الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات

📅 آخر تحديث: ٢٠ يوليو ٢٠٢٦
✍️ نُشر في: ٢٠ يوليو ٢٠٢٦
📷 يحتوي على 7 صور
الموسوعة الحرة

صورة مجهرية بؤرية لمستعمرة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية المشتقة من مريض مصاب بالمهق العيني الجلدي . يشير اللون الأزرق إلى عامل النسخ Oct-4 ، والأخضر إلى البروتين SSEA4، والأحمر إلى أنوية الخلايا .
مستعمرات خلايا جذعية بشرية مستحثة متعددة القدرات. الخلايا المغزلية الشكل في الخلفية هي خلايا ليفية فأرية. أما الخلايا المكونة للمستعمرة المركزية فهي خلايا جذعية بشرية مستحثة متعددة القدرات فقط.

الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (المعروفة أيضًا باسم خلايا iPS أو iPSCs ) هي نوع من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يمكن توليدها مباشرةً من خلية جسدية . وقد طوّر تقنية iPSC كلٌ من شينيا ياماناكا وكازوتوشي تاكاهاشي في كيوتو ، اليابان ، حيث أثبتا معًا في عام 2006 أن إدخال أربعة جينات محددة (تُسمى c-Myc و Oct4 و Sox2 و KLF4 )، والمعروفة مجتمعةً باسم عوامل ياماناكا، والتي تُشفّر عوامل النسخ ، يُمكن أن يُحوّل الخلايا الجسدية إلى خلايا جذعية متعددة القدرات. [ 1 ] مُنح شينيا ياماناكا جائزة نوبل لعام 2012 بالاشتراك مع السير جون جوردون "لاكتشافهما إمكانية إعادة برمجة الخلايا الناضجة لتصبح متعددة القدرات". [ 2 ]

تُبشر الخلايا الجذعية متعددة القدرات بآفاق واعدة في مجال الطب التجديدي . [ 3 ] ولأنها قادرة على التكاثر إلى ما لا نهاية، فضلاً عن قدرتها على إنتاج جميع أنواع الخلايا الأخرى في الجسم (مثل الخلايا العصبية وخلايا القلب والبنكرياس والكبد)، فإنها تمثل مصدراً وحيداً للخلايا التي يمكن استخدامها لاستبدال الخلايا المفقودة بسبب التلف أو المرض.

يُعدّ نوع الخلايا الجذعية الجنينية أشهر أنواع الخلايا الجذعية متعددة القدرات . ومع ذلك، ونظرًا لأن توليد الخلايا الجذعية الجنينية ينطوي على تدمير (أو على الأقل التلاعب) [ 4 ] جنين في مرحلة ما قبل الانغراس، فقد أثير جدل واسع حول استخدامها. ويمكن الآن الحصول على سلالات من الخلايا الجذعية الجنينية المتوافقة مع المريض باستخدام تقنية نقل نواة الخلية الجسدية (SCNT).

بما أن الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) يمكن استخلاصها مباشرةً من أنسجة البالغين، فإنها لا تغني عن الحاجة إلى الأجنة فحسب، بل يمكن إنتاجها بطريقة تراعي خصائص المريض، مما يعني أن كل فرد يمكن أن يمتلك خط خلايا جذعية متعددة القدرات خاص به. ويمكن استخدام هذه الإمدادات غير المحدودة من الخلايا الذاتية لإجراء عمليات زرع دون خطر الرفض المناعي. ورغم أن تقنية الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات لم تصل بعد إلى مرحلة تُعتبر فيها عمليات الزرع العلاجية آمنة، إلا أن هذه الخلايا تُستخدم على نطاق واسع في جهود اكتشاف الأدوية الشخصية وفهم الأساس الخاص بكل مريض للمرض. [ 5 ]

أطلق ياماناكا على معالجات iPSCs اسم "i" بحرف "i" صغير نظرًا لشعبية جهاز iPod ومنتجات Apple الأخرى . [ 6 ] [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ]

في ندوة نوبل الخاصة به، استشهد ياماناكا بالعمل الرائد السابق لهارولد وينتروب حول دور بروتين تحديد الخلايا العضلية 1 (MyoD) في إعادة برمجة مصير الخلية إلى سلالة عضلية باعتباره مقدمة مهمة لاكتشاف الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات. [ 10 ]

إنتاج

مخطط لتوليد الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS). (1) عزل الخلايا المانحة وزراعتها. (2) نقل الجينات المرتبطة بالخلايا الجذعية إلى الخلايا باستخدام نواقل فيروسية. تشير الخلايا الحمراء إلى الخلايا التي تُعبر عن الجينات الخارجية. (3) حصاد الخلايا وزراعتها وفقًا لزراعة الخلايا الجذعية الجنينية ، باستخدام خلايا مغذية مُعطلة انقساميًا (رمادي فاتح). (4) تتحول مجموعة فرعية صغيرة من الخلايا المنقولة إلى خلايا iPS وتُنتج مستعمرات شبيهة بالخلايا الجذعية الجنينية.

تُستخلص الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) عادةً بإدخال نواتج مجموعات محددة من الجينات المرتبطة بتعدد القدرات، أو ما يُعرف بـ"عوامل إعادة البرمجة"، إلى نوع خلوي معين. تتكون المجموعة الأصلية من عوامل إعادة البرمجة (المعروفة أيضًا بعوامل ياماناكا) من عوامل النسخ Oct4 (Pou5f1) و Sox2 و Klf4 و cMyc . على الرغم من أن هذا المزيج هو الأكثر شيوعًا في إنتاج الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات، إلا أنه يمكن استبدال كل عامل من هذه العوامل وظيفيًا بعوامل نسخ ذات صلة، أو جزيئات miRNA ، أو جزيئات صغيرة، أو حتى جينات غير ذات صلة مثل محددات السلالة. [ 11 ] من الواضح أيضًا أن العوامل المحفزة للانقسام الخلوي، مثل C-MYC/L-MYC، أو تثبيط نقاط تفتيش دورة الخلية ، مثل p53، تُسهم في تهيئة حالة خلوية ملائمة لإعادة برمجة الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات. [ 12 ]

يُعدّ استخلاص الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) عمليةً بطيئةً وغير فعّالة في العادة، إذ تستغرق من أسبوع إلى أسبوعين لخلايا الفئران، ومن ثلاثة إلى أربعة أسابيع للخلايا البشرية، بكفاءة تتراوح بين 0.01% و0.1%. مع ذلك، فقد أُحرز تقدّم ملحوظ في تحسين كفاءة هذه العملية وتقليل الوقت اللازم للحصول على الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات. عند إدخال عوامل إعادة البرمجة، تبدأ الخلايا بتكوين مستعمرات تُشبه الخلايا الجذعية متعددة القدرات، والتي يُمكن عزلها بناءً على شكلها، أو الظروف التي تُحفّز نموّها، أو من خلال التعبير عن الواسمات السطحية أو الجينات المُبلِّغة .

الجيل الأول (الفأرة)

تم توليد الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات لأول مرة على يد شينيا ياماناكا وكازوتوشي تاكاهاشي في جامعة كيوتو ، اليابان، عام 2006. [ 1 ] افترض الباحثان أن الجينات المهمة لوظيفة الخلايا الجذعية الجنينية قد تكون قادرة على تحفيز حالة جنينية في الخلايا البالغة. اختارا أربعة وعشرين جينًا سبق تحديدها كجينات مهمة في الخلايا الجذعية الجنينية، واستخدما الفيروسات القهقرية لنقل هذه الجينات إلى خلايا ليفية فأرية . تم تعديل الخلايا الليفية هندسيًا بحيث يمكن عزل أي خلايا تعيد تنشيط جين Fbx15 الخاص بالخلايا الجذعية الجنينية باستخدام المضادات الحيوية.

بعد إضافة جميع العوامل الأربعة والعشرين، ظهرت مستعمرات شبيهة بالخلايا الجذعية الجنينية، أعادت تنشيط جين Fbx15 المُخبِر، وتمكنت من التكاثر بلا حدود. ولتحديد الجينات اللازمة لإعادة البرمجة، أزال الباحثون عاملاً واحداً في كل مرة من مجموعة العوامل الأربعة والعشرين. وبهذه العملية، حددوا أربعة عوامل، هي Oct4 وSox2 وcMyc وKlf4، كان كل منها ضرورياً، ومجتمعةً كافيةً لتوليد مستعمرات شبيهة بالخلايا الجذعية الجنينية تحت ضغط إعادة تنشيط جين Fbx15.

الجيل الثاني (الفأرة)

في يونيو 2007، نشرت ثلاث مجموعات بحثية منفصلة، ​​من بينها مجموعة ياماناكا، ومجموعة تعاونية بين جامعة هارفارد وجامعة كاليفورنيا في لوس أنجلوس، ومجموعة من معهد ماساتشوستس للتكنولوجيا ، دراساتٍ حسّنت بشكلٍ كبيرٍ من أسلوب إعادة البرمجة، مما أدى إلى ظهور خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات (iPSCs) لا يمكن تمييزها عن الخلايا الجذعية الجنينية (ESCs). وعلى عكس الجيل الأول من خلايا iPSCs، أنتجت خلايا iPSCs من الجيل الثاني فئرانًا هجينة قابلة للحياة، وساهمت في تكوين السلالة الجرثومية للفئران، وبذلك حققت "المعيار الذهبي" للخلايا الجذعية متعددة القدرات.

تم اشتقاق هذه الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من الجيل الثاني من خلايا ليفية فأرية عن طريق التعبير بوساطة الفيروسات القهقرية عن عوامل النسخ الأربعة نفسها (Oct4، Sox2، cMyc، Klf4). مع ذلك، وبدلاً من استخدام Fbx15 لاختيار الخلايا متعددة القدرات، استخدم الباحثون Nanog ، وهو جين ذو أهمية وظيفية في الخلايا الجذعية الجنينية. وباستخدام هذه الاستراتيجية المختلفة، ابتكر الباحثون خلايا جذعية محفزة متعددة القدرات مطابقة وظيفيًا للخلايا الجذعية الجنينية. [ 13 ] [ 14 ] [ 15 ] [ 16 ]

الخلايا الجذعية البشرية المستحثة متعددة القدرات

توليد من الخلايا الليفية البشرية

أُعلن في نوفمبر 2007 عن إعادة برمجة الخلايا البشرية إلى خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات (iPSCs) من قِبل مجموعتين بحثيتين مستقلتين: شينيا ياماناكا من جامعة كيوتو باليابان، رائد طريقة iPSC الأصلية، وجيمس طومسون من جامعة ويسكونسن-ماديسون، أول من استخلص الخلايا الجذعية الجنينية البشرية. وباستخدام المبدأ نفسه المُستخدم في إعادة برمجة الفئران، نجحت مجموعة ياماناكا في تحويل الخلايا الليفية البشرية إلى خلايا iPSCs باستخدام الجينات المحورية الأربعة نفسها، وهي Oct4 وSox2 وKlf4 وcMyc، وذلك باستخدام نظام فيروسي قهقري [ 17 ] . بينما استخدم طومسون وزملاؤه مجموعة مختلفة من العوامل، وهي Oct4 وSox2 وNanog وLin28، باستخدام نظام فيروسي بطيء [ 18 ] .

التوليد من أنواع خلايا إضافية

يتطلب الحصول على الخلايا الليفية لإنتاج الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) أخذ خزعة من الجلد ، وقد برزت جهود حثيثة لتحديد أنواع الخلايا التي يسهل الوصول إليها. [ 19 ] [ 20 ] في عام 2008، تم استخلاص الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من خلايا الكيراتين البشرية، والتي أمكن الحصول عليها من شعرة واحدة. [ 21 ] [ 22 ] في عام 2010، تم استخلاصها من خلايا الدم المحيطية، [ 23 ] [ 24 ] وفي عام 2012، تم إنتاجها من خلايا الظهارة الكلوية في البول. [ 25 ]

تشمل الاعتبارات الأخرى لنوع الخلية الأولية الحمل الطفري (على سبيل المثال، قد تحمل خلايا الجلد طفرات أكثر بسبب التعرض للأشعة فوق البنفسجية)، [ 19 ] [ 20 ] والوقت اللازم لتوسيع نطاق الخلايا الأولية، [ 19 ] والقدرة على التمايز إلى نوع خلية معين. [ 26 ]

الجينات المستخدمة لإنتاج الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات

يعتمد توليد الخلايا الجذعية المستحثة بشكل حاسم على عوامل النسخ المستخدمة في عملية الحث.

