البلازميد

📅 آخر تحديث: ٥ أغسطس ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٥ أغسطس ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 10 صور
الموسوعة الحرة

رسم توضيحي لبكتيريا تُظهر الحمض النووي الكروموسومي والبلازميدات (غير متناسب مع الحجم)

البلازميد هو جزيء صغير من الحمض النووي خارج الكروموسومات داخل الخلية، وهو منفصل فعليًا عن الحمض النووي الكروموسومي ويمكنه التكاثر بشكل مستقل. توجد البلازميدات عادةً على شكل جزيئات صغيرة دائرية من الحمض النووي ثنائي السلسلة في البكتيريا ؛ ومع ذلك، توجد البلازميدات أحيانًا في الكائنات العتيقة والكائنات حقيقية النواة . [1] [2] غالبًا ما تحمل البلازميدات جينات مفيدة، مثل مقاومة المضادات الحيوية والضراوة . [3] في حين أن الكروموسومات كبيرة وتحتوي على جميع المعلومات الجينية الأساسية للعيش في ظل الظروف الطبيعية، فإن البلازميدات عادة ما تكون صغيرة جدًا وتحتوي على جينات إضافية لظروف خاصة.

تُستخدم البلازميدات الاصطناعية على نطاق واسع كناقلات في الاستنساخ الجزيئي ، حيث تعمل على دفع تكرار تسلسلات الحمض النووي المؤتلف داخل الكائنات الحية المضيفة. وفي المختبر، يمكن إدخال البلازميدات إلى الخلية عن طريق التحويل . وتتوفر البلازميدات الاصطناعية للشراء عبر الإنترنت. [4] [5] [6]

تعتبر البلازميدات نسخًا متماثلة ، وهي وحدات من الحمض النووي قادرة على التضاعف بشكل مستقل داخل مضيف مناسب. ومع ذلك، لا يتم تصنيف البلازميدات، مثل الفيروسات ، بشكل عام على أنها كائنات حية . [7] تنتقل البلازميدات من بكتيريا إلى أخرى (حتى من نوع آخر) في الغالب من خلال الاقتران . [8] يعد نقل المادة الوراثية من مضيف إلى مضيف أحد آليات نقل الجينات الأفقي ، وتعتبر البلازميدات جزءًا من موبيليوم . على عكس الفيروسات، التي تغلف مادتها الوراثية بغلاف بروتيني واقي يسمى الغلاف ، فإن البلازميدات عبارة عن حمض نووي "عارٍ" ولا تشفر الجينات اللازمة لتغليف المادة الوراثية للنقل إلى مضيف جديد؛ ومع ذلك، تشفر بعض فئات البلازميدات "الجنسية" الاقترانية اللازمة لنقلها الخاص. تتنوع البلازميدات في الحجم من 1 إلى أكثر من 400 ألف زوج أساسي ، [9] ويمكن أن يتراوح عدد البلازميدات المتطابقة في خلية واحدة من واحد إلى الآلاف.

تاريخ

تم صياغة مصطلح البلازميد في عام 1952 من قبل عالم الأحياء الجزيئي الأمريكي جوشوا ليدربيرج للإشارة إلى "أي محدد وراثي خارج الكروموسوم". [10] شمل الاستخدام المبكر للمصطلح أي مادة وراثية بكتيرية موجودة خارج الكروموسوم لجزء على الأقل من دورة تكاثرها، ولكن لأن هذا الوصف يشمل الفيروسات البكتيرية، فقد تم تحسين مفهوم البلازميد بمرور الوقت للإشارة إلى العناصر الجينية التي تتكاثر بشكل مستقل. [11] في وقت لاحق من عام 1968، تقرر اعتماد مصطلح البلازميد كمصطلح للعنصر الجيني خارج الكروموسوم، [12] وتمييزًا له عن الفيروسات، تم تضييق التعريف إلى العناصر الجينية الموجودة حصريًا أو بشكل أساسي خارج الكروموسوم ويمكنها التكاثر بشكل مستقل. [11]

الخصائص والميزات

هناك نوعان من تكامل البلازميد في بكتيريا المضيف: تتكاثر البلازميدات غير المتكاملة كما هو الحال في المثال العلوي، بينما يمكن أن تتكامل الإيبيسومات ، المثال السفلي، في كروموسوم المضيف .

لكي تتضاعف البلازميدات بشكل مستقل داخل الخلية، يجب أن تمتلك امتدادًا من الحمض النووي يمكن أن يعمل كمصدر للتضاعف . تسمى الوحدة ذاتية التضاعف، في هذه الحالة، البلازميد، بالنسخة المتماثلة . قد تتكون النسخة المتماثلة البكتيرية النموذجية من عدد من العناصر، مثل الجين لبروتين بدء التضاعف الخاص بالبلازميد (Rep)، ووحدات متكررة تسمى التكرارات ، وصناديق DnaA ، ومنطقة غنية بـ AT مجاورة. [11] تستخدم البلازميدات الأصغر إنزيمات التضاعف المضيفة لعمل نسخ من نفسها، بينما قد تحمل البلازميدات الأكبر جينات خاصة بتضاعف تلك البلازميدات. يمكن أيضًا إدراج بعض أنواع البلازميدات في كروموسوم المضيف، ويشار إلى هذه البلازميدات التكاملية أحيانًا باسم الإبيسومات في بدائيات النوى . [13]

تحمل البلازميدات دائمًا تقريبًا جينًا واحدًا على الأقل. العديد من الجينات التي يحملها البلازميد مفيدة للخلايا المضيفة، على سبيل المثال: تمكين الخلية المضيفة من البقاء في بيئة قد تكون قاتلة أو مقيدة للنمو. تشفر بعض هذه الجينات سمات مقاومة المضادات الحيوية أو مقاومة المعادن الثقيلة، في حين قد تنتج جينات أخرى عوامل ضراوة تمكن البكتيريا من استعمار المضيف والتغلب على دفاعاته أو لها وظائف أيضية محددة تسمح للبكتيريا باستخدام عنصر غذائي معين، بما في ذلك القدرة على تحلل المركبات العضوية المقاومة أو السامة. [14] يمكن للبلازميدات أيضًا أن تزود البكتيريا بالقدرة على تثبيت النيتروجين . تلعب بعض البلازميدات، والتي تسمى البلازميدات الخفية ، دورًا حاسمًا في نقل الجينات الأفقي ، لأنها تحمل جينات مقاومة للمضادات الحيوية. وبالتالي فهي عوامل مهمة في نشر المقاومة، والتي يمكن أن تؤدي إلى فشل العلاج بالمضادات الحيوية. [15]

