعة تحت الحمراء، تتراوح الدقة المكانية بين 1 و3 أضعاف طول الموجة، وذلك تبعًا للتقنية والجهاز المستخدمين. وبالنسبة لأطوال موجات الأشعة تحت الحمراء المتوسطة، يُحدد هذا حدًا عمليًا للدقة المكانية يتراوح بين 3 و30 ميكرومترًا تقريبًا.

توجد أيضًا إصدارات الأشعة تحت الحمراء من المجهرية دون حد الانعراج. [ 42 ] [ 43 ] وتشمل هذه المجهرية المجهرية الضوئية الماسحة للمجال القريب بالأشعة تحت الحمراء (NSOM) ، [ 44 ] والمطيافية المجهرية الحرارية الضوئية ومطيافية الأشعة تحت الحمراء القائمة على مجهر القوة الذرية (AFM-IR) ، بالإضافة إلى المجهرية الضوئية الماسحة للمجال القريب من نوع التشتت (s-SNOM) [ 45 ] و nano-FTIR التي توفر دقة مكانية على المستوى النانوي عند أطوال موجات الأشعة تحت الحمراء.

المجهر الهولوغرافي الرقمي

خلايا بشرية مصورة بتقنية إزاحة الطور DHM (يسار) ومجهر تباين الطور (يمين)

في المجهر الهولوغرافي الرقمي (DHM)، تُسجَّل جبهات الموجات المتداخلة من مصدر ضوئي متماسك (أحادي اللون) على مستشعر. ثم يُعاد بناء الصورة رقميًا بواسطة الحاسوب من الهولوغرام المُسجَّل . وإلى جانب صورة المجال الساطع العادية، تُنشأ صورة إزاحة الطور .

يمكن لتقنية التصوير الرقمي المجسم (DHM) العمل في وضعَي الانعكاس والنفاذ. في وضع الانعكاس، توفر صورة إزاحة الطور قياسًا نسبيًا للمسافة، وبالتالي تمثل خريطة طوبوغرافية للسطح العاكس. أما في وضع النفاذ، فتُوفر صورة إزاحة الطور قياسًا كميًا غير مُوسَم للسمك البصري للعينة. تتشابه صور إزاحة الطور للخلايا البيولوجية إلى حد كبير مع صور الخلايا المصبوغة، وقد تم تحليلها بنجاح باستخدام برامج تحليل المحتوى العالي .

من الميزات الفريدة لتقنية التصوير المجسم الرقمي (DHM) إمكانية ضبط التركيز بعد تسجيل الصورة، حيث يتم تسجيل جميع مستويات التركيز في آنٍ واحد بواسطة الهولوغرام. تُمكّن هذه الميزة من تصوير الجسيمات المتحركة في حجمٍ ما أو مسح سطحٍ ما بسرعة. ومن الميزات الجذابة الأخرى قدرة تقنية DHM على استخدام بصريات منخفضة التكلفة من خلال تصحيح الانحرافات البصرية بواسطة البرمجيات.

علم الأمراض الرقمي (المجهر الافتراضي)

علم الأمراض الرقمي هو بيئة معلوماتية قائمة على الصور، مدعومة بتقنية الحاسوب، تتيح إدارة المعلومات المُستخرجة من الشرائح الرقمية. ويُمكن تحقيق ذلك جزئيًا من خلال المجهر الافتراضي ، وهو عملية تحويل الشرائح الزجاجية إلى شرائح رقمية يُمكن عرضها وإدارتها وتحليلها.

المجهر الليزري

يُعدّ المجهر الليزري مجالًا سريع النمو يستخدم مصادر إضاءة الليزر في أشكال مختلفة من المجهر. [ 46 ] فعلى سبيل المثال، يستخدم المجهر الليزري المُركّز على التطبيقات البيولوجية ليزرات نبضية فائقة القصر ، في عدد من التقنيات التي تُصنّف على أنها مجهر غير خطي، ومجهر تشبّع، ومجهر إثارة ثنائي الفوتون . [ 47 ]

تُجرى حاليًا دراساتٌ لتطوير ليزرات الأشعة السينية المخبرية عالية الكثافة وقصيرة النبضات منذ عدة سنوات. وعندما تُصبح هذه التقنية جاهزةً للاستخدام، سيُصبح من الممكن الحصول على صور ثلاثية الأبعاد مُكبّرة للهياكل البيولوجية الأساسية في حالتها الحية في لحظة مُحددة بدقة. وللحصول على تباين مثالي بين الماء والبروتين، ولأفضل حساسية ودقة، يجب ضبط الليزر بالقرب من خط النيتروجين عند حوالي 0.3 نانومتر. وستكون الدقة محدودة بشكل رئيسي بالتمدد الهيدروديناميكي الذي يحدث أثناء تسجيل العدد اللازم من الفوتونات. [ 48 ] وبالتالي، فبينما تتلف العينة بفعل التعريض، يُمكن التقاط شكلها قبل أن تتلف تمامًا. [ 49 ] [ 50 ] [ 51 ] [ 52 ] [ 53 ] [ 54 ]

يعمل العلماء على تصميمات عملية ونماذج أولية لمجاهر التصوير المجسم بالأشعة السينية، على الرغم من طول فترة تطوير الليزر المناسب. [ 55 ] [ 56 ] [ 57 ] [ 58 ] [ 59 ] [ 60 ] [ 61 ] [ 62 ]

المجهر الصوتي الضوئي

صورة مجهرية صوتية ضوئية لخلايا الدم الحمراء البشرية.