تم تحديد Oct-3/4 وبعض منتجات عائلة جينات Sox (Sox1، Sox2، Sox3، وSox15) كمنظمات نسخ أساسية تشارك في عملية التحفيز، ويؤدي غيابها إلى استحالة التحفيز. ومع ذلك، تم تحديد جينات إضافية، بما في ذلك بعض أفراد عائلة Klf (Klf1، Klf2، Klf4، وKlf5)، وعائلة Myc (c-myc، L-myc، وN-myc)، و Nanog ، و LIN28 ، لزيادة كفاءة التحفيز. [ 27 ]

  • يُعدّ Oct-3/4 (Pou5f1) أحد عوامل النسخ الثمانية (Oct) ، ويلعب دورًا محوريًا في الحفاظ على قدرة الخلايا الجذعية الجنينية على التمايز إلى أنواع مختلفة من الخلايا. يؤدي غياب Oct-3/4 في الخلايا التي تحمله ، مثل الخلايا الجنينية الأولية والخلايا الجذعية الجنينية، إلى تمايز تلقائي إلى خلايا الأرومة المغذية ، وبالتالي فإن وجوده يُكسب الخلايا الجذعية الجنينية قدرتها على التمايز إلى أنواع مختلفة من الخلايا. تفشل جينات أخرى عديدة في عائلة Oct، بما في ذلك Oct1 و Oct6 ، وهما من أقرباء Oct-3/4 ، في تحفيز عملية النسخ، مما يُثبت حصرية Oct-3/4 في هذه العملية. وقد أظهر شولر أن الإفراط في التعبير عن Oct4 أثناء إعادة البرمجة يُسبب تغيرات فوق جينية تُؤدي إلى تدهور جودة الخلايا الجذعية المُستحثة متعددة القدرات (iPSCs). بالمقارنة مع إعادة برمجة OSKM (Oct4، Sox2، Klf4، وc-Myc)، فإن إعادة برمجة SKM (Sox2، Klf4، وc-Myc) الجديدة تُنتج خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات (iPSCs) ذات قدرة نمائية تُعادل قدرة الخلايا الجذعية الجنينية، وذلك استنادًا إلى قدرتها على توليد فئران iPSC كاملة من خلال استكمال الأجنة رباعية الصيغة الصبغية . [ 28 ] [ 29 ] كما يُمكن توليد خلايا iPSCs ذات قدرة نمائية أعلى عن طريق تعزيز التماثل الثنائي بين Oct4 وSox2 باستخدام عامل Sox هجين. [ 30 ]
  • عائلة Sox : ترتبط عائلة Sox من عوامل النسخ بالحفاظ على القدرة على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا، على غرار Oct-3/4، على الرغم من ارتباطها بالخلايا الجذعية متعددة القدرات وأحادية القدرة، على عكس Oct-3/4 الذي يُعبر عنه حصريًا في الخلايا الجذعية متعددة القدرات. في حين كان Sox2 هو الجين الأولي المستخدم للتحفيز من قبل ياماناكا وآخرون، وجينيش وآخرون، وتومسون وآخرون، فقد وُجد أن عوامل نسخ أخرى في عائلة Sox تعمل بكفاءة مماثلة في عملية التحفيز. يُنتج Sox1 خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات (iPSCs) بكفاءة مماثلة لـ Sox2، كما تُنتج الجينات Sox3 و Sox15 و Sox18 خلايا iPSCs أيضًا، ولكن بكفاءة أقل. قام فيليتشكو وآخرون بهندسة عامل إعادة برمجة فائق مُهجن، Sox2-17 أو "super-Sox"، والذي عزز أو سمح بتوليد خلايا iPSCs من الفئران والبشر وقرود المكاك والخنازير والأبقار. [ 30 ]
  • عائلة Klf : تم تحديد Klf4، أحد عوامل النسخ من عائلة Klf، لأول مرة بواسطة ياماناكا وآخرون، وأكده جانيش وآخرون كعامل لتوليد خلايا iPS الفأرية، كما أثبت ياماناكا وآخرون قدرته على توليد خلايا iPS البشرية. مع ذلك، أفاد تومسون وآخرون أن Klf4 غير ضروري لتوليد خلايا iPS البشرية، بل إنه فشل في توليدها.وُجد أن Klf2 وKlf4 عاملان قادران على توليد خلايا iPS، وكذلك الجينات ذات الصلة Klf1 و Klf5 ، وإن كان ذلك بكفاءة أقل.
  • عائلة Myc : تُعدّ عائلة Myc من عوامل النسخ جينات أولية مُسرطنة متورطة في السرطان. وقد أثبت كلٌّ من ياماناكا وآخرون وجينيش وآخرون أن c-myc عاملٌ مُشارك في توليد خلايا iPS الفأرية، كما أثبت ياماناكا وآخرون أنه عاملٌ مُشارك في توليد خلايا iPS البشرية. مع ذلك، فإن استخدام عائلة جينات "myc" في تحفيز خلايا iPS، كما في دراسات تومسون وآخرون وياماناكا وآخرون، يُثير مخاوف بشأن إمكانية استخدام هذه الخلايا كعلاجات سريرية، إذ أصيب 25% من الفئران التي زُرعت بخلايا iPS مُحفّزة بواسطة c-myc بأورام مسخية قاتلة . وقد تم تحديد N-myc و L-myc كبديلين لـ c-myc، وبكفاءة مماثلة.
  • نانوغ : في الخلايا الجذعية الجنينية، يُعدّ نانوغ، إلى جانب أوكت-3/4 وسوكس2، ضروريًا لتعزيز القدرة على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا. ولذلك، كان من المفاجئ أن يُشير ياماناكا وزملاؤه إلى أن نانوغ غير ضروري للتحفيز، على الرغم من أن تومسون وزملاؤه قد أشاروا إلى إمكانية توليد خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات (iPS) باستخدام نانوغ كأحد العوامل.
  • LIN28 : هو بروتين رابط للـ mRNA [ 31 ] يُعبَّر عنه في الخلايا الجذعية الجنينية وخلايا سرطان الأجنة، ويرتبط بالتمايز والتكاثر. وقد أثبت تومسون وآخرون أن LIN28 عاملٌ في توليد الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSC) بالاشتراك مع Oct4 وSox2 وNanog. [ 18 ]
  • Glis1 : Glis1 هو عامل نسخ يمكن استخدامه مع Oct-3/4 وSox2 وKlf4 لتحفيز القدرة على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا. ويُوفر العديد من المزايا عند استخدامه بدلاً من C-myc. [ 32 ]

تحديات إعادة برمجة الخلايا إلى حالة التعددية الخلوية

على الرغم من أن الأساليب التي ابتكرها ياماناكا وآخرون أثبتت إمكانية إعادة برمجة الخلايا البالغة إلى خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات، إلا أن هناك تحديات لا تزال مرتبطة بهذه التقنية:

  1. انخفاض الكفاءة: بشكل عام، كانت عملية تحويل الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) منخفضة للغاية. على سبيل المثال، بلغت نسبة إعادة برمجة الخلايا الجسدية إلى خلايا iPS في دراسة ياماناكا الأصلية على الفئران 0.01-0.1%. [ 1 ] قد يعكس انخفاض معدل الكفاءة الحاجة إلى توقيت دقيق، وتوازن، ومستويات تعبير مطلقة لجينات إعادة البرمجة. وقد يشير أيضًا إلى الحاجة إلى تغييرات جينية أو فوق جينية نادرة في مجموعة الخلايا الجسدية الأصلية أو في الاستزراع المطول. مع ذلك، تم مؤخرًا اكتشاف مسار لإعادة برمجة فعالة يتطلب خفض تنظيم مُركب إعادة تشكيل النيوكليوسوم وإزالة الأسيتيل ( NuRD ). يؤدي الإفراط في التعبير عن Mbd3، وهي وحدة فرعية من NuRD، إلى تثبيط تحفيز الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات. من ناحية أخرى، يؤدي استنفاد Mbd3 إلى تحسين كفاءة إعادة البرمجة، [ 33 ] مما ينتج عنه إعادة برمجة حتمية ومتزامنة لخلايا iPS (كفاءة تقارب 100% خلال سبعة أيام من خلايا الفئران والبشر). [ 34 ]
  2. الإدخال الجينومي: يحدّ دمج عوامل النسخ في الجينوم من جدوى استخدام هذه الطريقة، نظرًا لخطر إدخال طفرات في جينوم الخلية المستهدفة. [ 35 ] ومن الاستراتيجيات الشائعة لتجنب الإدخال الجينومي استخدام ناقل مختلف. وقد تمّ استكشاف البلازميدات والفيروسات الغدية ونواقل الترانسبيوزون ، ولكن غالبًا ما يكون لهذا النهج تأثير سلبي يتمثل في انخفاض الإنتاجية. [ 36 ] [ 37 ] [ 38 ]
  3. القدرة على إحداث الأورام: اعتمادًا على الطرق المستخدمة، قد تشكل إعادة برمجة الخلايا البالغة للحصول على الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) مخاطر كبيرة تحد من استخدامها في البشر. على سبيل المثال، إذا استُخدمت الفيروسات لتعديل جينوم الخلايا، فقد يُحفز ذلك التعبير عن الجينات الورمية (الجينات المسببة للسرطان). في فبراير 2008، أعلن العلماء عن اكتشاف تقنية لإزالة الجينات الورمية بعد تحفيز تعدد القدرات، مما يزيد من إمكانية استخدام خلايا iPS في علاج الأمراض البشرية. [ 39 ] في دراسة أخرى، أفاد ياماناكا بإمكانية إنتاج خلايا iPSCs بدون الجين الورمي c-Myc. استغرقت العملية وقتًا أطول ولم تكن بنفس الكفاءة، لكن الكائنات الهجينة الناتجة لم تُصب بالسرطان. [ 40 ] يؤدي تعطيل أو حذف مثبط الورم p53، وهو منظم رئيسي للسرطان، إلى زيادة كفاءة إعادة البرمجة بشكل ملحوظ. [ 41 ] لذا، يبدو أن هناك مفاضلة بين كفاءة إعادة البرمجة وتكوين الأورام.
  4. إعادة البرمجة غير الكاملة: تواجه عملية إعادة البرمجة أيضًا تحديًا يتمثل في اكتمالها. ويُعدّ هذا تحديًا خاصًا لأن الشفرة فوق الجينية على مستوى الجينوم يجب إعادة صياغتها لتتوافق مع نوع الخلية المستهدفة لإعادة برمجة الخلية بشكل كامل. ومع ذلك، تمكنت ثلاث مجموعات بحثية منفصلة من إيجاد خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات (iPS) مشتقة من الخلايا الليفية الجنينية للفأر (MEF)، والتي يمكن حقنها في الأرومات الكيسية رباعية الصيغة الصبغية ، مما أدى إلى ولادة فئران حية مشتقة بالكامل من خلايا iPS، وبالتالي وضع حدًا للجدل الدائر حول تكافؤ الخلايا الجذعية الجنينية (ESCs) وخلايا iPS فيما يتعلق بتعدد القدرات. [ 42 ]
يلخص هذا الجدول الزمني الاستراتيجيات والتقنيات الرئيسية المستخدمة لتطوير الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات في السنوات الخمس الأولى بعد الإنجاز الذي حققه ياماناكا وزملاؤه عام 2006. وتمثل الصفوف ذات الألوان المتشابهة الدراسات التي استخدمت استراتيجيات مماثلة لإعادة البرمجة.

يلخص الجدول الموجود على اليمين الاستراتيجيات والتقنيات الرئيسية المستخدمة لتطوير الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات في السنوات الخمس الأولى بعد الإنجاز الذي حققه ياماناكا وآخرون عام 2006. وتمثل الصفوف ذات الألوان المتشابهة الدراسات التي استخدمت استراتيجيات مماثلة لإعادة البرمجة.