تختلف البلازميدات الطبيعية بشكل كبير في خصائصها الفيزيائية. يمكن أن يتراوح حجمها من بلازميدات صغيرة جدًا يقل حجمها عن 1 كيلو قاعدة (kbp) إلى بلازميدات كبيرة جدًا تتكون من عدة أزواج قواعد (Mbp). في الطرف العلوي، لا يوجد فرق كبير بين الميجابلازميد والكروموسوم الصغير . تكون البلازميدات دائرية بشكل عام، ولكن من المعروف أيضًا وجود أمثلة على البلازميدات الخطية. تتطلب هذه البلازميدات الخطية آليات متخصصة لتكرار نهاياتها. [11]

قد توجد البلازميدات في خلية فردية بأعداد متفاوتة، تتراوح من نسخة واحدة إلى عدة مئات. يُطلق على العدد الطبيعي لنسخ البلازميد التي قد توجد في خلية واحدة اسم عدد نسخ البلازميد ، ويتم تحديده من خلال كيفية تنظيم بدء التضاعف وحجم الجزيء. تميل البلازميدات الأكبر إلى أن يكون لها عدد نسخ أقل. [13] البلازميدات ذات عدد النسخ المنخفض والتي توجد فقط كنسخة واحدة أو بضع نسخ في كل بكتيريا، عند انقسام الخلية ، معرضة لخطر الضياع في إحدى البكتيريا المنفصلة. تحتوي هذه البلازميدات ذات النسخة الواحدة على أنظمة تحاول توزيع نسخة بنشاط على كلتا الخليتين الابنتين. غالبًا ما يشار إلى هذه الأنظمة، والتي تشمل نظام parABS ونظام parMRC ، باسم نظام التقسيم أو وظيفة التقسيم للبلازميد. [16]

البلازميدات ذات الشكل الخطي غير معروفة بين مسببات الأمراض النباتية باستثناء واحد، وهو Rhodococcus fascians . [17]

التصنيفات والأنواع

نظرة عامة على اقتران البكتيريا
صورة مجهرية إلكترونية لحزمة من ألياف الحمض النووي، من المفترض أنها حلقة كروموسوم بكتيري واحد
صورة مجهرية إلكترونية لبلازميد الحمض النووي للبكتيريا (جزء من الكروموسوم)

يمكن تصنيف البلازميدات بعدة طرق. يمكن تصنيف البلازميدات على نطاق واسع إلى بلازميدات مقترنة وبلازميدات غير مقترنة. تحتوي البلازميدات المقترنة على مجموعة من جينات النقل التي تعزز الاقتران الجنسي بين الخلايا المختلفة. [13] في عملية الاقتران المعقدة ، قد تنتقل البلازميدات من بكتيريا إلى أخرى عبر الأهداب الجنسية المشفرة بواسطة بعض جينات النقل (انظر الشكل). [18] البلازميدات غير المقترنة غير قادرة على بدء الاقتران، وبالتالي لا يمكن نقلها إلا بمساعدة البلازميدات المقترنة. فئة وسيطة من البلازميدات قابلة للتحرك، وتحمل فقط مجموعة فرعية من الجينات المطلوبة للنقل. يمكنها التطفل على بلازميد مقترن، ونقلها بتردد عالٍ فقط في وجوده. [ بحاجة لمصدر ]

يمكن أيضًا تصنيف البلازميدات إلى مجموعات عدم التوافق. يمكن أن يحتوي الميكروب على أنواع مختلفة من البلازميدات، ولكن لا يمكن للبلازميدات المختلفة أن توجد إلا في خلية بكتيرية واحدة إذا كانت متوافقة. إذا لم يكن هناك بلازميدين متوافقين، فسوف يفقد أحدهما أو الآخر بسرعة من الخلية. وبالتالي، يمكن تعيين البلازميدات المختلفة لمجموعات عدم توافق مختلفة اعتمادًا على ما إذا كان بإمكانها التعايش معًا. عادةً ما تشترك البلازميدات غير المتوافقة (التي تنتمي إلى نفس مجموعة عدم التوافق) في نفس آليات التضاعف أو التقسيم وبالتالي لا يمكن الاحتفاظ بها معًا في خلية واحدة. [19] [20]

هناك طريقة أخرى لتصنيف البلازميدات حسب الوظيفة. هناك خمس فئات رئيسية:

يمكن أن تنتمي البلازميدات إلى أكثر من مجموعة وظيفية واحدة من هذه المجموعات.

بلازميدات الحمض النووي الريبوزي

على الرغم من أن معظم البلازميدات عبارة عن جزيئات DNA مزدوجة السلسلة، إلا أن بعضها يتكون من DNA أحادي السلسلة ، أو RNA مزدوج السلسلة بشكل أساسي . البلازميدات RNA عبارة عن نسخ خطية غير معدية من RNA خارج الكروموسوم، مغلفة وغير مغلفة، والتي تم العثور عليها في الفطريات والنباتات المختلفة، من الطحالب إلى النباتات البرية. ومع ذلك، في كثير من الحالات، قد يكون من الصعب أو المستحيل التمييز بوضوح بين البلازميدات RNA وفيروسات RNA وغيرها من RNA المعدية. [21]

الكروميدات

الكروميدات هي عناصر موجودة على الحدود بين الكروموسوم والبلازميد، وتوجد في حوالي 10% من أنواع البكتيريا التي تم تسلسلها بحلول عام 2009. تحمل هذه العناصر جينات أساسية ولها استخدام كودوني مشابه للكروموسوم، ولكنها تستخدم آلية تكرار من نوع البلازميد مثل RepABC منخفض عدد النسخ. ونتيجة لذلك، تم تصنيفها بشكل مختلف على أنها كروموسومات صغيرة أو بلازميدات كبيرة في الماضي. [22] في فيبريو ، تزامن البكتيريا تكرار الكروموسوم والكروميد بنسبة حجم الجينوم المحفوظة. [23]

متجهات

يمكن استخدام البلازميدات المصنعة صناعيًا كناقلات في الهندسة الوراثية . تعمل هذه البلازميدات كأدوات مهمة في مختبرات علم الوراثة والتكنولوجيا الحيوية، حيث تُستخدم عادةً لاستنساخ وتضخيم (عمل نسخ عديدة من) جينات معينة أو التعبير عنها . [24] تتوفر مجموعة كبيرة ومتنوعة من البلازميدات تجاريًا لمثل هذه الاستخدامات. عادةً ما يتم إدخال الجين المراد تكراره في بلازميد يحتوي عادةً على عدد من الميزات لاستخدامه. وتشمل هذه الجين الذي يمنح مقاومة لمضادات حيوية معينة ( يُستخدم الأمبيسلين غالبًا للسلالات البكتيرية)، ومصدر التكرار للسماح للخلايا البكتيرية بتكرار الحمض النووي للبلازميد، وموقع مناسب للاستنساخ (يشار إليه بموقع الاستنساخ المتعدد ).