تقنية مجهرية تعتمد على التأثير الكهروضوئي الصوتي ، [ 63 ] أي توليد الصوت (فوق الصوتي) الناتج عن امتصاص الضوء. يتم مسح عينة ضوئياً باستخدام شعاع ليزر مركز ومُعدَّل الشدة. ويتم الكشف عن الصوت (فوق الصوتي) المُوَلَّد بواسطة محول طاقة فوق صوتي. وعادةً ما تُستخدم محولات الطاقة الكهروإجهادية فوق الصوتية. [ 64 ]

يرتبط تباين الصورة بمعامل امتصاص العينةα{\displaystyle \alpha }يختلف هذا عن المجهر الضوئي ذي الحقل المضيء أو المظلم، حيث يعتمد تباين الصورة على النفاذية أو التشتت. من حيث المبدأ، يتناسب تباين المجهر الفلوري طرديًا مع امتصاص العينة أيضًا. مع ذلك، في المجهر الفلوري، يعتمد مردود الكم الفلوري على كمية الفلورة.ηول{\displaystyle \eta _{fl}}يجب أن تكون قيمة غير مساوية للصفر حتى يمكن الكشف عن الإشارة. مع ذلك، في المجهر الصوتي الضوئي، تُصدر كل مادة ماصة إشارة صوتية ضوئية.Pأ{\displaystyle PA}وهو ما يتناسب مع

Pأ∝α*Γ*((1-ηول)*هـز+(هـلأsهـر-هـز)){\displaystyle PA\propto \alpha *\Gamma *((1-\eta _{fl})*E_{g}+(E_{laser}-E_{g}))}

هناΓ{\displaystyle \Gamma } هو معامل غرونايزن،هـلأsهـر{\displaystyle E_{laser}}طاقة الفوتون لليزر وهـز{\displaystyle E_{g}}تمثل طاقة فجوة النطاق للعينة. لذلك، يبدو أن المجهر الصوتي الضوئي مناسب تمامًا كتقنية مكملة للمجهر الفلوري، حيث يؤدي مردود الكم الفلوري العالي إلى إشارات فلورية عالية، بينما يؤدي مردود الكم الفلوري المنخفض إلى إشارات صوتية ضوئية عالية.

وبإهمال التأثيرات غير الخطية، فإن الدقة الجانبية dx محدودة بحد حيود آبي :

دx=λ/(2*شمالأ){\displaystyle dx=\lambda /(2*NA)}

أينλ{\displaystyle \lambda }يمثل طول موجة ليزر الإثارة، و NA الفتحة العددية للعدسة الشيئية. يتحقق حد حيود آبي إذا كانت جبهة الموجة الواردة متوازية. ولكن في الواقع، يكون شكل شعاع الليزر غاوسيًا. لذلك، لحساب الدقة الممكنة، يجب استخدام صيغ خاصة بشعاع غاوسي مقطوع. [ 65 ]

المجهر للهواة

المجهرية للهواة هي دراسة ومراقبة العينات البيولوجية وغير البيولوجية لأغراض ترفيهية. قد يستخدم هواة جمع المعادن والحشرات والأصداف البحرية والنباتات المجاهر كأدوات للكشف عن خصائص تساعدهم في تصنيف مقتنياتهم. وقد يهتم هواة آخرون بمراقبة الكائنات الحية الموجودة في مياه البرك وغيرها من العينات. كما قد تكون المجاهر مفيدة لتقييم جودة المياه لأصحاب أحواض السمك المنزلية . ويُعدّ توثيق الصور المجهرية ورسمها متعة إضافية. تُقام مسابقات لفن التصوير المجهري . ويمكن للمشاركين في هذه الهواية استخدام شرائح مجهرية جاهزة أو تحضير شرائحهم الخاصة.

على الرغم من أن المجهر أداة أساسية في توثيق العينات البيولوجية، إلا أنه غالبًا ما يكون غير كافٍ لتبرير وصف نوع جديد بالاعتماد على الفحوصات المجهرية وحدها. فكثيرًا ما تكون الاختبارات الجينية والكيميائية الحيوية ضرورية لتأكيد اكتشاف نوع جديد. ويُعدّ وجود مختبر والاطلاع على المراجع العلمية أمرًا لا غنى عنه. ومع ذلك، ثمة ميزة واحدة يتمتع بها الهواة على المحترفين: الوقت الكافي لاستكشاف بيئتهم. وغالبًا ما يتعاون الهواة المتقدمون مع المحترفين للتحقق من صحة نتائجهم، وربما وصف أنواع جديدة.