مناهج بديلة

محاكاة عوامل النسخ بالمواد الكيميائية

إحدى الاستراتيجيات الرئيسية لتجنب المشكلتين (1) و(2) هي استخدام جزيئات صغيرة تحاكي تأثيرات عوامل النسخ. تعوض هذه المركبات عن عامل إعادة البرمجة الذي لا يستهدف الجينوم بفعالية أو يفشل في إعادة البرمجة لسبب آخر، مما يزيد من كفاءة إعادة البرمجة. كما أنها تتجنب مشكلة التكامل الجينومي، الذي يُسهم في بعض الحالات في تكوين الأورام. أُجريت دراسات رئيسية باستخدام هذه الاستراتيجية في عام 2008. درس ميلتون وزملاؤه تأثيرات حمض الفالبرويك ، وهو مثبط لهيستون دي أسيتيلاز (HDAC) . ووجدوا أنه يزيد من كفاءة إعادة البرمجة بمقدار 100 ضعف (مقارنةً بطريقة ياماناكا التقليدية لعامل النسخ). [ 43 ] اقترح الباحثون أن هذا المركب يحاكي الإشارات التي يُسببها عادةً عامل النسخ c-Myc. واقتُرح نوع مماثل من آلية التعويض لمحاكاة تأثيرات Sox2 . في عام 2008، قام دينغ وزملاؤه... استُخدم تثبيط إنزيم ناقل ميثيل الهيستون (HMT) باستخدام المركب BIX-01294 بالتزامن مع تنشيط قنوات الكالسيوم في غشاء البلازما لزيادة كفاءة إعادة البرمجة. [ 44 ] أفاد دينغ وزملاؤه من جامعة بكين في يوليو 2013 بإمكانية إنتاج خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات دون أي تعديل وراثي. استخدموا مزيجًا من سبعة مركبات جزيئية صغيرة، من بينها DZNep، لتحفيز الخلايا الجسدية للفئران على التحول إلى خلايا جذعية أطلقوا عليها اسم خلايا CiPS، بكفاءة بلغت 0.2%، وهي نسبة مماثلة لتلك المُحققة باستخدام تقنيات إنتاج خلايا iPS القياسية. أُدخلت خلايا CiPS إلى أجنة فئران نامية، ووُجد أنها تُساهم في جميع أنواع الخلايا الرئيسية، مما يُثبت قدرتها على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا. [ 45 ] [ 46 ]

أظهر دينغ وزملاؤه بديلاً لإعادة برمجة عوامل النسخ باستخدام مواد كيميائية شبيهة بالأدوية. من خلال دراسة عملية التحول الميزانشيمي-الظهاري (MET)، التي تُحفز فيها الخلايا الليفية على التحول إلى حالة شبيهة بالخلايا الجذعية، حدد فريق دينغ مادتين كيميائيتين - مثبط ALK5، SB431412، ومثبط MEK ( كيناز البروتين المنشط بالميتوجين )، PD0325901 - وُجد أنهما يزيدان من كفاءة الطريقة الجينية التقليدية بمقدار 100 ضعف. وبإضافة مركب ثالث معروف بدوره في مسار بقاء الخلية، وهو ثيازوفيفين، زادت الكفاءة بمقدار 200 ضعف. كما أدى استخدام مزيج هذه المركبات الثلاثة إلى تقليص مدة عملية إعادة برمجة الخلايا الليفية البشرية من أربعة أسابيع إلى أسبوعين. [ 47 ] [ 48 ]

في أبريل 2009، تم إثبات إمكانية توليد الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) دون أي تعديل جيني للخلايا البالغة: إذ يكفي معالجة الخلايا بشكل متكرر ببروتينات معينة يتم إدخالها إلى الخلايا عبر روابط متعددة الأرجينين لتحفيز قدرتها على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا. [ 49 ] ويُطلق على هذه الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات اختصارًا piPSCs (الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات بالبروتين).

المتجهات البديلة

تتمثل إحدى الاستراتيجيات الرئيسية الأخرى لتجنب مشاكل مثل تكوين الأورام وانخفاض الإنتاجية في استخدام أشكال بديلة من النواقل: الفيروسات الغدية والبلازميدات ومركبات الحمض النووي أو البروتين العارية.

في عام ٢٠٠٨، استخدم هوشيدلينجر وزملاؤه فيروسًا غديًا لنقل عوامل النسخ الأربعة اللازمة إلى الحمض النووي لخلايا الجلد والكبد لدى الفئران، مما أدى إلى خلايا مطابقة للخلايا الجذعية الجنينية. يتميز الفيروس الغدي عن النواقل الأخرى، كالفيروسات والفيروسات القهقرية، بأنه لا يُدخل أيًا من جيناته الخاصة في الخلية المضيفة المستهدفة، وبالتالي يتجنب احتمالية حدوث طفرات إدخالية . [ ٤٤ ] في عام ٢٠٠٩، أثبت فريد وزملاؤه نجاح إعادة برمجة الخلايا الليفية البشرية إلى خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات. [ ٥٠ ] ومن المزايا الأخرى لاستخدام الفيروسات الغدية أنها لا تحتاج إلا لفترة وجيزة لإتمام عملية إعادة البرمجة بفعالية.

في عام 2008 أيضًا، اكتشف ياماناكا وزملاؤه إمكانية نقل الجينات الأربعة الضرورية باستخدام بلازميد. [ 36 ] نجح فريق ياماناكا في إعادة برمجة خلايا الفئران عن طريق نقل جينين بلازميديين يحملان عوامل إعادة البرمجة؛ عبّر البلازميد الأول عن جين c-Myc، بينما عبّر الثاني عن العوامل الثلاثة الأخرى ( Oct4 و Klf4 و Sox2 ). على الرغم من أن طرق البلازميد تتجنب الفيروسات، إلا أنها لا تزال تتطلب جينات محفزة للسرطان لإتمام عملية إعادة البرمجة. تتمثل المشكلة الرئيسية الأخرى في هذه الطرق في أنها أقل كفاءة بكثير مقارنةً بالطرق الفيروسية الارتجاعية. علاوة على ذلك، فقد ثبت أن البلازميدات المنقولة تندمج في جينوم الخلية المضيفة، وبالتالي لا تزال تشكل خطر الطفرات الإدخالية. نظرًا لأن الطرق غير الفيروسية الارتجاعية أظهرت مستويات كفاءة منخفضة للغاية، فقد حاول الباحثون إنقاذ هذه التقنية بفعالية باستخدام ما يُعرف بنظام PiggyBac Transposon . أثبتت العديد من الدراسات أن هذا النظام قادر على إيصال عوامل إعادة البرمجة الرئيسية بكفاءة دون إحداث طفرات في جينوم الخلية المضيفة. يعتمد نظام PiggyBac Transposon على إعادة استئصال الجينات الخارجية، مما يزيل مشكلة الطفرات الإدخالية.

اكتساب الخلايا متعددة القدرات بواسطة المحفز

في يناير 2014، نُشرت مقالتان تدعيان أنه يمكن توليد نوع من الخلايا الجذعية متعددة القدرات عن طريق تعريض الخلايا لأنواع معينة من الإجهاد (سموم بكتيرية، أو درجة حموضة منخفضة تبلغ 5.7، أو ضغط فيزيائي)؛ وقد أُطلق على الخلايا الناتجة اسم خلايا STAP، اختصارًا لـ " اكتساب القدرة على التمايز المحفز" . [ 51 ]

في ضوء الصعوبات التي واجهتها مختبرات أخرى في تكرار نتائج الدراسة المفاجئة، دعا أحد المؤلفين المشاركين في مارس 2014 إلى سحب المقالات. [ 52 ] وفي 4 يونيو 2014، وافقت المؤلفة الرئيسية، أوبوكاتا، على سحب كلتا الورقتين البحثيتين [ 53 ] بعد أن تبين أنها ارتكبت "مخالفة بحثية" وفقًا لما خلص إليه تحقيق أجراه معهد ريكين في 1 أبريل 2014. [ 54 ]

جزيئات الحمض النووي الريبي

تُعدّ الميكرو آر إن إيه جزيئات قصيرة من الحمض النووي الريبوزي (RNA) ترتبط بتسلسلات مكملة على الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) وتمنع التعبير الجيني. يُمكن استخدام قياس التغيرات في تعبير الميكرو آر إن إيه في الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) للتنبؤ بقدرتها على التمايز. [ 55 ] كما يُمكن استخدام إضافة الميكرو آر إن إيه لتعزيز قدرة الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات. وقد اقتُرحت عدة آليات في هذا الصدد. [ 55 ] تعمل جزيئات الميكرو آر إن إيه الخاصة بالخلايا الجذعية الجنينية (مثل miR-291 وmiR-294 وmiR-295) على تعزيز كفاءة التحفيز متعدد القدرات من خلال العمل في مسار الإشارة اللاحق لـ c-Myc. [ 56 ] كما يُمكن للميكرو آر إن إيه منع التعبير عن مثبطات عوامل النسخ الأربعة لياماناكا، وقد توجد آليات إضافية تحفز إعادة البرمجة حتى في غياب عوامل النسخ الخارجية المضافة. [ 55 ]

هوية

ثلاثة أنواع من الخلايا/الأنسجة الجرثومية المتمايزة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات: الخلايا العصبية ( الأديم الظاهر )، والغضروف (العظم الرخو، الأديم المتوسط ) والخلايا الكأسية في الأمعاء ( الأديم الباطن ).

تتشابه الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات مع الخلايا الجذعية الطبيعية متعددة القدرات، مثل الخلايا الجذعية الجنينية، في جوانب عديدة، مثل التعبير عن جينات وبروتينات معينة للخلايا الجذعية، وأنماط مثيلة الكروماتين ، ووقت التضاعف، وتكوين الأجسام الجنينية ، وتكوين الأورام المسخية ، وتكوين الكيميرا القابلة للحياة ، والقدرة على التمايز، ولكن لا يزال مدى علاقتها الكاملة بالخلايا الجذعية الطبيعية متعددة القدرات قيد التقييم. [ 1 ]

وُجد أن التعبير الجيني ومستويات H3K4me3 و H3K27me3 على مستوى الجينوم متشابهة للغاية بين الخلايا الجذعية الجنينية (ES) والخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS). [ 57 ] وكانت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات المُستحدثة مشابهة بشكل ملحوظ للخلايا الجذعية متعددة القدرات المعزولة طبيعيًا (مثل الخلايا الجذعية الجنينية للفأر والإنسان، mESCs وhESCs على التوالي) في الجوانب التالية، مما يؤكد هوية الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات وأصالتها وقدرتها على التمايز إلى أنواع مختلفة من الخلايا مقارنةً بالخلايا الجذعية متعددة القدرات المعزولة طبيعيًا:

  • الخصائص البيولوجية الخلوية
    • المورفولوجيا: كانت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) متشابهة مورفولوجيًا مع الخلايا الجذعية الجنينية (ESCs). تميزت كل خلية بشكلها الدائري، ونواة كبيرة، وسيتوبلازم قليل . كما كانت مستعمرات الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات مشابهة لمستعمرات الخلايا الجذعية الجنينية. شكلت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية مستعمرات حادة الحواف، مسطحة، ومتراصة بإحكام، تشبه مستعمرات الخلايا الجذعية الجنينية البشرية، بينما شكلت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات الفأرية مستعمرات مشابهة لمستعمرات الخلايا الجذعية الجنينية الفأرية، أقل تسطحًا وأكثر تكتلًا من مستعمرات الخلايا الجذعية الجنينية البشرية.
    • خصائص النمو: يُعدّ وقت التضاعف والنشاط الانقسامي من الركائز الأساسية للخلايا الجذعية الجنينية، إذ يجب أن تتجدد الخلايا الجذعية ذاتيًا كجزء من تعريفها. وقد أظهرت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات نشاطًا انقساميًا، وتجددًا ذاتيًا فعالًا، وتكاثرًا، وانقسامًا بمعدل مماثل للخلايا الجذعية الجنينية.
    • مؤشرات الخلايا الجذعية: أظهرت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) مؤشرات مستضدية سطحية مماثلة لتلك الموجودة على الخلايا الجذعية الجنينية (ESCs). أظهرت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية مؤشرات خاصة بالخلايا الجذعية الجنينية البشرية، بما في ذلك SSEA-3 وSSEA-4 وTRA-1-60 وTRA-1-81 وTRA-2-49/6E وNanog. أظهرت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات الفأرية SSEA-1 فقط، دون SSEA-3 أو SSEA-4، على غرار الخلايا الجذعية الجنينية الفأرية.
    • جينات الخلايا الجذعية: الجينات المعبر عنها في الخلايا الجذعية الجنينية غير المتمايزة، بما في ذلك Oct-3/4 وSox2 وNanog وGDF3 وREX1 وFGF4 وESG1 وDPPA2 وDPPA4 وhTERT.
    • نشاط التيلوميراز: تُعدّ التيلوميرازات ضرورية لاستمرار انقسام الخلايا دون التقيد بحد هايفليك البالغ حوالي 50 انقسامًا خلويًا. تُظهر الخلايا الجذعية الجنينية البشرية نشاطًا عاليًا للتيلوميراز للحفاظ على التجديد الذاتي والتكاثر، كما تُظهر الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية نشاطًا عاليًا للتيلوميراز وتُعبّر عن إنزيم النسخ العكسي للتيلوميراز البشري (hTERT )، وهو مُكوّن ضروري في مُركّب بروتين التيلوميراز.
  • القدرة على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا: كانت الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات قادرة على التمايز بطريقة مشابهة للخلايا الجذعية الجنينية إلى أنسجة متمايزة تمامًا.
    • التمايز العصبي: تم تحفيز الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) لتتمايز إلى خلايا عصبية ، معبرةً عن بروتينات بيتا-III-توبولين، وهيدروكسيلاز التيروسين، وAADC، وDAT، وChAT، وLMX1B، وMAP2. قد يشير وجود الإنزيمات المرتبطة بالكاتيكولامينات إلى أن الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات، مثل الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs)، قابلة للتمايز إلى خلايا عصبية دوبامينية . وقد انخفض التعبير عن الجينات المرتبطة بالخلايا الجذعية بعد التمايز.
    • التمايز القلبي: تم تحويل الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات إلى خلايا عضلية قلبية بدأت بالنبض تلقائيًا. أظهرت الخلايا العضلية القلبية تعبيرًا عن جينات TnTc وMEF2C وMYL2A وMYHCβ وNKX2.5. وانخفض التعبير عن الجينات المرتبطة بالخلايا الجذعية بعد التمايز.
    • تكوّن الأورام المسخية: بعد حقن الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات في فئران تعاني من نقص المناعة، تكوّنت أورام مسخية تلقائيًا بعد تسعة أسابيع. الأورام المسخية هي أورام متعددة الأنساب تحتوي على أنسجة مشتقة من الطبقات الجرثومية الثلاث: الأديم الباطن ، والأديم المتوسط ، والأديم الظاهر ؛ وهذا يختلف عن الأورام الأخرى التي تتكون عادةً من نوع خلوي واحد فقط. يُعدّ تكوّن الورم المسخي اختبارًا هامًا للقدرة على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا.
    • الجسم الجنيني: تُشكّل الخلايا الجذعية الجنينية البشرية في المزارع الخلوية تلقائيًا تراكيب كروية الشكل تُشبه الأجنة، وتُسمى " الأجسام الجنينية "، وتتكون من نواة من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية النشطة انقساميًا والمتمايزة، ومحيط من خلايا متمايزة تمامًا من الطبقات الجرثومية الثلاث. كما تُشكّل الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات أجسامًا جنينية، ولها خلايا متمايزة محيطية.
    • الفئران الكيميرية: تتواجد الخلايا الجذعية الجنينية البشرية بشكل طبيعي داخل الكتلة الخلوية الداخلية ( الأرومة الجنينية ) للكيسة الأريمية ، وفي هذه الأرومة الجنينية تتمايز لتكوين الجنين، بينما تتمايز قشرة الكيسة الأريمية ( الأرومة المغذية ) لتكوين أنسجة خارج جنينية. لا تستطيع الأرومة المغذية المجوفة تكوين جنين حي، ولذلك من الضروري أن تتمايز الخلايا الجذعية الجنينية الموجودة داخل الأرومة الجنينية لتكوين الجنين. تم حقن الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) بواسطة ماصة دقيقة في الأرومة المغذية، ثم نُقلت الكيسة الأريمية إلى إناث متلقية. نتج عن ذلك صغار فئران كيميرية حية: فئران تحتوي على مشتقات الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات في جميع أنحاء أجسامها بنسبة كيميرية تتراوح بين 10 و90%.
    • استكمال رباعي الصبغيات : يمكن للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) المستخلصة من خلايا ليفية جنينية فأرية، والمحقونة في أكياس جنينية رباعية الصبغيات (والتي لا تستطيع تكوين سوى أنسجة خارج جنينية)، أن تُنتج فئرانًا كاملة غير خيمرية وخصبة، وإن كان ذلك بنسبة نجاح منخفضة. [ 42 ] [ 58 ] [ 59 ] ويمكن تعزيز كفاءة إنتاج الفئران من الخلايا الجذعية متعددة القدرات عن طريق تعريض خط الخلايا الجذعية متعددة القدرات لفترة وجيزة لبلازميد فوق صبغي يحمل جينات Sox2 وKlf4 المُهندسة (مزيج SK). [ 30 ]
  • إعادة البرمجة اللاجينية
    • إزالة مثيلة المحفز: المثيلة هي نقل مجموعة ميثيل إلى قاعدة DNA، وعادةً ما تكون نقل مجموعة ميثيل إلى جزيء سيتوزين في موقع CpG (تسلسل سيتوزين/جوانين متجاور). تعيق المثيلة الواسعة النطاق للجين التعبير الجيني عن طريق منع نشاط بروتينات التعبير، أو عن طريق استقطاب إنزيمات تعيق التعبير. وبالتالي، فإن مثيلة الجين تُسكتُه فعليًا بمنع النسخ. وقد أُزيلت مثيلة محفزات الجينات المرتبطة بتعدد القدرات، بما في ذلك Oct-3/4 وRex1 وNanog، في الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs)، مما يدل على نشاطها كمحفزات وعلى التحفيز النشط والتعبير عن الجينات المرتبطة بتعدد القدرات في هذه الخلايا.
    • مثيلة الحمض النووي على مستوى العالم: تتشابه الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية (iPS) بشكل كبير مع الخلايا الجذعية الجنينية (ES) في أنماط مثيلة السيتوزينات ، أكثر من أي نوع خلوي آخر. ومع ذلك، تُظهر حوالي ألف موقع اختلافات في العديد من سلالات خلايا iPS. نصف هذه المواقع يشبه سلالة الخلايا الجسدية التي اشتُقت منها خلايا iPS، أما النصف الآخر فهو خاص بخلايا iPS. كما تم العثور على عشرات المناطق التي يصل حجمها إلى ميغابايتات حيث لا تتم إعادة برمجة خلايا iPS إلى حالة الخلية الجذعية الجنينية. [ 60 ]
    • إزالة مثيلة الهيستونات: الهيستونات بروتينات مُكثِّفة تتمركز بنيويًا في تسلسلات الحمض النووي، ويمكن أن تؤثر على نشاطها من خلال تعديلات مختلفة متعلقة بالكروماتين. وقد أُزيلت مثيلة هيستونات H3 المرتبطة بـ Oct-3/4 وSox2 وNanog، مما يشير إلى التعبير عن هذه الجينات.

أمان

  • يُعدّ ميل الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) إلى تكوين الأورام مصدر القلق الرئيسي بشأن التطبيق السريري المحتمل لها. [ 61 ] وكما هو الحال مع الخلايا الجذعية الجنينية (ESCs)، تُكوّن الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) أورامًا مسخية بسهولة عند حقنها في فئران تعاني من نقص المناعة. وتعتبر إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) تكوّن الأورام المسخية عقبة رئيسية أمام الطب التجديدي القائم على الخلايا الجذعية.
  • أظهرت دراسة حديثة حول استعادة الوظائف الحركية بعد إصابات الحبل الشوكي في الفئران، أنه بعد زرع الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية في الفئران، تمايزت هذه الخلايا إلى ثلاثة أنواع من الخلايا العصبية في الحبل الشوكي. حفزت هذه الخلايا إعادة نمو الحبل الشوكي المتضرر، وحافظت على عملية التغليف المياليني، وشكلت مشابك عصبية. لوحظت هذه النتائج الإيجابية لأكثر من 112 يومًا بعد إصابة الحبل الشوكي، دون تشكل أورام. [ 62 ] ومع ذلك، أظهرت دراسة متابعة أجرتها المجموعة نفسها أن سلالات متميزة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية شكلت أورامًا في نهاية المطاف. [ 63 ]
  • بما أن إنتاج الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) بكفاءة عالية حاليًا لا يتم إلا باستخدام تعديلات جينية، فمن المتوقع عمومًا أن تكون أقل أمانًا وأكثر قدرة على إحداث الأورام من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs). جميع الجينات التي ثبت أنها تعزز تكوين الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات مرتبطة بالسرطان بشكل أو بآخر. بعض هذه الجينات معروفة بأنها جينات ورمية، بما في ذلك أفراد عائلة Myc. مع أن حذف جين Myc يسمح بتكوين الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات، إلا أن الكفاءة تنخفض بمقدار يصل إلى 100 ضعف.
  • لقد تم إثبات فعالية طريقة غير وراثية لإنتاج الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) باستخدام البروتينات المؤتلفة، إلا أن كفاءتها كانت منخفضة نسبيًا. [ 49 ] ومع ذلك، فإن إدخال تحسينات على هذه المنهجية لرفع كفاءتها قد يؤدي إلى إنتاج خلايا iPSCs أكثر أمانًا. وتُعتبر الطرق الأخرى، مثل استخدام الفيروسات الغدية أو البلازميدات، أكثر أمانًا بشكل عام من الطرق الفيروسية القهقرية.
  • يُعدّ اختبار قدرة الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) على تكوين الأورام بشكل مباشر، باستخدام أساليب تحاكي تلك المستخدمة في علاجات الطب التجديدي، مجالًا هامًا للدراسات المستقبلية في هذا المجال. وتكتسب هذه الدراسات أهمية بالغة نظرًا لأن خلايا iPSCs لا تُكوّن أورامًا مسخية فحسب، بل إن الفئران المُشتقة منها تُعاني أيضًا من ارتفاع معدل الوفيات بسبب السرطان الخبيث. [ 64 ] وقد نُشرت ورقة بحثية عام 2010 في مجلة Stem Cells تُشير إلى أن خلايا iPS أكثر قدرة على تكوين الأورام من الخلايا الجذعية الجنينية (ESCs)، مما يدعم فكرة أن سلامة خلايا iPS تُشكّل مصدر قلق بالغ. [ 65 ]
  • برزت المخاوف بشأن قدرة الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (IPS) على إثارة استجابة مناعية في عام 2011 عندما أجرى تشو وزملاؤه دراسة تضمنت اختبار تكوين الأورام المسخية، وأظهروا أن هذه الخلايا تُنتج استجابة مناعية قوية كافية لرفضها. ومع ذلك، عند تطبيق إجراء مماثل على خلايا جذعية جنينية (ES) مكافئة جينيًا، وجد تشو وزملاؤه أورامًا مسخية ، مما يشير إلى أن الجهاز المناعي يتحمل هذه الخلايا. [ 66 ] في عام 2013، حاول أراكي وزملاؤه إعادة إنتاج النتيجة التي توصل إليها تشو وزملاؤه باستخدام إجراء مختلف. فقد أخذوا خلايا من كائن هجين تم استنباته من مستنسخات الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات وجنين فأر، ثم زُرع هذا النسيج في فئران متوافقة جينيًا . وأجروا تجربة مماثلة باستخدام خلايا ES بدلًا من مستنسخات الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات، وقارنوا النتائج. تشير النتائج إلى عدم وجود فرق يُعتد به إحصائيًا في الاستجابة المناعية التي تُنتجها الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات والخلايا الجذعية الجنينية. علاوة على ذلك، أفاد أراكي وزملاؤه بوجود استجابة مناعية ضئيلة أو معدومة لكلا نوعي الخلايا. [ 67 ] وبالتالي، فإن أراكي وزملاؤه... لم يتمكن من التوصل إلى نفس النتيجة التي توصل إليها تشو وآخرون.

البحوث الطبية

لا تزال مهمة إنتاج الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) تمثل تحديًا نظرًا للمشاكل الست المذكورة أعلاه. ومن أهم المفاضلات التي يجب التغلب عليها المفاضلة بين الكفاءة والتكامل الجيني. فمعظم الطرق التي لا تعتمد على دمج الجينات المنقولة غير فعالة، بينما تواجه الطرق التي تعتمد على دمج الجينات المنقولة مشاكل إعادة البرمجة غير الكاملة وتكوّن الأورام، على الرغم من تجربة عدد كبير من التقنيات والأساليب. ومن الاستراتيجيات المهمة الأخرى إجراء توصيف بروتيني للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات. [ 59 ] ومن المتوقع أن تُسفر المزيد من الدراسات والاستراتيجيات الجديدة عن حلول مثلى للتحديات الخمسة الرئيسية. وقد يسعى أحد المناهج إلى الجمع بين المزايا الإيجابية لهذه الاستراتيجيات في تقنية فعالة في نهاية المطاف لإعادة برمجة الخلايا إلى خلايا جذعية محفزة متعددة القدرات.

ثمة نهج آخر يتمثل في استخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) المستخلصة من المرضى لتحديد الأدوية العلاجية القادرة على استعادة النمط الظاهري. على سبيل المثال، تُظهر سلالات الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات المستخلصة من مرضى متلازمة خلل التنسج الأديمي الظاهر (EEC)، حيث يكون جين p63 متحورًا، التزامًا ظهاريًا غير طبيعي يمكن استعادته جزئيًا بواسطة مركب صغير. [ 68 ]

نمذجة الأمراض وتطوير الأدوية

من الميزات الجذابة للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية (iPS) إمكانية استخلاصها من المرضى البالغين لدراسة الأساس الخلوي للأمراض البشرية. ونظرًا لقدرة هذه الخلايا على التجدد الذاتي والتعددية، فإنها تمثل مصدرًا نظريًا غير محدود للخلايا المستخلصة من المرضى، والتي يمكن تحويلها إلى أي نوع من خلايا الجسم. ويكتسب هذا الأمر أهمية خاصة لأن العديد من أنواع الخلايا البشرية الأخرى المستخلصة من المرضى تتوقف عن النمو بعد بضع دورات في المزارع الخلوية المخبرية. وقد تم إنتاج خلايا iPS لعلاج طيف واسع من الأمراض الوراثية البشرية، بما في ذلك اضطرابات شائعة مثل متلازمة داون ومرض الكلى متعدد الكيسات. [ 69 ] [ 70 ] [ 71 ] وفي كثير من الحالات، تُظهر خلايا iPS المستخلصة من المرضى عيوبًا خلوية لا تُلاحظ في خلايا iPS المستخلصة من الأفراد الأصحاء، مما يُسهم في فهم الفيزيولوجيا المرضية للمرض. [ 72 ] [ 73 ] وفي عام 2012، تم إنشاء مشروع تعاوني دولي، StemBANCC، لإنشاء مجموعة من خطوط خلايا iPS لفحص الأدوية لعلاج مجموعة متنوعة من الأمراض. أشرفت جامعة أكسفورد على هذا الجهد الذي جمع التمويل والموارد من 10 شركات أدوية و23 جامعة. والهدف هو إنشاء مكتبة تضم 1500 سلالة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) لاستخدامها في الاختبارات الدوائية المبكرة من خلال توفير بيئة تحاكي بيئة الأمراض البشرية. [ 74 ] علاوة على ذلك، فإن الجمع بين تقنية الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية (hiPSC) وجزيئات صغيرة أو مؤشرات الجهد والكالسيوم المشفرة جينيًا وفر منصة واسعة النطاق وعالية الإنتاجية لفحص سلامة أدوية القلب والأوعية الدموية. [ 75 ] [ 76 ] [ 77 ] [ 78 ] [ 79 ]