يمكن تعريف عدم استقرار بنية الحمض النووي على أنه سلسلة من الأحداث العفوية التي تتوج بإعادة ترتيب غير متوقع أو فقدان أو اكتساب للمادة الوراثية. غالبًا ما يتم تشغيل مثل هذه الأحداث عن طريق نقل العناصر المتحركة أو عن طريق وجود عناصر غير مستقرة مثل الهياكل غير التقليدية (غير B). قد تشارك المناطق الملحقة المتعلقة بالعمود الفقري للبكتيريا في مجموعة واسعة من ظواهر عدم الاستقرار البنيوي. تشمل المحفزات المعروفة لعدم الاستقرار الجيني التكرارات المباشرة والمقلوبة والمترادفة، والتي من المعروف أنها ملحوظة في عدد كبير من ناقلات الاستنساخ والتعبير المتاحة تجاريًا. [25] يمكن أن تؤثر تسلسلات الإدراج أيضًا بشكل خطير على وظيفة البلازميد والعائد، من خلال التسبب في عمليات الحذف وإعادة الترتيب، أو التنشيط، أو التنظيم السلبي أو تعطيل التعبير الجيني المجاور . [26] لذلك، فإن تقليل أو القضاء التام على تسلسلات العمود الفقري غير المشفرة الخارجية من شأنه أن يقلل بشكل واضح من ميل حدوث مثل هذه الأحداث، وبالتالي، الإمكانات الإجمالية لإعادة التركيب الجيني للبلازميد. [27] [28]

تمثيل تخطيطي للبلازميد pBR322 ، أحد أول البلازميدات التي تم استخدامها على نطاق واسع كناقل استنساخ . يظهر على مخطط البلازميد الجينات المشفرة ( amp و tet لمقاومة الأمبيسلين والتتراسيكلين على التوالي)، ومصدر التضاعف ( ori )، ومواقع القيد المختلفة ( الموضحة باللون الأزرق).

استنساخ

البلازميدات هي أكثر ناقلات الاستنساخ البكتيرية استخدامًا. [29] تحتوي ناقلات الاستنساخ هذه على موقع يسمح بإدخال شظايا الحمض النووي، على سبيل المثال موقع استنساخ متعدد أو رابط متعدد يحتوي على العديد من مواقع التقييد المستخدمة بشكل شائع والتي يمكن ربط شظايا الحمض النووي بها . بعد إدخال الجين المطلوب، يتم إدخال البلازميدات في البكتيريا من خلال عملية تسمى التحول . تحتوي هذه البلازميدات على علامة قابلة للاختيار ، وعادةً ما تكون جين مقاومة المضادات الحيوية، والتي تمنح البكتيريا القدرة على البقاء والتكاثر في وسط نمو انتقائي يحتوي على المضادات الحيوية المعينة. تتعرض الخلايا بعد التحول للوسائط الانتقائية، وقد تبقى الخلايا التي تحتوي على البلازميد فقط. وبهذه الطريقة، تعمل المضادات الحيوية كمرشح لاختيار البكتيريا التي تحتوي على الحمض النووي البلازميدي فقط. قد يحتوي الناقل أيضًا على جينات علامة أخرى أو جينات مراسلة لتسهيل اختيار البلازميدات ذات الإدخالات المستنسخة. ومن الممكن بعد ذلك زراعة البكتيريا التي تحتوي على البلازميد بكميات كبيرة، وحصادها، ومن ثم عزل البلازميد المطلوب باستخدام طرق مختلفة لإعداد البلازميد .

يستخدم ناقل استنساخ البلازميد عادةً لاستنساخ شظايا الحمض النووي التي يصل طولها إلى 15 كيلو بايت . [30] لاستنساخ أطوال أطول من الحمض النووي، يتم استخدام البكتيريا العصوية مع حذف جينات الليزوجيني، أو الكونزميدات ، أو الكروموسومات الاصطناعية البكتيرية ، أو الكروموسومات الاصطناعية الخميرة .

مجموعات الجينات الحيوية والبروتين

الاستخدام الرئيسي للبلازميدات هو احتواء مجموعة جينية حيوية وراثية (BGC) تؤدي إلى البروتين المطلوب. [31] [32] يمكن بعد ذلك تحويل هذه البلازميدات إلى مضيف مناسب، وهو كائن حي قادر على التعبير عن تسلسل الجين. [33] تمامًا كما تنتج البكتيريا بروتينات لمنحها مقاومة المضادات الحيوية، يمكن أيضًا تحريضها على إنتاج كميات كبيرة من البروتينات من الجين المُدرج أو استخدامها كوحدة تخزين حيث يمكن استخراج البلازميد في وقت لاحق. يوفر هذا طريقة رخيصة وسهلة (1) لإنتاج البروتين الذي يشفره الجين، على سبيل المثال، الأنسولين بكميات كبيرة . بينما (2) يوفر خيارًا لإنتاج نفس البلازميد مسبقًا عندما يكون العرض منخفضًا.

العلاج الجيني

يمكن أيضًا استخدام البلازميدات لنقل الجينات كعلاج محتمل في العلاج الجيني حتى تتمكن من التعبير عن البروتين الذي ينقص الخلايا. تتطلب بعض أشكال العلاج الجيني إدخال الجينات العلاجية في مواقع مستهدفة كروموسومية محددة مسبقًا داخل الجينوم البشري . تعد ناقلات البلازميد واحدة من العديد من الأساليب التي يمكن استخدامها لهذا الغرض. توفر نوكليازات أصابع الزنك (ZFNs) طريقة للتسبب في كسر مزدوج الشريطة في موقع محدد لجينوم الحمض النووي والتسبب في إعادة التركيب المتماثل . يمكن أن تساعد البلازميدات المشفرة لـ ZFN في توصيل جين علاجي إلى موقع محدد بحيث يتم تجنب تلف الخلايا أو الطفرات المسببة للسرطان أو الاستجابة المناعية . [34]

نماذج الأمراض

كانت البلازميدات تستخدم تاريخيًا في هندسة الخلايا الجذعية الجنينية للفئران وراثيًا لإنشاء نماذج لأمراض وراثية لدى الفئران. وقد حالت الكفاءة المحدودة للتقنيات القائمة على البلازميد دون استخدامها في إنشاء نماذج أكثر دقة للخلايا البشرية. ومع ذلك، فإن التطورات في تقنيات إعادة تركيب الفيروسات المرتبطة بالغدة الدرقية ، ونوكليازات أصابع الزنك ، مكنت من إنشاء جيل جديد من نماذج الأمراض البشرية المتماثلة .