في أواخر القرن التاسع عشر، أصبحت هواية المجهر للهواة شائعة في الولايات المتحدة وأوروبا. وكان العديد من "الهواة المحترفين" يتقاضون أجورًا من المحسنين مقابل رحلاتهم الاستكشافية المجهرية، لتسليتهم في ظهيرة يوم الأحد (على سبيل المثال، كان أخصائي الدياتومات أ. غرونو يتقاضى أجرًا من (من بين آخرين) صناعي بلجيكي). نشر البروفيسور جون فين كتاب "نصائح عملية حول اختيار المجهر واستخدامه" (الطبعة الثانية، 1878)، وكان أيضًا محرر "المجلة الأمريكية للمجهر".

أمثلة على صور المجهر للهواة:

التطبيق في علم الطب الشرعي

للمجهر تطبيقات في علوم الطب الشرعي. [ 66 ] إذ يُمكنه الكشف عن أصغر الأدلة وتمييزها وتصويرها، غالبًا دون أي تغيير أو تلف. ويُستخدم المجهر لتحديد ومقارنة الألياف والشعر والتربة والغبار... إلخ.

في حالة علامات الحبر أو بقع الدم أو الرصاص، لا يتطلب الأمر أي معالجة للعينة، وتظهر الأدلة مباشرةً من الفحص المجهري. أما بالنسبة لآثار المواد المحددة، فيجب تحضير العينة قبل إجراء الفحص المجهري.

تُعد المجاهر الضوئية الأكثر استخدامًا في الطب الشرعي، حيث تستخدم الفوتونات لتكوين الصور، والمجاهر الأكثر ملاءمة لفحص العينات الجنائية هي كما يلي: [ 67 ]

1. المجهر المركب

2. المجهر المقارن

3. المجهر المجسم

4. المجهر المستقطب

5. مطياف ضوئي دقيق

ينبع هذا التنوع في أنواع المجاهر المستخدمة في التطبيقات الجنائية بشكل رئيسي من نطاقات التكبير الخاصة بها، والتي تتراوح بين (1-1200X) و(50-30000X) و(500-250000X) للمجهر الضوئي والمجهر الإلكتروني الماسح والمجهر الإلكتروني النافذ على التوالي. [ 67 ]