تركيب الأعضاء

أفاد باحثون يابانيون عن إثبات جدوى استخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) لإنتاج أعضاء بشرية لزراعتها . وقد تم استنبات "براعم الكبد " البشرية (iPSC-LBs) من مزيج من ثلاثة أنواع مختلفة من الخلايا الجذعية: خلايا كبدية (لوظائف الكبد) مُستخلصة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات؛ وخلايا جذعية بطانية (لتكوين بطانة الأوعية الدموية ) من دم الحبل السري ؛ وخلايا جذعية لحمية متوسطة (لتكوين النسيج الضام ). يُتيح هذا النهج الجديد لأنواع الخلايا المختلفة تنظيم نفسها ذاتيًا لتكوين عضو معقد، مُحاكيًا بذلك عملية التطور الجنيني . بعد استنباتها في المختبر لبضعة أيام، زُرعت براعم الكبد في فئران، حيث اتصل "الكبد" بسرعة بالأوعية الدموية للمضيف واستمر في النمو. والأهم من ذلك، أنه أدى وظائف الكبد الطبيعية، بما في ذلك استقلاب الأدوية وإنتاج البروتينات الخاصة بالكبد. ستُراقب الدراسات اللاحقة مدى بقاء العضو المزروع في جسم المضيف (قدرته على الاندماج أو تجنب الرفض ) وما إذا كان سيتحول إلى أورام . [ 80 ] [ 81 ]

تجديد الأعضاء

في عام 2021، تم إثبات فعالية نهج إعادة برمجة عوامل ياماناكا القابلة للتحويل في تجديد القلب المتضرر دون تكوين أورام في الفئران، وقد نجح هذا النهج عند إجراء التدخل مباشرة قبل أو بعد الإصابة بنوبة قلبية. [ 82 ] وفي عام 2020، أجرت اليابان أول عملية زرع لخلايا قلبية مُستنبتة مخبرياً في مريض بشري. [ 83 ]

إصلاح الأنسجة

تم تحفيز خلايا دم الحبل السري الجنينية لتصبح خلايا جذعية متعددة القدرات باستخدام الحمض النووي البلازميدي. وباستخدام المؤشرات السطحية للخلايا البطانية/المحيطة بالخلايا CD31 و CD146 ، حدد الباحثون "الخلايا السلفية الوعائية"، وهي خلايا جذعية وعائية عالية الجودة ومتعددة القدرات. بعد حقن الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات مباشرة في الجسم الزجاجي لشبكية العين المتضررة لدى الفئران، اندمجت الخلايا الجذعية في الشبكية، ونمت، وأصلحت الأوعية الدموية . [ 84 ] [ 85 ]

أظهرت الدراسات أن الخلايا الجذعية العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات والموسومة، والتي تم حقنها في حيوانات المختبر المصابة بآفات دماغية، تهاجر إلى مناطق الآفات، كما لوحظ تحسن طفيف في الوظائف الحركية. [ 86 ]

خلايا عضلة القلب

يمكن إنتاج خلايا عضلة القلب النابضة، أو خلايا عضلة القلب المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSC)، بكميات كبيرة باستخدام بروتوكولات تمايز محددة كيميائيًا. [ 87 ] [ 88 ] وتقوم هذه البروتوكولات عادةً بتعديل مسارات الإشارات التنموية نفسها اللازمة لنمو القلب . [ 89 ] ويمكن لخلايا عضلة القلب المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات هذه محاكاة اضطرابات النظم الوراثية واستجابات القلب للأدوية، نظرًا لأنها تُظهر نفس الخلفية الجينية للمريض الذي اشتُقت منه. [ 90 ] [ 91 ] [ 92 ] [ 93 ]

في يونيو 2014، حصلت شركة تاكارا بيو على نقل التكنولوجيا من شركة آي هارت جابان، وهي شركة ناشئة تابعة لمعهد أبحاث الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات بجامعة كيوتو، ما مكّنها من استخدام التقنيات وبراءات الاختراع التي تحفز تمايز الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات إلى خلايا عضلة القلب بشكل حصري في آسيا. وأعلنت الشركة عن فكرة بيع خلايا عضلة القلب لشركات الأدوية والجامعات للمساعدة في تطوير أدوية جديدة لأمراض القلب. [ 94 ]

في التاسع من مارس/آذار 2018، وافقت لجنة الطب التجديدي المتخصصة بجامعة أوساكا رسميًا على أول خطة بحثية سريرية في العالم لزراعة "صفيحة عضلية قلبية" مصنوعة من خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات في قلب مرضى قصور القلب الحاد. وأعلنت جامعة أوساكا أنها قدمت طلبًا إلى وزارة الصحة والعمل والرفاهية في اليوم نفسه.

في 16 مايو 2018، تمت الموافقة على خطة البحث السريري من قبل فريق الخبراء التابع لوزارة الصحة والعمل والرعاية الاجتماعية بشرط معين. [ 95 ] [ 96 ]

في أكتوبر 2019، قام فريق في جامعة أوكاياما بتطوير نموذج لمرض القلب الإقفاري باستخدام خلايا عضلة القلب المتمايزة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات. [ 97 ]

خلايا الدم الحمراء

على الرغم من أن نصف لتر من الدم المتبرع به يحتوي على حوالي تريليوني خلية دم حمراء، ويتم جمع أكثر من 107 ملايين تبرع بالدم على مستوى العالم، إلا أن الحاجة إلى الدم لنقله لا تزال قائمة. في عام 2014، تم تصنيع خلايا الدم الحمراء من فصيلة O في خدمة نقل الدم الوطنية الاسكتلندية باستخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSC). حُفزت هذه الخلايا لتصبح خلايا أديم متوسط ، ثم خلايا دم ، ثم خلايا دم حمراء. تمثلت الخطوة الأخيرة في جعلها تتخلص من نواتها وتنضج بشكل سليم. يمكن نقل فصيلة O إلى جميع المرضى. لم يكن من المتوقع بدء التجارب السريرية على البشر قبل عام 2016. [ 98 ]

التجارب السريرية

وافقت وزارة الصحة اليابانية على أول تجربة سريرية بشرية باستخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات الذاتية، وكان من المقرر إجراؤها في عام 2014 في مركز ريكين لبيولوجيا النمو في كوبي . إلا أن التجربة عُلّقت بعد دخول قوانين الطب التجديدي الجديدة في اليابان حيز التنفيذ في نوفمبر 2015. [ 99 ] وبشكل أكثر تحديدًا، جرى تعزيز مجموعة من الإرشادات القائمة لتصبح ملزمة قانونًا (بعد أن كانت مجرد توصيات). [ 100 ] أُعيد برمجة الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات، المشتقة من خلايا جلدية لستة مرضى مصابين بالتنكس البقعي الرطب المرتبط بالعمر، لتتمايز إلى خلايا ظهارة الصباغ الشبكية (RPE). وكان من المقرر زرع طبقة الخلايا في الشبكية المصابة بعد استئصال نسيج ظهارة الصباغ الشبكية المتدهور. وكان من المقرر أن تستمر مراقبة السلامة واستعادة البصر من سنة إلى ثلاث سنوات. [ 101 ] [ 102 ]

في مارس 2017، نجح فريق بقيادة ماسايو تاكاهاشي في أول عملية زرع ناجحة لخلايا شبكية مشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPS) من متبرع إلى عين شخص مصاب بالتنكس البقعي المتقدم. [ 103 ] ومع ذلك، أفيد بوجود مضاعفات حاليًا. [ 104 ] تتمثل فوائد استخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات الذاتية في انعدام خطر الرفض نظريًا ، وفي الاستغناء عن استخدام الخلايا الجذعية الجنينية. إلا أن هذه الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات مشتقة من شخص آخر. [ 102 ]

تُجرى حاليًا تجارب سريرية جديدة تتضمن استخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) ليس فقط في اليابان، بل أيضًا في الولايات المتحدة وأوروبا. [ 105 ] وقد حدد بحث أُجري عام 2021 على سجل التجارب السريرية Clinicaltrials.gov 129 تجربة سريرية تتضمن ذكرًا للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات، إلا أن معظمها لم يكن تدخليًا. [ 106 ]

في عام 2026، أوصى مجلس الشؤون الصيدلانية الياباني وزارة الصحة والعمل والرفاهية بتمديد الموافقة المشروطة على منتجين علاجيين قائمين على الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من متبرعين، وهما Amchepry لعلاج مرض باركنسون وReHeart لعلاج قصور القلب الحاد. [ 107 ]

استراتيجية للحصول على خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات عالمية

لجعل تقنيات الطب التجديدي القائمة على الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات (iPSCs) متاحة لعدد أكبر من المرضى، من الضروري ابتكار خلايا iPSCs شاملة يمكن زرعها بغض النظر عن النمط الفرداني لمستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) . تتمثل الاستراتيجية الحالية لابتكار هذه الخلايا في هدفين رئيسيين: إزالة التعبير عن مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) ومنع هجمات الخلايا القاتلة الطبيعية (NK) الناتجة عن حذف هذه المستضدات. وقد أُفيد بأن حذف جيني B2M و CIITA باستخدام نظام CRISPR/Cas9 يثبط التعبير عن مستضدات الكريات البيضاء البشرية من الفئتين الأولى والثانية على التوالي. ولتجنب هجمات الخلايا القاتلة الطبيعية، استُخدم نقل جزيئات مثبطة لهذه الخلايا، مثل HLA-E و CD47 . [ 108 ] ويُترك مستضد الكريات البيضاء البشرية من الفئة C دون تغيير، لأن الأليلات الـ 12 الشائعة منه كافية لتغطية 95% من سكان العالم. [ 108 ]

خصائص مضادة للشيخوخة

تُبشّر الخلايا الجذعية اللحمية المتوسطة متعددة القدرات، عند تحفيزها على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا، بإمكانية كبيرة لإبطاء أو عكس مظاهر الشيخوخة. وقد أُثبتت هذه الخصائص المضادة للشيخوخة في تجارب سريرية مبكرة عام 2017. [ 109 ] وفي عام 2020، خلص باحثون من جامعة ستانفورد ، بعد دراسة فئران مسنة، إلى أن الخلايا البشرية المسنة، عند تعريضها لعوامل ياماناكا، قد تتجدد وتصبح شبه غير قابلة للتمييز عن نظيراتها الأصغر سنًا. [ 110 ]

الخلايا الجذعية متعددة القدرات منخفضة المناعة

استعرضت دراسة نُشرت عام ٢٠٢٥ تطوير الخلايا الجذعية متعددة القدرات منخفضة المناعة (hPSCs) باستخدام تقنيات متقدمة لتحرير الجينوم، بهدف تقليل خطر الرفض المناعي في العلاج الخلوي الخيفي. تُهندس هذه الخلايا بحيث تفتقر إلى التعبير عن جزيئات معقد التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) من الفئتين الأولى والثانية، مع التعبير عن جينات مُعدِّلة للمناعة مثل PD-L1 وCD47 وHLA-G. يعزز هذا المزيج التهرب المناعي ويدعم مفهوم الخلايا المانحة العامة التي لا تتطلب مطابقة مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). كما يُعزز دمج أنظمة الجينات الانتحارية، مثل كاسبيز-٩ المُحفَّز، السلامة من خلال تمكين الإزالة الانتقائية للخلايا في حالة الإصابة بالورم الخبيث. تهدف هذه الاستراتيجيات إلى تحسين سلامة العلاجات التجديدية وقابليتها للتوسع وإمكانية الوصول إليها. [ ١١١ ]