الحلقات

تم تقديم مصطلح الإبيزوم بواسطة فرانسوا جاكوب وإيلي وولمان في عام 1958 للإشارة إلى المادة الوراثية خارج الكروموسوم التي قد تتضاعف بشكل مستقل أو تندمج في الكروموسوم. [35] [36] ومع ذلك، منذ تقديم المصطلح، تغير استخدامه، حيث أصبح البلازميد المصطلح المفضل للتكرار المستقل للحمض النووي خارج الكروموسوم. في ندوة عام 1968 في لندن، اقترح بعض المشاركين التخلي عن مصطلح الإبيزوم ، على الرغم من أن آخرين استمروا في استخدام المصطلح مع تغيير في المعنى. [37] [38]

اليوم، يستخدم بعض المؤلفين مصطلح الإبيزوم في سياق بدائيات النوى للإشارة إلى بلازميد قادر على التكامل في الكروموسوم. يمكن تكرار البلازميدات التكاملية والحفاظ عليها بشكل مستقر في الخلية عبر أجيال متعددة، ولكن في مرحلة ما، ستوجد كجزيء بلازميد مستقل. [39] في سياق حقيقيات النوى، يستخدم مصطلح الإبيزوم للإشارة إلى جزيء الحمض النووي الدائري المغلق خارج الكروموسوم غير المتكامل والذي يمكن تكراره في النواة. [40] [41] الفيروسات هي الأمثلة الأكثر شيوعًا على ذلك، مثل فيروسات الهربس والفيروسات الغدية والفيروسات متعددة الأورام ، ولكن بعضها عبارة عن بلازميدات. تشمل الأمثلة الأخرى شظايا الكروموسومات الشاذة، مثل الكروموسومات الدقيقة المزدوجة ، والتي يمكن أن تنشأ أثناء تضخيم الجينات الاصطناعية أو في العمليات المرضية (على سبيل المثال، تحويل الخلايا السرطانية). تتصرف الإبيسومات في حقيقيات النوى بشكل مشابه للبلازميدات في بدائيات النوى من حيث أن الحمض النووي يتم الحفاظ عليه بشكل ثابت ويتضاعف مع الخلية المضيفة. يمكن أن تحدث أيضًا إبيسومات فيروسية سيتوبلازمية (كما في عدوى فيروس الجدري ). تتضاعف بعض الإبيسومات، مثل فيروسات الهربس، بآلية دائرة متدحرجة ، على غرار البكتيريا (فيروسات البكتيريا العاثية). يتضاعف البعض الآخر من خلال آلية تضاعف ثنائية الاتجاه ( بلازميدات نوع ثيتا ). في كلتا الحالتين، تظل الإبيسومات منفصلة جسديًا عن كروموسومات الخلية المضيفة. يتم الاحتفاظ بالعديد من فيروسات السرطان، بما في ذلك فيروس إبشتاين بار وفيروس الهربس المرتبط بسرطان كابوزي ، كإبيسومات كامنة ومتميزة كروموسوميًا في الخلايا السرطانية، حيث تعبر الفيروسات عن الجينات السرطانية التي تعزز تكاثر الخلايا السرطانية. في السرطانات، تتضاعف هذه الإبيسومات بشكل سلبي مع كروموسومات المضيف عندما تنقسم الخلية. عندما تبدأ هذه الحلقات الفيروسية عملية التكاثر التحللي لتوليد جزيئات فيروسية متعددة، فإنها تقوم عمومًا بتنشيط آليات الدفاع المناعية الخلوية الفطرية التي تقتل الخلية المضيفة.

صيانة البلازميد

تتضمن بعض البلازميدات أو العوائل الميكروبية نظام إدمان أو نظام قتل ما بعد الفصل (PSK)، مثل نظام hok/sok (قتل العائل/ قمع القتل) للبلازميد R1 في Escherichia coli . [42] ينتج هذا المتغير سمًا طويل الأمد وترياقًا قصير العمر . تم وصف العديد من أنواع أنظمة إدمان البلازميد (السم/ مضاد السم، القائم على التمثيل الغذائي، أنظمة العلاج بالهرمونات البديلة) في الأدبيات [43] واستخدامها في التطبيقات التقنية الحيوية (التخمير) أو الطبية الحيوية (علاج اللقاح). تبقى الخلايا الابنة التي تحتفظ بنسخة من البلازميد على قيد الحياة، بينما تموت الخلية الابنة التي تفشل في وراثة البلازميد أو تعاني من معدل نمو منخفض بسبب السم المتبقي من الخلية الأم. أخيرًا، يمكن تعزيز الإنتاجية الإجمالية. [ بحاجة لتوضيح ]

على النقيض من ذلك، فإن البلازميدات المستخدمة في التكنولوجيا الحيوية، مثل pUC18 وpBR322 والناقلات المشتقة منها، نادراً ما تحتوي على أنظمة إدمان السموم ومضادات السموم، وبالتالي يجب أن تبقى تحت ضغط المضادات الحيوية لتجنب فقدان البلازميد.

البلازميدات في الطبيعة

بلازميدات الخميرة

تحتوي الخميرة بشكل طبيعي على العديد من البلازميدات. ومن أبرزها البلازميدات 2 ميكرومتر - البلازميدات الدائرية الصغيرة المستخدمة غالبًا في الهندسة الوراثية للخميرة - والبلازميدات الخطية pGKL من Kluyveromyces lactis ، المسؤولة عن النمط الظاهري القاتل. [44]

غالبًا ما ترتبط أنواع أخرى من البلازميدات بنواقل استنساخ الخميرة والتي تشمل:

  • البلازميد التكاملي للخميرة (YIp) ، وهي ناقلات خميرة تعتمد على التكامل في كروموسوم المضيف من أجل البقاء والتكاثر، وعادةً ما تُستخدم عند دراسة وظائف جين منفرد أو عندما يكون الجين سامًا. كما يرتبط أيضًا بالجين URA3، الذي يشفر إنزيمًا مرتبطًا بالتخليق الحيوي لنيوكليوتيدات البيريميدين (T، C)؛
  • البلازميد التكاثري للخميرة (YRp) ، الذي ينقل تسلسلًا من الحمض النووي الكروموسومي الذي يتضمن أصل التكاثر. هذه البلازميدات أقل استقرارًا، حيث يمكن فقدها أثناء التبرعم.