انظر أيضاً

مراجع

  1. ↑ جامعة إدنبرة (6 مارس 2018). "ما هو المجهر؟" . جامعة إدنبرة . مؤرشف من الأصل في 10 أبريل 2018. تم الاطلاع عليه في 9 أبريل 2018 .
  2. ↑ ماجستير العلوم، سوشا تشيرييداث (2017-01-04). "المجهر الضوئي والإلكتروني ومجهر المسح المجهري" . أخبار طبية . تم الاطلاع عليه بتاريخ 2026-03-25 .
  3. ^ Atti Della Fondazione Giorgio Ronchi E Contributi Dell'Istituto Nazionale Di Ottica، المجلد 30، La Fondazione-1975، الصفحة 554
  4. ^ ألبرت فان هيلدن. سفين دوبري؛ روب فان جينت (2010). أصول التلسكوب . مطبعة جامعة أمستردام. ص. 24. رقم ISBN  978-90-6984-615-6تمت أرشفة هذا النص من المصدر الأصلي في 15 فبراير 2017.
  5. ↑ ويليام روزنتال، النظارات وغيرها من وسائل المساعدة البصرية: تاريخ ودليل للجمع، دار نورمان للنشر، 1996، الصفحات 391-392
  6. ↑ روبرت د. هويرتا، عمالقة دلفت: يوهانس فيرمير والفلاسفة الطبيعيون : البحث المتوازي عن المعرفة خلال عصر الاكتشاف، مطبعة جامعة باكنيل - 2003، صفحة 126
  7. ↑ أ. مارك سميث، من البصر إلى الضوء: الانتقال من البصريات القديمة إلى الحديثة، مطبعة جامعة شيكاغو - 2014، صفحة 387
  8. ↑ ريموند ج. سيجر، رجال الفيزياء: جاليليو جاليلي، حياته وأعماله، إلسيفير - 2016، صفحة 24
  9. ↑ ج. ويليام روزنتال، النظارات وغيرها من وسائل المساعدة البصرية: تاريخ ودليل للاقتناء، دار نورمان للنشر، 1996، صفحة 391
  10. ↑ فورد، برايان ج. (1992). "من هاوٍ إلى مُجرِّب مُجتهد: إعادة تقييم ليفينهوك كعالم مجهري وباحث" . تاريخ علم الأحياء . 5 (3). مؤرشف من الأصل في 19 أبريل 2021. تم الاسترجاع في 16 أبريل 2021 .
  11. ↑ لين، نيك (6 مارس 2015). "العالم الخفي: تأملات في كتاب ليفينهوك (1677) 'حول الحيوان الصغير'." معاملات الجمعية الملكية بلندن، العلوم البيولوجية . أبريل 2015؛ 370 (1666): 20140344. [doi:10.1098/rstb.2014.0344]
  12. ↑ أبراموفيتز م، ديفيدسون م.و. (2007). "مقدمة في علم المجهر" . التعبيرات الجزيئية . مؤرشف من الأصل في 27 أبريل 2021. تم الاسترجاع في 22 أغسطس 2007 .
  13. ↑ "المجهر - المجهر المركب، والمجهر ذو الفتحة العددية، ومجهر الغمر | بريتانيكا" . www.britannica.com . مؤرشف من الأصل بتاريخ 22-06-2023 . تم الاطلاع عليه بتاريخ 22-06-2023 .
  14. ↑ آبي، إي. (1874) مساهمة في نظرية المجهر وطبيعة الرؤية المجهرية. وقائع الجمعية الوطنية في بريستول 1، 200-261.
  15. ↑ باولي جيه بي (محرر) (2006). دليل المجهر متحد البؤر البيولوجي (الطبعة الثالثة). برلين: سبرينغر. ISBN 0-387-25921-X.
  16. ↑ لاكوفيتش، جوزيف ر. (1999) مبادئ مطيافية التألق. نيويورك: كلوير أكاديميك/بلينوم.
  17. ↑ بيندو، بر؛ كريشنابيللاي، ريخا؛ توماس، بريا؛ جايانثي، ب. (سبتمبر 2013). "حقائق في القطع الأثرية" . مجلة علم أمراض الفم والوجه والفكين . 17 ( 3): 397-401 . doi : 10.4103/0973-029X.125206 . ISSN 0973-029X . PMC 3927342. PMID 24574659 .   
  18. ↑ أبراموفيتز م، ديفيدسون م.و. (1 أغسطس 2003). "إضاءة الحقل المظلم" . مؤرشف من الأصل في 23 نوفمبر 2015. تم الاطلاع عليه في 21 أكتوبر 2008 .
  19. ↑ أبراموفيتز م، ديفيدسون م.و. (1 أغسطس 2003). "إضاءة راينبرغ" . مؤرشف من الأصل في 29 سبتمبر 2008. تم الاطلاع عليه في 21 أكتوبر 2008 .
  20. ↑ جيل، هارينداربال (يناير 2010). "تقييم فعالية تألق وامتصاص التربتوفان كأداة اختيار لتحديد بلورات البروتين" . أكتا كريستالوغرافيكا . F66 (الجزء 3): 364-372 . Bibcode : 2010AcCrF..66..364G . doi : 10.1107 / S1744309110002022 . PMC 2833058. PMID 20208182 .  
  21. ↑ دينك، وينفريد؛ سفوبودا، كاريل (مارس 1997). "التفوق الضوئي: لماذا يُعدّ التصوير متعدد الفوتونات أكثر من مجرد حيلة" . نيرون . 18 ( 3): 351-357 . doi : 10.1016/S0896-6273(00)81237-4 . PMID 9115730. S2CID 2414593 .  
  22. ↑ دينك، دبليو؛ ديلاني، كيه آر؛ جيلبيرين، إيه؛ كلاينفيلد، دي؛ ستروبريدج، بي دبليو؛ تانك، دي دبليو؛ يوست، آر. (1994). "التصوير التشريحي والوظيفي للخلايا العصبية باستخدام مجهر المسح الليزري ثنائي الفوتون". مجلة أساليب علم الأعصاب . 54 (2): 151-162 . doi : 10.1016/0165-0270(94) 90189-9 . PMID 7869748. S2CID 3772937 .  
  23. ↑ سفوبودا، كاريل؛ دينك، وينفريد؛ كلاينفيلد، ديفيد؛ تانك، ديفيد و. (1997). "ديناميكيات الكالسيوم في التغصنات العصبية للخلايا العصبية الهرمية في القشرة المخية الحديثة في الجسم الحي" . مجلة نيتشر . 385 (6612): 161-165 . رمز Bibcode : 1997Natur.385..161S . doi : 10.1038/385161a0 . ISSN 0028-0836 . PMID 8990119. S2CID 4251386. مؤرشف من الأصل في 25 مايو 2021. تم الاسترجاع في 20 مايو 2020 .   