انظر أيضاً

مراجع

  1. ١ ٢ ٣ ٤ تاكاهاشي ك، ياماناكا س (أغسطس ٢٠٠٦). "تحفيز الخلايا الجذعية متعددة القدرات من مزارع الخلايا الليفية الجنينية والبالغة للفئران بواسطة عوامل محددة" . الخلية . ١٢٦ (٤): ٦٦٣-٧٦ . doi : 10.1016/j.cell.2006.07.024 . hdl : 2433/159777 . PMID 16904174 . أيقونة الوصول المفتوح
  2. ↑ "جائزة نوبل في الطب أو علم وظائف الأعضاء - بيان صحفي لعام 2012" . نوبل ميديا ​​إيه بي. 8 أكتوبر 2012.
  3. ↑ مهلا ، ر. س. (2016). "تطبيقات الخلايا الجذعية في الطب التجديدي وعلاج الأمراض" . المجلة الدولية لبيولوجيا الخلية . 2016 6940283. doi : 10.1155/2016/6940283 . PMC 4969512. PMID 27516776 .  
  4. ↑ كليمانسكايا، إي.، تشونغ، واي.، بيكر، إس.، لو، إس. جيه.، لانزا، آر. (نوفمبر 2006). "خطوط الخلايا الجذعية الجنينية البشرية المشتقة من خلايا بلاستوميرية مفردة". مجلة نيتشر . 444 (7118): 481-485 . Bibcode : 2006Natur.444..481K . doi : 10.1038/nature05142 . PMID: 16929302. S2CID : 84792371 .  
  5. ↑ هوكيمير د، جانيش ر (مايو 2016). "الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات تلتقي بتحرير الجينوم" . خلية جذعية . 18 (5): 573-86 . doi : 10.1016/j.stem.2016.04.013 . PMC 4871596. PMID 27152442 .  
  6. ↑ " 「 i 」PSなぜ小文字？ 山中さんってどんな人？" . 8 أكتوبر 2012 مؤرشفة من الأصلي في 21 نوفمبر 2012 . تم الاسترجاع 27 أبريل 2013 .
  7. ↑ "万能なiPS細胞「iPodのように普及してほしい」" .スポーツニッポン. 9 أكتوبر 2012 . تم الاسترجاع 14 أكتوبر 2012 .
  8. ↑ """""""""""""""""""""""""""""""""""" " جي كاستニュ ス. 9 أكتوبر 2012 . تم الاسترجاع 28 أبريل 2013 .
  9. ^ Eguizabal C، Aran B، Chuva de Sousa Lopes SM، Geens M، Heindryckx B، Panula S، Popovic M، Vassena R، Veiga A (2019). "عقدين من الخلايا الجذعية الجنينية: نظرة تاريخية" . التكاثر البشري مفتوح . 2019 (1) هوي024. دوى : 10.1093/هروبن/hoy024 . بمك 6396646 . بميد 30895264 .  
  10. ↑ ياماناكا س (ديسمبر 2013). "الطريق الملتوي نحو القدرة على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا (محاضرة نوبل)". Angewandte Chemie . 52 (52): 13900–9 . Bibcode : 2013ACIE...5213900Y . doi : 10.1002/anie.201306721 . PMID 24255017 . 
  11. ↑ غو إكس إل، تشين جيه إس (2015). "بحث حول الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات وتطبيقها في أنسجة العين" . المجلة الدولية لطب العيون . 8 (4): 818-25 . doi : 10.3980/j.issn.2222-3959.2015.04.31 . PMC 4539634. PMID 26309885 .  
  12. ↑ ثورنتون، كريستوفر د.؛ فيلدينغ، ستيوارت؛ كاربونيتشيك، كينغا؛ رويغ-ميرينو، أليسيا؛ بوروز، أليشا إي.؛ فيتزباتريك، لورنا م.؛ شاريره، أسيل؛ تايت، جون ب.؛ مول، سارة إي.؛ هاربوتل، ريتشارد ب.؛ كابروني، ليزا ج.؛ مكاي، تريستان ر. (10 ديسمبر 2021). "توليد آمن ومستقر للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات باستخدام نواقل الحمض النووي من نوع دوغي بون" . العلاج الجزيئي - الأساليب والتطوير السريري . 23 : 348-358 . doi : 10.1016/j.omtm.2021.09.018 . ISSN 2329-0501 . PMC 8546411. PMID 34729381 .   
  13. ↑ أوكيتا ك، إيتشيزاكا ت، ياماناكا س (يوليو 2007). "توليد خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات قادرة على التمايز إلى خلايا جرثومية". مجلة نيتشر . 448 (7151): 313-317 . Bibcode : 2007Natur.448..313O . doi : 10.1038/nature05934 . PMID 17554338. S2CID 459050 .  
  14. ↑ فيرنيغ م، مايسنر أ، فورمان ر، برامبرينك ت، كو م، هوشيدلينغر ك، وآخرون (يوليو 2007). "إعادة برمجة الخلايا الليفية في المختبر إلى حالة شبيهة بالخلايا الجذعية الجنينية متعددة القدرات". نيتشر . 448 ( 7151): 318-324 . Bibcode : 2007Natur.448..318W . doi : 10.1038/nature05944 . PMID 17554336. S2CID 4377572 .   
  15. ↑ ماهرالي ن، سريدهاران ر، شي و، أوتيكال ج، إمينلي س، أرنولد ك، وآخرون (يونيو 2007). "تُظهر الخلايا الليفية المُعاد برمجتها مباشرةً إعادة تشكيل جيني شامل ومساهمة نسيجية واسعة النطاق" . خلية جذعية . 1 (1): 55-70 . doi : 10.1016/j.stem.2007.05.014 . PMID 18371336 .  
  16. ↑ "أجيال الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات والمراجع ذات الصلة" . مؤرشف من الأصل في 30 يونيو 2018. تم الاطلاع عليه في 5 نوفمبر 2007 .
  17. ↑ تاكاهاشي ك، تانابي ك، أونوكي م، ناريتا م، إيتشيزاكا ت، تومودا ك، ياماناكا س (نوفمبر 2007). "تحفيز الخلايا الجذعية متعددة القدرات من الخلايا الليفية البشرية البالغة بواسطة عوامل محددة" . مجلة Cell . 131 (5): 861-872 . doi : 10.1016/j.cell.2007.11.019 . hdl : 2433/49782 . PMID 18035408 . 
  18. يو جيه ، فوديانيك إم إيه، سموغا-أوتو كيه، أنتوسيفيتش-بورجيه جيه، فران جيه إل، تيان إس، وآخرون . (ديسمبر 2007). "سلالات الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات المشتقة من الخلايا الجسدية البشرية". مجلة ساينس . 318 (5858): 1917-20 . رمز Bibcode : 2007Sci...318.1917Y . doi : 10.1126/science.1151526 . PMID 18029452. S2CID 86129154 .   
  19. 1 2 3 ياماناكا س (يوليو 2010). "الخلايا الجذعية متعددة القدرات الخاصة بالمريض أصبحت أكثر سهولة في الوصول إليها" . خلية جذعية . 7 (1): 1-2 . doi : 10.1016/j.stem.2010.06.009 . PMID 20621038 . 
  20. 1 2 ماهرالي ن، هوشيدلينجر ك (ديسمبر 2008). "إرشادات وتقنيات لتوليد الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات" . خلية جذعية . 3 (6): 595-605 . doi : 10.1016/j.stem.2008.11.008 . PMID 19041776 . 
  21. ↑ ماهرالي ن، أهفيلدت ت، ريغامونتي أ، أوتيكال ج، كوان س، هوشيدلينجر ك (سبتمبر 2008). " نظام عالي الكفاءة لتوليد ودراسة الخلايا الجذعية البشرية المستحثة متعددة القدرات" . خلية جذعية . 3 (3): 340-345 . doi : 10.1016/j.stem.2008.08.003 . PMC 3987901. PMID 18786420 .  
  22. ↑ آسن تي، رايا إيه، باريرو إم جيه، غاريتا إي، كونسيلو إيه، غونزاليس إف، وآخرون . (نوفمبر 2008). "توليد فعال وسريع للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من الخلايا الكيراتينية البشرية". مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 26 (11): 1276-1284 . doi : 10.1038/nbt.1503 . PMID 18931654. S2CID 205274019 .   
  23. ↑ ستارك ج، دولاتي م م، غاو كيو، ميتزل د، حنا ج، سومر سي أ، وآخرون . (يوليو 2010). " إعادة برمجة خلايا الدم المحيطية البشرية إلى خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات" . خلية جذعية . 7 (1): 20-24 . doi : 10.1016/j.stem.2010.06.002 . PMC 2917234. PMID 20621045 .   
  24. ↑ لوه واي إتش، هارتونغ أو، لي إتش، غو سي، ساهالي جيه إم، مانوس بي دي، وآخرون . (يوليو 2010). " إعادة برمجة الخلايا التائية من الدم المحيطي البشري" . خلية جذعية . 7 (1): 15-19 . doi : 10.1016/j.stem.2010.06.004 . PMC 2913590. PMID 20621044 .   
  25. ↑ تشو تي، بيندا سي، دونزينجر إس، هوانغ واي، هو جي سي، يانغ جي، وآخرون . (ديسمبر 2012). "توليد الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية من عينات البول". بروتوكولات الطبيعة . 7 (12): 2080-2089 . doi : 10.1038/nprot.2012.115 . PMID 23138349. S2CID 205465442 .   
  26. ↑ بولو جيه إم، ليو إس، فيغيروا إم إي، كولاليرت دبليو، إمينلي إس، تان كي واي، وآخرون . (أغسطس 2010). "نوع الخلية الأصلية يؤثر على الخصائص الجزيئية والوظيفية للخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات في الفئران" . مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 28 (8): 848-855 . doi : 10.1038/nbt.1667 . PMC 3148605. PMID 20644536 .   
  27. ↑ شتاتفيلد، م.؛ هوشيدلينجر، ك. (2010). " القدرات المتعددة المستحثة: التاريخ والآليات والتطبيقات" . الجينات والتطور . 24 (20): 2239-2263 . doi : 10.1101/gad.1963910 . PMC 2956203. PMID 20952534 .  
  28. ↑ فيليتشكو إس، أداتشي ك، كيم كيه بي، هو واي، ماكارثي سي إم، وو جي، شولر إتش آر (ديسمبر 2019). "استبعاد Oct4 من كوكتيل ياماناكا يُطلق العنان للإمكانات التطورية للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات" . خلية جذعية . 25 (6): 737-753.e4. doi : 10.1016/j.stem.2019.10.002 . PMC 6900749. PMID 31708402 .  
  29. ↑ يتم تحسين جودة الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات بشكل كبير عن طريق حذف ما كان يُعتقد أنه عامل إعادة البرمجة الأكثر أهمية Oct4، فهو ليس غير ضروري فحسب، بل إنه ضار أثناء توليد الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات في الفئران (iPSCs).
  30. 1 2 3 ماكارثي، كيتلين م.؛ وو، قوانغمينغ. مالك، فيكاس؛ منوشين-لاسوفسكي، يوتام؛ فيليشكو، تاراس؛ كيشيت، غال؛ فان، روي؛ بيدجوف، إيفان؛ الكنيسة، جورج م.؛ جاوتش، رالف. كوجوكارو، فلاد. شولر، هانز ر. فيليشكو ، سيرجي (ديسمبر 2023). "إن تقنية Super-SOX الخيمرية شديدة التعاون تحث على تعدد القدرات الساذجة عبر الأنواع" . الخلية الجذعية . 31 (1): 127-147.هـ9. دوى : 10.1016/j.stem.2023.11.010 . بميد 38141611 . 
  31. ↑ علي، ب.س.، غوشداستيدر، أ.، هوفمان، ج.، بروتشي، ب.، فيليبك، س. (نوفمبر 2012). " التعرف على طليعة miRNA let-7g بواسطة Lin28B البشري" . رسائل FEBS . 586 (22): 3986-90 . Bibcode : 2012FEBSL.586.3986S . doi : 10.1016/j.febslet.2012.09.034 . PMID 23063642. S2CID 28899778 .  
  32. ↑ مايكاوا م، ياماغوتشي ك، ناكامورا ت، شيبوكاوا ر، كوداناكا إ، إيتشيزاكا ت، وآخرون (يونيو 2011). " يعزز عامل النسخ الأمومي Glis1 إعادة برمجة الخلايا الجسدية مباشرةً". مجلة نيتشر . 474 (7350): 225-229 . doi : 10.1038/nature10106 . hdl : 2433/141930 . PMID 21654807. S2CID 4428172 .   
  33. ↑ لو م، لينغ ت، شي و، صن ه، تشو ي، تشو كيو، وآخرون (يوليو 2013). "يمنع NuRD إعادة برمجة الخلايا الجسدية للفئران إلى خلايا جذعية متعددة القدرات". الخلايا الجذعية . 31 (7): 1278-1286 . doi : 10.1002/stem.1374 . hdl : 10397/18487 . PMID 23533168. S2CID 206512562 .   
  34. ↑ رايس ي، زفيران أ، جيولا س، غافني أ، تشومسكي إ، فيوكوف س، وآخرون . (أكتوبر 2013). "إعادة برمجة مباشرة حتمية للخلايا الجسدية إلى حالة التعددية الخلوية". نيتشر . 502 (7469): 65-70 . Bibcode : 2013Natur.502...65R . doi : 10.1038/ nature12587 . PMID 24048479. S2CID 4386833 .   