البلازميدات الميتوكوندريا النباتية

تحتوي الميتوكوندريا في العديد من النباتات العليا على جزيئات DNA خطية أو دائرية خارج الكروموسومات ذاتية التضاعف والتي تعتبر بلازميدات. يمكن أن يتراوح حجمها من 0.7 كيلو بايت إلى 20 كيلو بايت. تم تصنيف البلازميدات بشكل عام إلى فئتين - دائرية وخطية. [45] تم عزل البلازميدات الدائرية والعثور عليها في العديد من النباتات المختلفة، حيث تعد البلازميدات الموجودة في Vicia faba و Chenopodium album الأكثر دراسة والتي تُعرف آلية تضاعفها. يمكن للبلازميدات الدائرية التضاعف باستخدام نموذج θ للتضاعف (كما هو الحال في Vicia faba ) ومن خلال تضاعف الدائرة المتدحرجة (كما هو الحال في C.album ). [46] تم التعرف على البلازميدات الخطية في بعض أنواع النباتات مثل Beta vulgaris و Brassica napus و Zea mays وما إلى ذلك ولكنها أكثر ندرة من نظيراتها الدائرية.

تظل وظيفة وأصل هذه البلازميدات غير معروفة إلى حد كبير. وقد اقترح أن البلازميدات الدائرية تشترك في سلف مشترك، حيث أن بعض الجينات في البلازميد الميتوكوندريا لها نظائر في الحمض النووي النووي مما يشير إلى التبادل بين المقصورات. وفي الوقت نفسه، تشترك البلازميدات الخطية في أوجه تشابه بنيوية مثل الإنفرترونات مع الحمض النووي الفيروسي والبلازميدات الفطرية، ومثل البلازميدات الفطرية، فإنها تحتوي أيضًا على محتوى منخفض من GC، وقد أدت هذه الملاحظات إلى بعض الافتراضات بأن هذه البلازميدات الخطية لها أصول فيروسية، أو أنها انتهت في الميتوكوندريا النباتية من خلال النقل الجيني الأفقي من الفطريات المسببة للأمراض. [45] [47]

دراسة البلازميدات

استخراج الحمض النووي البلازميدي

تُستخدم البلازميدات غالبًا لتنقية تسلسل معين، نظرًا لأنه يمكن تنقيتها بسهولة بعيدًا عن بقية الجينوم. لاستخدامها كناقلات، وللاستنساخ الجزيئي ، غالبًا ما يلزم عزل البلازميدات.

توجد عدة طرق لعزل الحمض النووي البلازميدي من البكتيريا، تتراوح من مجموعات استخلاص البلازميد ( miniprep إلى maxiprep أو bulkprep) ، والتحلل القلوي ، والتحلل الأنزيمي، والتحلل الميكانيكي. [24] يمكن استخدام الطريقة الأولى لمعرفة ما إذا كان البلازميد صحيحًا بسرعة في أي من العديد من استنساخات البكتيريا. العائد هو كمية صغيرة من الحمض النووي البلازميدي غير النقي، وهو ما يكفي للتحليل عن طريق الهضم التقييدي وبعض تقنيات الاستنساخ.

في هذه الطريقة، يتم زراعة كميات أكبر بكثير من المعلقات البكتيرية التي يمكن إجراء عملية تحضير قصوى منها. في الأساس، هذه عملية تحضير صغيرة موسعة تليها عملية تنقية إضافية. ينتج عن هذا كميات كبيرة نسبيًا (عدة مئات من الميكروجرامات) من الحمض النووي البلازميدي النقي للغاية.

تم إنشاء العديد من الأدوات التجارية لإجراء استخراج البلازميد بمقاييس مختلفة ونقاء ومستويات مختلفة من الأتمتة.

التوافقات

قد يظهر الحمض النووي البلازميدي في أحد خمسة أشكال، والتي (لحجم معين) تعمل بسرعات مختلفة في هلام أثناء الرحلان الكهربائي . يتم سرد الأشكال أدناه بالترتيب من حيث الحركة الكهربائية (السرعة لجهد كهربائي معين) من الأبطأ إلى الأسرع:

  • يحتوي الحمض النووي الدائري المفتوح المقطوع على خيط واحد مقطوع.
  • إن الحمض النووي الدائري المسترخي سليم تمامًا مع عدم قطع السلسلتين ولكن تم إرخاؤه إنزيميًا (إزالة الملفات الفائقة). يمكن نمذجة ذلك عن طريق ترك سلك تمديد ملتوي ينفك ويسترخي ثم توصيله بنفسه.
  • يحتوي الحمض النووي الخطي على نهايات حرة، إما لأن كلا السلسلتين قد تم قطعهما أو لأن الحمض النووي كان خطيًا في الجسم الحي . ويمكن نمذجة ذلك باستخدام سلك تمديد كهربائي غير متصل بنفسه.
  • إن الحمض النووي الملتف بشكل فائق (أو الدائري المغلق تساهميًا ) سليم تمامًا مع عدم قطع كلا السلسلتين، مع وجود التواء متكامل، مما ينتج عنه شكل مضغوط. ويمكن تصميم نموذج لذلك عن طريق لف سلك تمديد ثم توصيله بنفسه.
  • يعتبر الحمض النووي المشوه شديد الالتواء مشابهًا للحمض النووي شديد الالتواء ، ولكنه يحتوي على مناطق غير مقترنة تجعله أقل إحكاما بعض الشيء؛ وقد ينتج هذا عن القلوية المفرطة أثناء تحضير البلازميد.

معدل هجرة الشظايا الخطية الصغيرة يتناسب طرديًا مع الجهد المطبق عند جهد منخفض. عند الجهد الأعلى، تهاجر الشظايا الأكبر بمعدلات متزايدة باستمرار ولكنها مختلفة. وبالتالي، تقل دقة الهلام مع زيادة الجهد.

عند جهد منخفض محدد، يكون معدل هجرة شظايا الحمض النووي الخطية الصغيرة دالة على طولها. تهاجر الشظايا الخطية الكبيرة (أكثر من 20 كيلو بايت أو نحو ذلك) بمعدل ثابت معين بغض النظر عن الطول. وذلك لأن الجزيئات "تتنفس"، حيث يتبع الجزء الأكبر من الجزيء الطرف الأمامي عبر مصفوفة الهلام. تُستخدم عمليات الهضم التقييدية بشكل متكرر لتحليل البلازميدات المنقاة. تكسر هذه الإنزيمات الحمض النووي على وجه التحديد عند تسلسلات قصيرة معينة. تشكل الشظايا الخطية الناتجة "أشرطة" بعد الرحلان الكهربائي للهلام . من الممكن تنقية شظايا معينة عن طريق قطع الأشرطة من الهلام وإذابة الهلام لتحرير شظايا الحمض النووي.

بسبب تكوينها الضيق، يهاجر الحمض النووي الملتف بشكل أسرع عبر الهلام مقارنة بالحمض النووي الخطي أو الدائري المفتوح.