  24. ↑ فوي، أ.هـ. (1993). "تصوير الفقاعة الطبلية السليمة لخنزير غينيا باستخدام مجهر التصوير المقطعي البصري الفلوري ذي المستوى المتعامد". أبحاث السمع . 71 ( 1-2 ): 119-128 . doi : 10.1016/S0378-5955(02)00493-8 . ISSN 0378-5955 . PMID 12204356. S2CID 12775304 .   
  25. ↑ جريجر، ك.؛ ج. سوجر؛ إي. إتش. كيه. ستيلزر (2007). "الوحدات البنائية الأساسية وخصائص مجهر الإضاءة أحادي المستوى الفلوري" . مراجعة الأدوات العلمية . 78 (2): 023705–023705–7. رمز Bibcode : 2007RScI...78b3705G . doi : 10.1063/1.2428277 . ISSN 0034-6748 . PMID 17578115 .  
  26. ↑ بويتايرت، جان؛ إي. ديشامب؛ دي. أدريانز؛ جيه جيه جيه ديركس (2012). "عائلة مجهر OPFOS: التصوير المقطعي البصري عالي الدقة للعينات الطبية الحيوية" . مجلة أبحاث التشريح الدولية . 2012 206238. arXiv : 1106.3162 . doi : 10.1155/2012/206238 . ISSN 2090-2743 . PMC 3335623. PMID 22567307 .   
  27. ↑ FJ Duarte، في كتاب الليزر الصبغي عالي الطاقة (Springer-Verlag، برلين، 1991) الفصل 2.
  28. ↑ Duarte FJ (1993)، نظام قياس الكثافة الضوئية التداخلية الكهروضوئية، براءة اختراع أمريكية رقم 5255069 مؤرشفة في 2017-10-13 في Wayback Machine .
  29. 1 2 بيترسون، مارك د.؛ هايز، باتريك ل.؛ مارتينيز، إيمي سو؛ كاس، لورا س.؛ أشتيل، جينيفر ل.؛ فايس، إميلي أ.؛ جايجر، فرانز م. (2011-05-01). "التصوير باستخدام توليد التوافقي الثاني مع مضخم كيلوهرتز [مقال مدعو]". مجلة المواد البصرية السريعة . 1 (1): 57. رمز Bibcode : 2011OMExp...1...57P . doi : 10.1364/ome.1.000057 .
  30. 1 2 3 ماكياس-روميرو، كارلوس؛ ديدييه، ماري إي بي؛ جوردان، باسكال؛ ماركيه، بيير؛ ماجيستريتي، بيير؛ تارون، أورلي بي؛ زوبكوفس، فيتاليجس؛ رادينوفيتش، ألكسندرا ؛ روك، سيلفي (15-12-2014). "التصوير التوافقي الثاني عالي الإنتاجية للتطبيقات البيولوجية الخالية من العلامات" . أوبتكس إكسبرس . 22 (25): 31102-12 . Bibcode : 2014OExpr..2231102M . doi : 10.1364/oe.22.031102 . hdl : 10754/563269 . PMID 25607059. مؤرشف من الأصل في 20-06-2020 . تم الاطلاع عليه بتاريخ 11 ديسمبر 2019 . 
  31. 1 2 تشنغ، لي-تشونغ؛ تشانغ، تشيا-يوان؛ لين، تشون-يو؛ تشو، كينغ-تشي؛ ين، وي-تشونغ؛ تشانغ، نان-شان؛ شو، كريس؛ دونغ، تشن يوان؛ تشن، شين-جين (9 أبريل 2012). "المجهر متعدد الفوتونات واسع المجال القائم على التركيز المكاني الزمني للتصوير المقطعي البصري السريع" . أوبتكس إكسبرس . 20 (8): 8939-48 . Bibcode : 2012OExpr..20.8939C . doi : 10.1364/oe.20.008939 . PMID 22513605 . 
  32. ↑ أورون، دان؛ تال، إران؛ سيلبربيرغ، يارون (2005-03-07). "المجهر ذو الدقة العميقة بدون مسح ضوئي" . أوبتكس إكسبرس . 13 (5): 1468-1476 . Bibcode : 2005OExpr..13.1468O . doi : 10.1364/opex.13.001468 . PMID 19495022 . 
  33. ↑ أهي، كيارش؛ أنور، مهدي (26-05-2016). "نمذجة صور التيراهيرتز بناءً على صور الأشعة السينية: منهج جديد للتحقق من صور التيراهيرتز وتحديد الأجسام ذات التفاصيل الدقيقة التي تتجاوز دقة التيراهيرتز" . في: أنور، مهدي ف؛ كرو، توماس و؛ منظور، طارق (محررون). فيزياء التيراهيرتز، والأجهزة، والأنظمة X: تطبيقات متقدمة في الصناعة والدفاع . وقائع SPIE. المجلد 9856. ص 985610. Bibcode : 2016SPIE.9856E..10A . doi : 10.1117/12.2228685 . S2CID 124315172 .   
  34. ↑ سولومون، كريس (2010). أساسيات معالجة الصور الرقمية . جون وايلي وأولاده المحدودة. ISBN 978-0-470-84473-1.
  35. ↑ ناس إم جيه؛ ووهل جيه سي (2010). "نمذجة واقعية لدالة انتشار نقطة الإضاءة في المجهر الضوئي الماسح متحد البؤر". مجلة الجمعية البصرية الأمريكية أ . 27 (2): 295-302 . Bibcode : 2010JOSAA..27..295N . doi : 10.1364/JOSAA.27.000295 . PMID 20126241 . 
  36. ↑ والاس دبليو، وشيفر إل إتش، وسويدلو جيه آر (2001). "دليل عملي لإزالة التشويش في المجهر الضوئي" . تقنيات حيوية . 31 (5): 1076-1078 ، 1080، 1082. doi : 10.2144/01315bi01 . PMID 11730015 . 
  37. ↑ كوفمان راينر؛ مولر باتريك؛ هيلدنبراند جورج؛ هاوسمان مايكل؛ كريمر كريستوف (2010). "تحليل تجمعات بروتين غشاء Her2/neu في أنواع مختلفة من خلايا سرطان الثدي باستخدام مجهر التموضع". مجلة المجهر . 242 (1): 46-54 . CiteSeerX 10.1.1.665.3604 . doi : 10.1111/j.1365-2818.2010.03436.x . PMID 21118230. S2CID 2119158 .   