  35. ↑ سيلفاراج، في.، بلين، ج. م.، ويليامز، أ. ج.، دينغ، و. (أبريل 2010). " تغيير مصير الخلية: الصعود الملحوظ للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات وتقنيات إعادة برمجة السلالة" . اتجاهات في التكنولوجيا الحيوية . 28 (4): 214-223 . doi : 10.1016/j.tibtech.2010.01.002 . PMC 2843790. PMID 20149468 .  
  36. 1 2 أوكيتا ك، ناكاغاوا م، هينجونغ ه، إيتشيساكا ت، ياماناكا س (نوفمبر 2008). "توليد خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات في الفئران بدون نواقل فيروسية" . مجلة ساينس . 322 (5903): 949-953 . Bibcode : 2008Sci...322..949O . doi : 10.1126/science.1164270 . PMID 18845712. S2CID 23735743 .  
  37. ↑ شتاتفيلد م، ناغايا م، أوتيكال ج، وير ج، هوشيدلينجر ك (نوفمبر 2008). "الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات المُولَّدة دون دمج فيروسي" . مجلة ساينس . 322 (5903): 945-949 . Bibcode : 2008Sci...322..945S . doi : 10.1126/science.1162494 . PMC 3987909. PMID 18818365 .  
  38. ↑ وولتيجن ك، مايكل آي بي، محسني ب، ديساي ر، ميليكوفسكي م، هامالاينن ر، وآخرون (أبريل 2009). " نقل جين piggyBac يعيد برمجة الخلايا الليفية إلى خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات" . مجلة نيتشر . 458 (7239): 766-770 . Bibcode : 2009Natur.458..766W . doi : 10.1038/nature07863 . PMC 3758996. PMID 19252478 .   
  39. ↑ كابلان ك (6 مارس 2009). "علماء يقولون إن خطر الإصابة بالسرطان قد زال من الخلايا الجذعية" . لوس أنجلوس تايمز .
  40. ↑ سواميناثان ن (30 نوفمبر 2007). "الخلايا الجذعية - هذه المرة بدون السرطان" . أخبار ساينتفك أمريكان . تم الاسترجاع في 11 ديسمبر 2007 .
  41. ↑ ماريون آر إم، ستراتي كيه، لي إتش، مورغا إم، بلانكو آر، أورتيغا إس، وآخرون . (أغسطس 2009). "استجابة تلف الحمض النووي بوساطة البروتين p53 تحد من إعادة البرمجة لضمان سلامة الجينوم في الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات" . مجلة نيتشر . 460 (7259): 1149-1153 . Bibcode : 2009Natur.460.1149M . doi : 10.1038/nature08287 . PMC 3624089. PMID 19668189 .   
  42. 1 2 تشاو إكس واي، لي دبليو، ليف زد، ليو إل، تونغ إم، هاي تي، وآخرون . (سبتمبر 2009). "خلايا iPS تنتج فئرانًا قابلة للحياة من خلال استكمال رباعي الصبغيات". نيتشر . 461 ( 7260): 86-90 . Bibcode : 2009Natur.461...86Z . doi : 10.1038/nature08267 . PMID 19672241. S2CID 205217762 .   
  43. ↑ هوانغفو د، ماهر ر، غو و، إيكيلنبوم أ، سنيتو م، تشين أ.إ، ميلتون د.أ (يوليو 2008). "تحسين تحفيز الخلايا الجذعية متعددة القدرات بواسطة عوامل محددة بشكل كبير باستخدام مركبات جزيئية صغيرة" . مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 26 (7): 795-797 . doi : 10.1038/nbt1418 . PMC 6334647. PMID 18568017 .  
  44. 1 2 شي واي، ديسبونتس سي، دو جيه تي، هام إتش إس، شولر إتش آر، دينغ إس (نوفمبر 2008). "تحفيز الخلايا الجذعية متعددة القدرات من الخلايا الليفية الجنينية للفأر بواسطة Oct4 وKlf4 باستخدام مركبات جزيئية صغيرة" . خلية جذعية . 3 (5): 568-74 . doi : 10.1016/j.stem.2008.10.004 . PMID 18983970 . 
  45. ↑ سيرانوسكي د (18 يوليو 2013). "إعادة برمجة الخلايا الجذعية باستخدام المواد الكيميائية فقط" . أخبار الطبيعة . doi : 10.1038/nature.2013.13416 . S2CID 88247014. تاريخ الاسترجاع: 22 يوليو 2013 . 
  46. ↑ هو ب، لي ي، تشانغ إكس، ليو سي، غوان ج، لي إتش، وآخرون . (أغسطس 2013). "الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة من الخلايا الجسدية للفئران بواسطة مركبات جزيئية صغيرة". مجلة ساينس . 341 (6146): 651-654 . Bibcode : 2013Sci...341..651H . doi : 10.1126/science.1239278 . PMID 23868920. S2CID 45685692 .   
  47. ↑ "خطوة هامة في إنتاج خلايا جذعية أفضل من أنسجة البالغين" . ساينس ديلي . 19 أكتوبر 2009. تم الاطلاع عليه بتاريخ 30 سبتمبر 2013 .
  48. ↑ لين تي، أمباسودان آر، يوان إكس، لي دبليو، هيلكوف إس، أبوجرور آر، وآخرون . (نوفمبر 2009). "منصة كيميائية لتحسين تحفيز الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية" . نيتشر ميثودز . 6 (11): 805-808 . doi : 10.1038/nmeth.1393 . PMC 3724527. PMID 19838168 .   
  49. 1 2 Zhou H, Wu S, Joo JY, Zhu S, Han DW, Lin T, et al. (مايو 2009). "توليد الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات باستخدام البروتينات المؤتلفة" . Cell Stem Cell . 4 (5): 381–4 . doi : 10.1016/j.stem.2009.04.005 . PMC 10182564. PMID 19398399 .   
  50. ↑ تشو و، فريد سي آر (نوفمبر 2009). " يمكن لتوصيل الجينات باستخدام الفيروسات الغدية إعادة برمجة الخلايا الليفية البشرية إلى خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات" . الخلايا الجذعية . 27 (11): 2667-74 . doi : 10.1002/stem.201 . PMID 19697349. S2CID 41418742 .  
  51. ↑ ديفيد سيرانوسكي لمجلة نيتشر نيوز. ٢٩ يناير ٢٠١٤: حمام حمضي يوفر مسارًا سهلاً للخلايا الجذعية
  52. ↑ تريسي فينس لمجلة ساينتست. 11 مارس 2014 دعوة لسحب مقالات STAP
  53. ↑ لايز إي (4 يونيو 2014). "باحث ياباني يوافق على سحب ورقة بحثية مثيرة للجدل حول الخلايا الجذعية" . رويترز . تم الاطلاع عليه بتاريخ 4 يونيو 2014 .
  54. ↑ بيان صحفي (1 أبريل 2014). "تقرير عن التحقيق في ورقة بحثية حول خلايا STAP" . معهد ريكين . تم الاطلاع عليه في 2 يونيو 2014 .
  55. باو إكس، تشو إكس، لياو بي، بيندا سي، تشوانغ كيو، باي دي، وآخرون (أبريل 2013). "الميكرو آر إن إيه في إعادة برمجة الخلايا الجسدية". الرأي الحالي في بيولوجيا الخلية . 25 ( 2): 208-214 . doi : 10.1016/j.ceb.2012.12.004 . PMID 23332905 .  
  56. ↑ جودسون آر إل، بابيارز جيه إي، فينير إم، بليلوخ آر (مايو 2009). "تعزز الميكرو آر إن إيه الخاصة بالخلايا الجذعية الجنينية القدرة على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا" . مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 27 (5): 459-461 . doi : 10.1038/nbt.1535 . PMC 2743930. PMID 19363475 .  
  57. ↑ غونتر إم جي، فرامبتون جي إم، سولدنر إف، هوكيمير دي، ميتاليبوفا إم، جانيش آر، يونغ آر إيه (أغسطس 2010). " بنية الكروماتين وبرامج التعبير الجيني للخلايا الجذعية الجنينية البشرية والخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات" . خلية جذعية . 7 (2): 249-257 . doi : 10.1016/j.stem.2010.06.015 . PMC 3010384. PMID 20682450 .  
  58. ↑ كانغ إل، وانغ جيه، تشانغ واي، كو زد، غاو إس (أغسطس 2009). "يمكن للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات دعم النمو الكامل للأجنة المكملة بالكيسة الأريمية رباعية الصيغة الصبغية" . خلية جذعية . 5 (2): 135-138 . doi : 10.1016/j.stem.2009.07.001 . PMID 19631602 . 
  59. 1 2 بولاند إم جيه، هازن جيه إل، نازور كيه إل، رودريغيز إيه آر، جيفورد دبليو، مارتن جي، وآخرون . (سبتمبر 2009). "فئران بالغة مُستحدثة من خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات". نيتشر . 461 (7260): 91-94 . Bibcode : 2009Natur.461...91B . doi : 10.1038/ nature08310 . PMID 19672243. S2CID 4423755 .   
  60. ↑ ليستر ر، بيليتزولا م، كيدا ي س، هوكينز ر د، نيري ج ر، هون ج، وآخرون . (مارس 2011). " بؤر إعادة البرمجة الجينية الشاذة في الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية" . نيتشر . 471 (7336): 68-73 . Bibcode : 2011Natur.471...68L . doi : 10.1038/nature09798 . PMC 3100360. PMID 21289626 .   
  61. ↑ كنوبفلر، بي إس (مايو 2009). "تفكيك قدرة الخلايا الجذعية على إحداث الأورام : خارطة طريق للطب التجديدي الآمن" . الخلايا الجذعية . 27 (5): 1050-1056 . doi : 10.1002/stem.37 . PMC 2733374. PMID 19415771 .  
  62. ↑ نوري إس، أوكادا واي، ياسودا إيه، تسوجي أو، تاكاهاشي واي، كوباياشي واي، وآخرون . (أكتوبر 2011). "تعزيز استعادة الوظائف الحركية بعد إصابة الحبل الشوكي في الفئران من خلال زراعة الخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 108 (40): 16825-30 . Bibcode : 2011PNAS..10816825N . doi : 10.1073/pnas.1108077108 . PMC 3189018. PMID 21949375 .   
  63. ↑ نوري إس، أوكادا واي، نيشيمورا إس، ساساكي تي، إيتاكورا جي، كوباياشي واي، وآخرون (مارس 2015). "قضايا السلامة طويلة الأمد للعلاج الخلوي القائم على الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات في نموذج إصابة الحبل الشوكي: التحول السرطاني مع الانتقال الظهاري-اللحمي" . تقارير الخلايا الجذعية . 4 (3): 360-373 . doi : 10.1016/j.stemcr.2015.01.006 . PMC 4375796. PMID 25684226 .   
  64. ↑ آوي تي، ياي كيه، ناكاغاوا إم، إيتشيزاكا تي، أوكيتا كيه، تاكاهاشي كيه، وآخرون . (أغسطس 2008). "توليد الخلايا الجذعية متعددة القدرات من خلايا كبد ومعدة الفئران البالغة". مجلة ساينس . 321 (5889): 699-702 . Bibcode : 2008Sci...321..699A . doi : 10.1126/science.1154884 . hdl : 2433/124215 . PMID 18276851. S2CID 52869734 .   
  65. ↑ غوتيريز-أراندا، إي.، راموس-ميجيا، في.، بوينو، سي.، مونوز-لوبيز، إم.، ريال، بي. جيه.، ماسيا، إيه.، وآخرون . (سبتمبر 2010). "تُطوّر الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية أورامًا مسخيةً بكفاءةٍ وسرعةٍ أكبر من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية بغض النظر عن موقع الحقن" . الخلايا الجذعية . 28 (9): 1568-1570 . doi : 10.1002/stem.471 . PMC 2996086. PMID 20641038 .   
  66. ↑ تشاو تي، تشانغ زد إن، رونغ زد، شو واي (مايو 2011). "الاستجابة المناعية للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات". نيتشر . 474 (7350): 212-215 . CiteSeerX 10.1.1.864.8029 . doi : 10.1038/nature10135 . PMID 21572395. S2CID 4416964 .   
  67. ↑ أراكي ر، أودا م، هوكي ي، سوناياما م، ناكامورا م، أندو س، وآخرون (فبراير 2013). "مناعة ضئيلة للخلايا المتمايزة نهائيًا والمشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات أو الخلايا الجذعية الجنينية". نيتشر . 494 ( 7435): 100-104 . Bibcode : 2013Natur.494..100A . doi : 10.1038/nature11807 . PMID 23302801. S2CID 205232231 .   