برمجيات المعلوماتية الحيوية والتصميم

إن استخدام البلازميدات كتقنية في علم الأحياء الجزيئي مدعوم ببرامج المعلوماتية الحيوية . تسجل هذه البرامج تسلسل الحمض النووي لناقلات البلازميد، وتساعد في التنبؤ بمواقع قطع إنزيمات القيد ، والتخطيط للتلاعبات. ومن أمثلة حزم البرامج التي تتعامل مع خرائط البلازميد ApE و Clone Manager وGeneConstructionKit وGeneious و Genome Compiler وLabGenius وLasergene و MacVector وpDraw32 وSerial Cloner و UGENE وVectorFriends و Vector NTI وWebDSV. تساعد هذه البرامج في إجراء تجارب كاملة في الحاسوب قبل إجراء التجارب الرطبة. [48]

مجموعات البلازميد

تم إنشاء العديد من البلازميدات على مر السنين وقام الباحثون بتوزيع البلازميدات على قواعد بيانات البلازميدات مثل المنظمات غير الربحية Addgene وBCCM/GeneCorner. يمكن للمرء العثور على البلازميدات وطلبها من قواعد البيانات هذه للبحث. غالبًا ما يقوم الباحثون أيضًا بتحميل تسلسلات البلازميدات إلى قاعدة بيانات NCBI، والتي يمكن من خلالها استرداد تسلسلات البلازميدات المحددة.