  38. ↑ فان دي ليند إس.؛ وولتر إس.؛ ساوير إس. (2011). "التحويل الضوئي والتحديد الموضعي لجزيء واحد" . المجلة الأسترالية للكيمياء . 64 (5): 503-511 . doi : 10.1071/CH10284 .
  39. ↑ ك. جودا؛ ك. ك. تسيا؛ ب. جلالي (2009). "التصوير المضخم المشفر زمنيًا التسلسلي للمراقبة الآنية للظواهر الديناميكية السريعة". مجلة نيتشر . 458 (7242): 1145-1149 . Bibcode : 2009Natur.458.1145G . doi : 10.1038/nature07980 . PMID: 19407796. S2CID : 4415762 .  
  40. ↑ جلالي، بهرام؛ كيبويل، ديل؛ جودا، كيسوكي؛ تسيا، كيفن ك. (10 مايو 2010). "أداء المجهر المُضخّم المُشفّر زمنيًا التسلسلي". أوبتكس إكسبرس . 18 (10): 10016-10028 . Bibcode : 2010OExpr..1810016T . doi : 10.1364/OE.18.010016 . hdl : 10722/91333 . ISSN 1094-4087 . PMID 20588855. S2CID 8077381 .   
  41. ↑ كوساسيه، فيليكس أوتاما؛ دوكاتي، كاترينا (مايو 2018). "توصيف تدهور الخلايا الشمسية البيروفسكيتية من خلال المجهر الإلكتروني في الموقع وأثناء التشغيل" . نانو إنرجي . 47 : 243-256 . Bibcode : 2018NEne...47..243K . doi : 10.1016/j.nanoen.2018.02.055 . مؤرشف من الأصل في 26 يناير 2021. تم الاسترجاع في 28 يونيو 2019 .
  42. 1 2 H M Pollock and SG Kazarian, Microspectroscopy in the Mid-Infrared, in Encyclopedia of Analytical Chemistry (Robert A. Meyers, Ed, 1-26 (2014), John Wiley & Sons Ltd,
  43. 1 2 بولوك هوبرت م (2014). "التحليل الطيفي المجهري في نطاق الأشعة تحت الحمراء المتوسطة". موسوعة الكيمياء التحليلية . ص 1-26 . doi : 10.1002/9780470027318.a5609.pub2 . ISBN  978-0-470-02731-8.
  44. ↑ HM Pollock و DA Smith، استخدام مجسات المجال القريب للتحليل الطيفي الاهتزازي والتصوير الحراري الضوئي، في كتيب التحليل الطيفي الاهتزازي، JM Chalmers و PR Griffiths (محرران)، John Wiley & Sons Ltd، المجلد 2، الصفحات 1472 - 1492 (2002)
  45. ↑ كيلمان، فريتز؛ هيلينبراند، راينر (15 أبريل 2004). ريتشاردز، ديفيد؛ زاياتس، أناتولي (محررون). "المجهر القريب باستخدام تشتت الضوء المرن من طرف مسبار" . المعاملات الفلسفية للجمعية الملكية في لندن. السلسلة أ: العلوم الرياضية والفيزيائية والهندسية . 362 (1817): 787-805 . doi : 10.1098/rsta.2003.1347 . ISSN 1364-503X . PMID 15306494. S2CID 20211405. مؤرشف من الأصل في 9 نوفمبر 2020. تم الاسترجاع في 2 نوفمبر 2020 .   
  46. ↑ دوارتي، ف. ج. (2016). "المجهر الليزري القابل للضبط". في: دوارتي، ف. ج. (محرر). تطبيقات الليزر القابل للضبط ( الطبعة الثالثة). بوكا راتون: مطبعة سي آر سي . الصفحات 315-328 . ISBN   978-1-4822-6106-6.
  47. ↑ توماس جيه إل، رودولف دبليو (2008). "المجهر البيولوجي باستخدام نبضات الليزر فائقة القصر". في دوارتي إف جيه (محرر).تطبيقات الليزر القابل للضبط(الطبعة الثانية  ). بوكا راتون: صحافة اتفاقية حقوق الطفل . ص 245-80 . رقم ISBN  978-1-4200-6009-6.
  48. ↑ سوليم، جيه سي (1983). "التصوير بالأشعة السينية على العينات البيولوجية". وقائع المؤتمر الدولي حول الليزر '83 : 635-640 . OSTI 5998195 . 
  49. ↑ سوليم، ج. س. (1982). "التصوير المجسم بالأشعة السينية عالية الكثافة: منهج للتصوير الفوري عالي الدقة للعينات البيولوجية" . تقرير فني من مختبر لوس ألاموس الوطني LA-9508-MS . 83 : 23581. Bibcode : 1982STIN...8323581S . doi : 10.2172/7056325 . OSTI 7056325. مؤرشف من الأصل بتاريخ 2020-08-04 . تم الاطلاع عليه بتاريخ 2019-06-28 . 
  50. ↑ سوليم، جيه سي؛ بالدوين، جي سي (1982). "التصوير المجسم للكائنات الحية". مجلة ساينس . 218 (4569): 229-235 . Bibcode : 1982Sci...218..229S . doi : 10.1126/science.218.4569.229 . PMID 17838608. S2CID 32381820 .  
  51. ↑ سوليم، جيه سي؛ تشابلين، جي إف (1984). "التصوير المجهري الحيوي بالأشعة السينية". الهندسة البصرية . 23 (2): 193. Bibcode : 1984OptEn..23..193S . doi : 10.1117/12.7973410 .
  52. ↑ سوليم، جيه سي (1985). "التصوير المجسم الدقيق". موسوعة ماكجرو هيل للعلوم والتكنولوجيا .
  53. ↑ سوليم، جيه سي (1984). "التصوير المجسم بالأشعة السينية للعينات البيولوجية". وقائع المؤتمر الدولي التاسع لعلم الأحياء الضوئي، فيلادلفيا، بنسلفانيا، الولايات المتحدة الأمريكية، 3 يوليو 1984 (LA-UR-84-3340، CONF-840783-3): 19. OSTI 6314558 . 
  54. ↑ سوليم، ج. س. (1986). "تصوير العينات البيولوجية باستخدام الأشعة السينية اللينة عالية الكثافة". مجلة الجمعية البصرية الأمريكية ب . 3 (11): 1551-1565 . رمز Bibcode : 1986JOSAB...3.1551S . doi : 10.1364/josab.3.001551 .
  55. ↑ حداد، دبليو إس؛ سوليم، جيه سي؛ كولين، دي؛ بوير، كيه؛ رودس، سي كيه (1987). "وصف لنظرية وجهاز إعادة البناء الرقمي للهولوغرامات بتحويل فورييه"، وقائع مؤتمر التصوير الإلكتروني '87، 2-5 نوفمبر 1987، بوسطن؛ مجلة التصوير الإلكتروني ، (معهد الاتصالات الرسومية، بوسطن)، ص 693.
  56. ↑ حداد، دبليو إس؛ كولين، دي؛ بوير، ك؛ رودس، سي كيه؛ سوليم، جيه سي؛ وينشتاين، آر إس (1988). "تصميم مجهر هولوغرافي بتحويل فورييه". مجهر الأشعة السينية II . سلسلة سبرينغر في العلوم البصرية. المجلد 56. الصفحات 284-287 . doi : 10.1007/978-3-540-39246-0_49 . ISBN   978-3-662-14490-9.
  57. ↑ حداد، و.س.؛ سوليم، ج.س.؛ كولين، د.؛ بوير، ك.؛ رودس، س.ك. (1988). "تصميم مجهر هولوغرافي بتحويل فورييه يتضمن إعادة بناء الصورة الرقمية" . وقائع مؤتمر CLEO '88 حول الليزر والإلكترونيات الضوئية، أنهايم، كاليفورنيا، أبريل 1988؛ الجمعية البصرية الأمريكية، الملخص الفني للجمعية البصرية الأمريكية . 7 : WS4. مؤرشف من الأصل في 2016-02-02 . تم الاسترجاع في 2016-01-13 .
  58. ↑ حداد، و.س.؛ كولين، د.؛ سوليم، ج.س.؛ بوير، ك.؛ رودس، س.ك. (1988). "مجهر هولوغرافي بتحويل فورييه للأشعة السينية" . وقائع الاجتماع الموضوعي لجمعية البصريات الأمريكية حول الإشعاع المتماسك ذي الطول الموجي القصير: التوليد والتطبيقات، 26-29 سبتمبر 1988، كيب كود، ماساتشوستس. فالكون، ر.؛ كيرز، ج.؛ المحررون (جمعية البصريات الأمريكية، واشنطن العاصمة) : 284-289 . مؤرشف من الأصل في 27 يناير 2016. تم الاسترجاع في 13 يناير 2016 .
  59. ↑ سوليم، جيه سي؛ بوير، كيه؛ حداد، دبليو إس؛ رودس، سي كيه (1990). بروسنيتز، دونالد (محرر). "آفاق التصوير المجسم بالأشعة السينية باستخدام ليزرات الإلكترون الحر". ليزرات الإلكترون الحر وتطبيقاتها . ليزرات الإلكترون الحر وتطبيقاتها. 1227. بروسنيتز، د.؛ محرر. SPIE: 105-116 . Bibcode : 1990SPIE.1227..105S . doi : 10.1117/12.18609 . S2CID 121807907 . 
  60. ↑ حداد، دبليو إس؛ كولين، دي؛ سوليم، جيه سي؛ لونغورث، جيه دبليو؛ ماكفرسون، إل إيه؛ بوير، كيه؛ رودس، سي كيه (1991). "مجهر هولوغرافي بتحويل فورييه". في: تشانغ، وينشي؛ ميلش، جيمس آر (محرران). أنظمة الكاميرا والماسح الضوئي للإدخال . المجلد 1448. الصفحات 81-88 . Bibcode : 1991SPIE.1448...81H . doi : 10.1117/12.45347 . PMID 20733659. S2CID 120679508 .    
  61. ↑ حداد، و.س.؛ كولين، د.؛ سوليم، ج.س.؛ لونغورث، ج.؛ ماكفرسون، أ.؛ بوير، ك.؛ رودس، س.ك. (1992). "مجهر هولوغرافي بتحويل فورييه". البصريات التطبيقية . 31 (24): 4973-4978 . Bibcode : 1992ApOpt..31.4973H . doi : 10.1364/ao.31.004973 . PMID 20733659 . 
  62. ↑ بوير، ك.؛ سوليم، ج.س.؛ لونغورث، ج.؛ بوريسوف، أ.؛ رودس، س.ك. (1996). "التصوير المجهري الهولوغرافي ثلاثي الأبعاد الحيوي الطبي بأطوال موجية مرئية وفوق بنفسجية وأشعة سينية". مجلة نيتشر الطبية . 2 (8): 939-941 . doi : 10.1038/nm0896-939 . PMID 8705867. S2CID 25231033 .  
  63. ↑ بيل، أ. ج. (1880). " حول إنتاج الصوت وإعادة إنتاجه بواسطة الضوء" . المجلة الأمريكية للعلوم . المجلد 3-20 (118): 305-324 . رمز Bibcode : 1880AmJS...20..305B . doi : 10.2475/ajs.s3-20.118.305 . S2CID 130048089. مؤرشف من الأصل بتاريخ 27 نوفمبر 2022. تم الاطلاع عليه بتاريخ 28 يونيو 2019 . 
  64. ↑ ياو، ج.؛ وانغ، ل. ف . (2013). "المجهر الصوتي الضوئي" . مجلة ليزر فوتونيكس ريفيو . 7 (5): 1-36 . Bibcode : 2013LPRv....7..758Y . doi : 10.1002/lpor.201200060 . PMC 3887369. PMID 24416085 .  
  65. ↑ لانغر، ج.؛ بوتشيغر، ب.؛ جاك، ج.؛ كلار، ت. أ.؛ بيرر، ت. (2016). " المجهر الضوئي الصوتي والفلوري في مجال التردد" . مجلة البصريات الطبية الحيوية السريعة . 7 (7): 2692-2702 . doi : 10.1364/BOE.7.002692 . PMC 4948622. PMID 27446698 .  
  66. ↑ كوترلي م (أغسطس 2015). "إمكانيات جديدة لاستخدام التقنيات المجهرية في مجال الطب الشرعي" . وقائع المجهر والتحليل المجهري . 21 (ملحق 3): 1365-1366 . رمز Bibcode : 2015MiMic..21S1365K . doi : 10.1017/S1431927615007618 .
  67. 1 2 باسو إس، ميليت جيه آر (1986). المجهر الإلكتروني في علوم الصحة المهنية والبيئية الجنائية . نيويورك: مطبعة بلينوم.