انظر أيضا

مراجع

  1. ^ Esser K, Kück U, Lang-Hinrichs C, Lemke P, Osiewacz HD, Stahl U, et al. (1986). البلازميدات في حقيقيات النوى: الأساسيات والتطبيقات . برلين: Springer-Verlag. ISBN 978-3-540-15798-4.
  2. ^ Wickner RB, Hinnebusch A, Lambowitz AM, Gunsalus IC, Hollaender A, eds. (1987). "البلازميدات الميتوكوندريا والبلاستيدات الخضراء". عناصر خارج الكروموسومات في حقيقيات النوى السفلى . بوسطن، ماساتشوستس: سبرينغر الولايات المتحدة. ص 81-146. رقم ISBN 978-1-4684-5251-8.
  3. ^ Smillie C، Garcillán-Barcia MP، Francia MV، Rocha EP، de la Cruz F (سبتمبر 2010). "تنقل البلازميدات". مراجعات علم الأحياء الدقيقة والبيولوجيا الجزيئية . 74 (3): 434-452. دوى :10.1128/MMBR.00020-10. بمك 2937521 . بميد  20805406. 
  4. ^ "GenBrick Gene Synthesis - Long DNA Sequences | GenScript".
  5. ^ "تخليق الجينات | IDT". تقنيات الحمض النووي المتكاملة .
  6. ^ "تركيب الجينات باستخدام Invitrogen GeneArt".
  7. ^ Sinkovics J, Horvath J, Horak A (1998). "أصل وتطور الفيروسات (مراجعة)". Acta Microbiologica et Immunologica Hungarica . 45 (3–4): 349–390. PMID  9873943.
  8. ^ Smillie C، Garcillán-Barcia MP، Francia MV، Rocha EP، de la Cruz F (سبتمبر 2010). "تنقل البلازميدات". مراجعات علم الأحياء الدقيقة والبيولوجيا الجزيئية . 74 (3): 434-452. دوى :10.1128/MMBR.00020-10. بمك 2937521 . بميد  20805406. 
  9. ^ توماس سي إم، سامرز دي (2008). "البلازميدات البكتيرية". موسوعة علوم الحياة . doi :10.1002/9780470015902.a0000468.pub2. ISBN 978-0-470-01617-6.
  10. ^ ليدربيرج جيه ​​(أكتوبر 1952). "علم الوراثة الخلوية والتعايش الوراثي". المراجعات الفسيولوجية . 32 (4): 403-430. CiteSeerX 10.1.1.458.985 . doi :10.1152/physrev.1952.32.4.403. PMID  13003535. 
  11. ^ abcd Hayes F (2003). "الفصل 1 – وظيفة وتنظيم البلازميدات". في Casali N، Presto A (المحرران). E. Coli Plasmid Vectors: Methods and Applications . Methods in Molecular Biology. المجلد 235. Humana Press. ص 1-5. ISBN 978-1-58829-151-6.
  12. ^ Falkow S. "علم الجينوم الميكروبي: الوقوف على أكتاف العمالقة". جمعية علم الأحياء الدقيقة .
  13. ^ abc Brown TA (2010). "الفصل 2 – ناقلات استنساخ الجينات: البلازميدات والبكتيريا". استنساخ الجينات وتحليل الحمض النووي: مقدمة (الطبعة السادسة). Wiley-Blackwell. ISBN 978-1405181730.
  14. ^ Smyth C, Leigh RJ, Delaney S, Murphy RA, Walsh F (أغسطس 2022). "Shooting hoops: globetrotting plasmids spread more than just antimicrobial resistant genes across One Health". Microbial Genomics . 8 (8): 1–10. doi : 10.1099/mgen.0.000858 . PMC 9484753. PMID  35960657 . 
  15. ^ Nicoloff H, Hjort K, Andersson DI, Wang H (مايو 2024). "ثلاث آليات متزامنة تولد تباينًا في عدد نسخ الجينات ومقاومة غير متجانسة للمضادات الحيوية". Nature Communications . 15 (1): 3981. Bibcode :2024NatCo..15.3981N. doi : 10.1038 /s41467-024-48233-0. PMC 11087502. PMID  38730266. 
  16. ^ Dmowski M, Jagura-Burdzy G (2013). "وظائف الصيانة المستقرة النشطة في البلازميدات ذات عدد النسخ المنخفض للبكتيريا إيجابية الجرام I. أنظمة التقسيم". المجلة البولندية لعلم الأحياء الدقيقة . 62 (1): 3-16. doi :10.33073/pjm-2013-001. PMID  23829072.
  17. ^ Stes E, Vandeputte OM, El Jaziri M, Holsters M, Vereecke D (2011). "انقلاب بكتيري ناجح: كيف تعيد Rhodococcus fascians توجيه نمو النبات". المراجعة السنوية لعلم أمراض النبات . 49 (1). المراجعات السنوية : 69–86. doi :10.1146/annurev-phyto-072910-095217. PMID  21495844.
  18. ^ Clark DP, Pazdernik NJ (2012). Molecular Biology (الطبعة الثانية). Academic Cell. ص 795. ISBN 978-0123785947.
  19. ^ Radnedge L, Richards H (January 1999). "الفصل 2: ​​تطوير ناقلات البلازميد". في Smith MC, Sockett RE (المحرران). الطرق الجينية للكائنات البدائية المتنوعة . طرق في علم الأحياء الدقيقة. المجلد 29. أكاديميك بريس. ص 51-96 (75-77). ISBN 978-0-12-652340-9.
  20. ^ "البلازميدات 101: أصل التضاعف". addgene.org .
  21. ^ Brown GG, Finnegan PM (يناير 1989). RNA Plasmids . International Review of Cytology . المجلد 117. ص 1-56. doi :10.1016/s0074-7696(08)61333-9. ISBN 978-0-12-364517-3. PMID  2684889.
  22. ^ هاريسون بي دبليو، لوير آر بي، كيم إن كيه، يونج جيه ​​بي (أبريل 2010). "إدخال "الكروميد" البكتيري: ليس كروموسومًا، وليس بلازميدًا". الاتجاهات في علم الأحياء الدقيقة . 18 (4): 141-148. doi :10.1016/j.tim.2009.12.010. PMID  20080407.
  23. ^ Bruhn M, Schindler D, Kemter FS, Wiley MR, Chase K, Koroleva GI, et al. (30 نوفمبر 2018). "وظيفة أصلين للتكاثر في سلالات ضمة الكوليرا ذات الكروموسوم الواحد". Frontiers in Microbiology . 9 : 2932. doi : 10.3389 /fmicb.2018.02932 . PMC 6284228. PMID  30559732. 
  24. ^ ab Russell DW, Sambrook J (2001). الاستنساخ الجزيئي: دليل المختبر . كولد سبرينج هاربور، نيويورك: مختبر كولد سبرينج هاربور.
  25. ^ Oliveira PH, Prather KJ, Prazeres DM, Monteiro GA (أغسطس 2010). "تحليل تكرارات الحمض النووي في البلازميدات البكتيرية يكشف عن إمكانية حدوث أحداث عدم استقرار متكررة". علم الأحياء الدقيقة التطبيقي والتكنولوجيا الحيوية . 87 (6): 2157-2167. doi : 10.1007/s00253-010-2671-7 . PMID  20496146. S2CID  19780633.
  26. ^ Gonçalves GA, Oliveira PH, Gomes AG, Prather KL, Lewis LA, Prazeres DM, et al. (أغسطس 2014). "الدليل على أن أحداث إدخال انتقال IS2 منحازة نحو التحولات التركيبية المفاجئة في الحمض النووي المستهدف ويتم تعديلها من خلال مجموعة متنوعة من معلمات الثقافة". علم الأحياء الدقيقة التطبيقي والتكنولوجيا الحيوية . 98 (15): 6609-6619. doi :10.1007/s00253-014-5695-6. hdl : 1721.1/104375 . PMID  24769900. S2CID  9826684.
  27. ^ Oliveira PH, Mairhofer J (سبتمبر 2013). "البلازميدات الخالية من العلامات للتطبيقات التكنولوجية الحيوية - الآثار والآفاق". Trends in Biotechnology . 31 (9): 539–547. doi :10.1016/j.tibtech.2013.06.001. PMID  23830144.
  28. ^ Oliveira PH, Prather KJ, Prazeres DM, Monteiro GA (سبتمبر 2009). "عدم الاستقرار البنيوي للمستحضرات الصيدلانية الحيوية البلازميدية: التحديات والتداعيات". Trends in Biotechnology . 27 (9): 503–511. doi :10.1016/j.tibtech.2009.06.004. PMID  19656584.
  29. ^ Geoghegan T (2002). "Molecular Applications". في Streips UN، Yasbin RE (المحرران). Modern Microbial Genetics (الطبعة الثانية). Wiley-Blackwell. ص. 248. ISBN 978-0471386650.
  30. ^ Preston A (2003). "الفصل 2 – اختيار ناقل الاستنساخ". في Casali N، Preston A (المحرران). ناقلات البلازميدات الإشريكية القولونية: الأساليب والتطبيقات . طرق في علم الأحياء الجزيئي. المجلد 235. Humana Press. ص 19-26. ISBN 978-1-58829-151-6.
  31. ^ مارا ب، جيلر ماكجراث د، سوتر إي، تايلور جي تي، باتشياداكي إم جي، إدجكومب في بي (مايو 2024). "مجموعات الجينات الحيوية المنقولة بالبلازميد داخل عمود مائي بحري طبقي بشكل دائم". الكائنات الحية الدقيقة . 12 (5): 929. doi : 10.3390/microorganisms12050929 . PMC 11123730. PMID  38792759 . 
  32. ^ Kwon MJ، Steiniger C، Cairns TC، Wisecaver JH، Lind AL، Pohl C، وآخرون. (أكتوبر 2021). "ما وراء نموذج مجموعة الجينات الحيوية: شبكات التعبير المشترك على مستوى الجينوم تربط عوامل النسخ المجمعة وغير المجمعة بالمسارات الأيضية الثانوية". Microbiology Spectrum . 9 (2): e0089821. doi :10.1128/Spectrum.00898-21. PMC 8557879. PMID 34523946  . 
  33. ^ Libis V, MacIntyre LW, Mehmood R, Guerrero L, Ternei MA, Antonovsky N, et al. (سبتمبر 2022). "التعبئة والتعبير المتعدد لمجموعات الجينات الحيوية". Nature Communications . 13 (1): 5256. Bibcode :2022NatCo..13.5256L. doi :10.1038/s41467-022-32858-0. PMC 9448795. PMID  36068239 . 
  34. ^ Kandavelou K, Chandrasegaran S (2008). "البلازميدات للعلاج الجيني". البلازميدات: الأبحاث الحالية والاتجاهات المستقبلية . دار كايستر للنشر الأكاديمي. رقم ISBN 978-1-904455-35-6.
  35. ^ مورانج م (ديسمبر 2009). "ما يخبرنا به التاريخ: XIX. مفهوم الإبيزوم". مجلة العلوم البيولوجية . 34 (6): 845-848. doi :10.1007/s12038-009-0098-z. PMID  20093737. S2CID  11367145.
  36. ^ Jacob F، Wollman EL (1958)، “Les épisomes، Elements génétiques ajoutés”، Comptes Rendus de l'Académie des Sciences de Paris ، 247 (1): 154–56، PMID  13561654
  37. ^ Hayes W (1969). "ما هي الإبيسومات والبلازميدات؟". في Wolstenholme GE، O'Connor M (المحرران). الإبيسومات البكتيرية والبلازميدات . ندوة مؤسسة CIBA. ص. 4-8. ISBN 978-0700014057.
  38. ^ Wolstenholme GE, O'Connor M, eds. (1969). Bacterial Episomes and Plasmids. CIBA Foundation Symposium. ص 244-245. ISBN 978-0700014057.
  39. ^ براون تا (2011). مقدمة في علم الوراثة: نهج جزيئي. علوم جارلاند. ص. 238. ردمك 978-0815365099.
  40. ^ Van Craenenbroeck K, Vanhoenacker P, Haegeman G (سبتمبر 2000). "Episomal vectors for gene expression in mammalian cells". المجلة الأوروبية للكيمياء الحيوية . 267 (18): 5665–5678. doi :10.1046/j.1432-1327.2000.01645.x. PMID  10971576.
  41. ^ Colosimo A, Goncz KK, Holmes AR, Kunzelmann K, Novelli G, Malone RW, et al. (August 2000). "Transfer and expression of foreign genes in mammalian cells" (PDF) . BioTechniques . 29 (2): 314–18, 320–22, 324 passim. doi : 10.2144/00292rv01 . PMID  10948433. مؤرشف من الأصل (PDF) في 24 يوليو 2011.
  42. ^ Gerdes K, Rasmussen PB, Molin S (مايو 1986). "نوع فريد من وظيفة صيانة البلازميد: القتل بعد الفصل للخلايا الخالية من البلازميد". وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 83 (10): 3116–3120. Bibcode :1986PNAS...83.3116G. doi : 10.1073/pnas.83.10.3116 . PMC 323463. PMID  3517851 . 
  43. ^ Kroll J, Klinter S, Schneider C, Voss I, Steinbüchel A (نوفمبر 2010). "أنظمة إدمان البلازميد: وجهات النظر والتطبيقات في التكنولوجيا الحيوية". التكنولوجيا الحيوية الميكروبية . 3 (6): 634–657. doi :10.1111/j.1751-7915.2010.00170.x. PMC 3815339. PMID  21255361 . 
  44. ^ Gunge N, Murata K, Sakaguchi K (يوليو 1982). "تحويل الخميرة Saccharomyces cerevisiae باستخدام البلازميدات القاتلة للحمض النووي الخطي من Kluyveromyces lactis". مجلة علم الجراثيم . 151 (1): 462-464. doi :10.1128/JB.151.1.462-464.1982. PMC 220260. PMID  7045080. 
  45. ^ ab Gualberto JM, Mileshina D, Wallet C, Niazi AK, Weber-Lotfi F, Dietrich A (مايو 2014). "جينوم الميتوكوندريا النباتية: الديناميكيات والصيانة". Biochimie . 100 : 107–120. doi :10.1016/j.biochi.2013.09.016. PMID  24075874.
  46. ^ Backert S, Meissner K, Börner T (فبراير 1997). "الخصائص الفريدة للبلازميد الدائري المتدحرج للميتوكوندريا mp1 من النبات الأعلى Chenopodium album (L.)". Nucleic Acids Research . 25 (3): 582–589. doi :10.1093/nar/25.3.582. PMC 146482. PMID  9016599 . 
  47. ^ Handa H (يناير 2008). "البلازميدات الخطية في الميتوكوندريا النباتية: تعايش سلمي أم غزوات خبيثة؟". Mitochondrion . 8 (1): 15–25. doi :10.1016/j.mito.2007.10.002. PMID  18326073.
  48. ^ "فيديو ردود الفعل لناقل NTI". مختبر الحمض النووي .