للمزيد من القراءة

  • بلوتا، ماكسيميليان (1988). المجهر الضوئي المتقدم، المجلد 1: المبادئ والخصائص الأساسية . إلسيفير. ISBN 978-0-444-98939-0.
  • بلوتا، ماكسيميليان (1989). المجهر الضوئي المتقدم، المجلد 2: أساليب متخصصة . إلسيفير. ISBN 978-0-444-98918-5.
  • برادبري، س.؛ بريسجيردل، ب. (1998). مقدمة في المجهر الضوئي . دار نشر BIOS العلمية . ISBN 978-0-387-91515-9.
  • إينوي، شينيا (1986). المجهر الفيديوئي . دار بلينوم للنشر. رقم ISBN 978-0-306-42120-4.
  • كريمر، سي.؛ كريمر، تي. (1978). "اعتبارات حول مجهر المسح الليزري ذي الدقة العالية وعمق المجال" (ملف PDF) . مجلة ميكروسكوبيكا أكتا . 81 (1): 31-44 . PMID 713859. مؤرشف من الأصل (ملف PDF) بتاريخ 4 مارس 2016. تم الاطلاع عليه بتاريخ 22 ديسمبر 2009 . الأساس النظري لمجهر 4Pi فائق الدقة وتصميم مجهر المسح الليزري متحد البؤر الفلوري
  • ويليس، راندال سي. (2007). "صور من الحياة، جزيء واحد في كل مرة" . الكيمياء التحليلية . 79 (5): 1785-1788 . Bibcode : 2007AnaCh..79.1785W . doi : 10.1021/ac0718795 . PMID 17375393 . ، مقال مميز حول المجهرية دون حد الانعراج من عدد 1 مارس 2007 من مجلة الكيمياء التحليلية

عام

التقنيات