قراءة إضافية

أعمال عامة

  • كلاين دي دبليو، بريسكوت إل إم، هارلي جيه (1999). علم الأحياء الدقيقة . بوسطن: دبليو سي بي/ماكجرو هيل.
  • Moat AG, Foster JW, Spector MP (2002). علم وظائف الأعضاء الميكروبية . Wiley-Liss. ISBN 978-0-471-39483-9.
  • سميث سي يو (2002). "الفصل الخامس: التلاعب بالجزيئات الحيوية". عناصر علم الأعصاب الجزيئي (الطبعة الثالثة). تشيتشيستر، غرب ساسكس، إنجلترا: وايلي. ص 101-11. رقم ISBN 978-0-470-85717-5.

الحلقات

  • Piechaczek C, Fetzer C, Baiker A, Bode J, Lipps HJ (يناير 1999). "ناقل يعتمد على أصل تكرار SV40 وS/MARs الكروموسومية يتضاعف بشكل متتابع في خلايا CHO". Nucleic Acids Research . 27 (2): 426–428. doi :10.1093/nar/27.2.426. PMC  148196. PMID  9862961 .
  • Bode J, Fetzer CP, Nehlsen K, Scinteie M, Hinrichsen BH, Baiker A, et al. (January 2001). "The Hitchhiking Principle: Optimizing episomal vectors for the use in gene therapy and biotechnology" (PDF) . العلاج الجيني والبيولوجيا الجزيئية . 6 : 33–46. مؤرشف من الأصل (PDF) في 30 مايو 2009.
  • Nehlsen K, Broll S, Bode J (2006). "Replicating minicircles: Generation of nonviral episomes for the efficient modifying of dividing cells" (PDF) . Gene Ther Mol Biol . 10 : 233–44. مؤرشف من الأصل (PDF) في 30 مايو 2009.
  • Ehrhardt A, Haase R, Schepers A, Deutsch MJ, Lipps HJ, Baiker A (يونيو 2008). "Episomal vectors for gene therapy". Current Gene Therapy . 8 (3): 147–161. doi :10.2174/156652308784746440. PMID  18537590. مؤرشف من الأصل في 26 سبتمبر 2011.
  • Argyros O, Wong SP, Niceta M, Waddington SN, Howe SJ, Coutelle C, et al. (ديسمبر 2008). "التعبير المستمر عن الجينات المنقولة في الكبد بعد توصيل منطقة ارتباط السقالة/المصفوفة التي تحتوي على ناقل غير فيروسي". العلاج الجيني . 15 (24): 1593–1605. doi : 10.1038/gt.2008.113 . PMID  18633447.
  • Wong SP, Argyros O, Coutelle C, Harbottle RP (أغسطس 2009). "استراتيجيات التعديل الجيني للخلايا". الرأي الحالي في العلاج الجزيئي . 11 (4): 433–441. PMID  19649988. مؤرشف من الأصل في 17 سبتمبر 2011.
  • Haase R، Argyros O، Wong SP، Harbottle RP، Lipps HJ، Ogris M، وآخرون (مارس 2010). "pEPito: ناقل تعبير إبسومي غير فيروسي محسّن بشكل ملحوظ للخلايا الثديية". BMC Biotechnology . 10 : 20. doi : 10.1186/1472-6750-10-20 . PMC  2847955. PMID  20230618 .
  • الجمعية الدولية لعلم الأحياء البلازميدي والعناصر الوراثية المتنقلة الأخرى
  • ما هي التكنولوجيا الحيوية
  • تاريخ البلازميدات مع الجدول الزمني
تم الاسترجاع من "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=البلازميد&oldid=1253109285#المتجهات"
Original text
Rate this translation
Your feedback will be used to help improve Google Translate