  68. ↑ شالوم-فويرشتاين ر، سيرور ل، أبردام إي، مولر إف جيه، فان بوخوفن هـ، ويمَن كيه جي، وآخرون . (فبراير 2013). "يُعالج المركب الصغير APR-246/PRIMA-1MET ضعف التمايز الظهاري للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من مرضى خلل التنسج الأديمي الظاهر" . وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية . 110 (6): 2152-2156 . Bibcode : 2013PNAS..110.2152S . doi : 10.1073/pnas.1201753109 . PMC 3568301. PMID 23355677 .   
  69. ^ بارك آي إتش، أرورا إن، هوو إتش، ماهيرالي إن، أهفيلدت تي، شيمامورا أ، وآخرون . (سبتمبر 2008). "الخلايا الجذعية المحفزة الخاصة بالأمراض" . خلية . 134 (5): 877– 86. دوى : 10.1016/j.cell.2008.07.041 . بمك 2633781 . بميد 18691744 .   
  70. ↑ فريدمان بي إس، لام إيه كيو، سوندسباك جيه إل، إياترينو آر، سو إكس، كون إس جيه، وآخرون . (أكتوبر 2013). "انخفاض مستوى البوليسيستين-2 الهدبي في الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من مرضى داء الكلى متعدد الكيسات المصابين بطفرات PKD1" . مجلة الجمعية الأمريكية لأمراض الكلى . 24 (10): 1571-1586 . doi : 10.1681/ASN.2012111089 . PMC 3785271. PMID 24009235 .   
  71. ↑ دولمتش ر، غيشويند د (يونيو 2011). "الدماغ البشري في طبق: وعد الخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات" . مجلة الخلية . 145 (6): 831-834 . doi : 10.1016/j.cell.2011.05.034 . PMC 3691069. PMID 21663789 .  
  72. ↑ غرسكوفيتش م، جافاهيريان أ، سترولوفيتشي ب، دالي جي كيو (نوفمبر 2011). "الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات - فرص لنمذجة الأمراض واكتشاف الأدوية". مجلة نيتشر ريفيوز. اكتشاف الأدوية . 10 (12): 915-29 . doi : 10.1038/nrd3577 . PMID 22076509. S2CID 7945956 .  
  73. ↑ شي واي، إينوي إتش، وو جيه سي، ياماناكا إس (فبراير 2017). "تقنية الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات: عقد من التقدم" . نات ريف دراغ ديسكوف . 16 (2): 115-130 . doi : 10.1038/nrd.2016.245 . PMC 6416143. PMID 27980341 .  
  74. ^ جيرلين أ (5 ديسمبر 2012). "خطة روش وفايزر وسانوفي بقيمة 72.7 مليون دولار لبنك الخلايا الجذعية" . بلومبرج.كوم . تم الاسترجاع 23 ديسمبر 2012 .
  75. ↑ شيناوي ر، هوبر إ، مايزلز ل، شاهين ن، جيبستين أ، أربيل ج، وآخرون . (أكتوبر 2015). "مراقبة خلايا عضلة القلب المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية باستخدام مؤشرات فلورية مشفرة جينيًا للكالسيوم والجهد" . تقارير الخلايا الجذعية . 5 (4): 582-96 . doi : 10.1016/j.stemcr.2015.08.009 . PMC 4624957. PMID 26372632 .   
  76. ↑ شاهين ن، شيتي أ، هوبر إ، شيناوي ر، أربيل ج، جيبستين أ، وآخرون . (يونيو 2018). "صفائح خلايا قلبية مشتقة من خلايا جذعية بشرية مستحثة متعددة القدرات، تعبر عن مؤشر جهد مشفر جينيًا لدراسات دوائية واضطراب النظم القلبي" . تقارير الخلايا الجذعية . 10 (6): 1879-1894 . doi : 10.1016/j.stemcr.2018.04.006 . PMC 5989818. PMID 29754959 .   
  77. ↑ شارما، أرون؛ بوريدج، بول دبليو؛ ماكيثان، ويسلي إل؛ سيرانو، ريكاردو؛ شوكلا، برافين؛ سيد، نازيش؛ تشوركو، جاريد إم؛ كيتاني، تومويا؛ وو، هاودي؛ هولمستروم، ألكسندرا؛ ماتسا، إيلينا (15 فبراير 2017). "الفحص عالي الإنتاجية لسمية مثبطات التيروزين كيناز على القلب باستخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية" . مجلة ساينس ترانسليشنال ميديسين . 9 ( 377) eaaf2584. doi : 10.1126/scitranslmed.aaf2584 . ISSN 1946-6242 . PMC 5409837. PMID 28202772 .   
  78. ↑ ماكيثان، ويسلي ل.؛ سافتشينكو، أليكس؛ يو، مايكل س.؛ سيرينيولي، فابيو؛ برونيل، آرني أ.ن.؛ برايس، جيفري هـ.؛ كولاس، ألكسندر ر.؛ ميلر، إيفان و.؛ كاشمان، جون ر.؛ ميركولا، مارك (2017). " منصة آلية لتقييم اضطراب النظم الخلقي والناجم عن الأدوية باستخدام خلايا عضلة القلب المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات" . مجلة فرونتيرز إن فيزيولوجي . 8 766. doi : 10.3389/fphys.2017.00766 . ISSN 1664-042X . PMC 5641590. PMID 29075196 .   
  79. ^ سيرانو، ريكاردو. فيين، يجف صباحا؛ بروينيل ، آرني آن . هناتيوك، آنا ب. فو، ميشيل م. أماتيا، براشيلا إل؛ بيريا جيل، إسحاق؛ برادو، مارسيلا؛ سيجر، تيمون؛ وو جوزيف سي. كاراكيكيس، يوانيس؛ مارك ميركولا (يناير 2023). "منصة تعليمية عميقة لتقييم مخاطر عدم انتظام ضربات القلب الدوائية" . الخلية الجذعية . 30 (1): 86-95.e4. دوى : 10.1016/j.stem.2022.12.002 . بمك 9924077 . بميد 36563695 .  
  80. ↑ بيكر م (3 يوليو 2013). "كبد بشري مصغر مزروع في الفئران" . مجلة نيتشر . doi : 10.1038/nature.2013.13324 . S2CID 87064973. تاريخ الاسترجاع: 19 يوليو 2013 . 
  81. ↑ تاكيب تي، سيكين كيه، إينومورا إم، كويكي إتش، كيمورا إم، أوغايري تي، وآخرون . (يوليو 2013). "كبد بشري وظيفي ومزود بالأوعية الدموية من زرع برعم عضو مشتق من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات". نيتشر . 499 ( 7459): 481-484 . Bibcode : 2013Natur.499..481T . doi : 10.1038/nature12271 . PMID 23823721. S2CID 4423004 .   
  82. ↑ تشين واي، لوتيمان إف إف، شوغر إي، شولر إتش آر، زيلارايان إل سي، كيم كيه بي، وآخرون . (سبتمبر 2021). "إعادة برمجة خلايا عضلة القلب بشكل عكسي إلى حالة جنينية تحفز تجديد القلب في الفئران". مجلة ساينس . 373 (6562): 1537-1540 . Bibcode : 2021Sci...373.1537C . doi : 10.1126/science.abg5159 . PMID 34554778. S2CID 237617229 .   
  83. ↑ لافارس، نيك (30 يناير 2020). "زرع خلايا قلبية مُستنبتة مخبرياً في مريض بشري لأول مرة" . نيو أطلس . تم الاطلاع عليه في 9 فبراير 2026 .
  84. ↑ مولين إي (28 يناير 2014). "باحثون يُصلحون شبكية العين في الفئران باستخدام خلايا جذعية خالية من الفيروسات" . fiercebiotech.com . تاريخ الاسترجاع: 17 فبراير 2014 .
  85. ↑ بارك تي إس، بوتو آي، زيمرلين إل، هو جيه إس، ناجاريا بي، ميلر دي، وآخرون (يناير 2014). "تمتلك الخلايا السلفية الوعائية المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من دم الحبل السري قدرة معززة على تجديد الأوعية الدموية الشبكية الإقفارية" . سيركوليشن . 129 (3): 359-372 . doi : 10.1161/CIRCULATIONAHA.113.003000 . PMC 4090244. PMID 24163065 .   
  86. ↑ تانغ هـ، شا هـ، صن هـ، وو إكس، شي إل، وانغ ب، وآخرون . (أكتوبر 2013). "تتبع الخلايا الجذعية العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات في الجهاز العصبي المركزي للفئران والقرود" . إعادة برمجة الخلايا . 15 (5): 435-442 . doi : 10.1089/cell.2012.0081 . PMC 3787483. PMID 24020696 .   
  87. ↑ بوريدج، بي دبليو، ماتسا، إي، شوكلا، بي، لين، زد سي، تشوركو، جي إم، إيبرت، إيه دي، وآخرون . (أغسطس 2014). "توليد خلايا عضلة القلب البشرية بطريقة كيميائية محددة" . مجلة نيتشر ميثودز . 11 (8): 855-860 . doi : 10.1038/nmeth.2999 . PMC 4169698. PMID 24930130 .   
  88. ^ فيين، يجفف صباحا؛ ماكيثان، ويسلي L.؛ بروينيل ، آرني آن . سبيرنج، شون؛ هورمان، لاريسا. أولمر، باربل؛ تشانغ، هوي. بريجانتي، فرانشيسكا؛ شفايتزر، ميكايلا؛ هيجي، بنس؛ لياو ، تشاندي (21 يوليو 2020). "وسائط النضج الأيضي تعمل على تحسين الوظيفة الفسيولوجية للخلايا العضلية القلبية المشتقة من iPSC" . تقارير الخلية . 32 (3) 107925. دوى : 10.1016/j.celrep.2020.107925 . ISSN 2211-1247 . بمك 7437654 . بميد 32697997 .   
  89. ↑ ويليمز إي، سبيرينغ إس، دافيدوفيتش إتش، لانيير إم، شيا زد، داوسون إم، وآخرون . (أغسطس 2011). "مثبطات الجزيئات الصغيرة لمسار Wnt تعزز بقوة تكوين خلايا عضلة القلب من الأديم المتوسط ​​المشتق من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية" . مجلة أبحاث الدورة الدموية . 109 (4): 360-364 . doi : 10.1161/CIRCRESAHA.111.249540 . PMC 3327303. PMID 21737789 .   
  90. ↑ يازاوا م، هسوه ب، جيا إكس، باسكا إيه إم، بيرنشتاين جيه إيه، هالمير جيه، دولمتش آر إي (مارس 2011). " استخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات لدراسة الأنماط الظاهرية القلبية في متلازمة تيموثي" . نيتشر . 471 (7337): 230-234 . Bibcode : 2011Natur.471..230Y . doi : 10.1038/nature09855 . PMC 3077925. PMID 21307850 .  
  91. ↑ إيتزهاكي، آي.، مايزلز، إل.، هوبر، آي.، زوي-دانتسيس، إل.، كاسبي، أو.، وينترستيرن، إيه.، وآخرون . (مارس 2011). "نمذجة متلازمة كيو تي الطويلة باستخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات". مجلة نيتشر . 471 (7337): 225-229 . Bibcode : 2011Natur.471..225I . doi : 10.1038/nature09747 . PMID: 21240260. S2CID : 4384573 .   
  92. ↑ شارما أ، بوريدج ب.و، ماكيثان و.ل، سيرانو ر، شوكلا ب، سيد ن، وآخرون . (فبراير 2017). "الفحص عالي الإنتاجية لسمية مثبطات التيروزين كيناز على القلب باستخدام الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية" . مجلة ساينس ترانسليشنال ميديسين . 9 (377) eaaf2584. doi : 10.1126/scitranslmed.aaf2584 . PMC 5409837. PMID 28202772 .   
  93. ↑ ماكيثان، ويسلي ل.؛ فيين، دريس أ.م.؛ برونيل، آرني أ.ن.؛ أوكولوتوفيتش، كارل ج.؛ رايان، دانيال أ.؛ سامبسون، كيفن ج.؛ بوتيه، فرانك؛ سافتشينكو، أليكس؛ غوميز-غالينو، خورخي؛ فو، ميشيل؛ سيرانو، ريكاردو (5 نوفمبر 2020). "إعادة هندسة دواء مضاد لاضطراب النظم باستخدام خلايا عضلة القلب المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات للمرضى لتحسين الإمكانات العلاجية وتقليل السمية" . خلية جذعية . 27 (5): 813-821.e6. doi : 10.1016/j.stem.2020.08.003 . ISSN 1875-9777 . PMC 7655512. PMID 32931730 .   
  94. ↑ "iPS から心筋細胞製造 タカラバイオとベンチャー" .日本経済新聞 電子版(باللغة اليابانية). 24 يونيو 2014 . تم الاسترجاع في 8 نوفمبر 2019 .
  95. ↑ "iPSで心臓治療了承 高難度の再生医療へ一歩" .日本経済新聞 電子版(باللغة اليابانية). 16 مايو 2018 . تم الاسترجاع في 8 نوفمبر 2019 .
  96. ↑ """ .朝日新聞デジタル(باللغة اليابانية). 16 مايو 2018 أرشفة من الأصلي في 8 نوفمبر 2019 . تم الاسترجاع في 8 نوفمبر 2019 .
  97. ↑ وي هـ، وانغ سي، غو ر، تاكاهاشي ك، ناروس ك (ديسمبر 2019). "تطوير نموذج لمرض القلب الإقفاري باستخدام خلايا عضلة القلب المتمايزة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات البشرية" . مجلة الاتصالات البحثية في الكيمياء الحيوية والفيزياء الحيوية . 520 (3): 600-605 . Bibcode : 2019BBRC..520..600W . doi : 10.1016/j.bbrc.2019.09.119 . PMID 31623826 . 
  98. ↑ «أولى عمليات نقل الدم «المصنّع» مُخطط لها في عام 2016» . Gizmag.com. 23 أبريل 2014. تم الاطلاع عليه بتاريخ 23 أبريل 2014 .
  99. ↑ غاربر ك (سبتمبر 2015). "معهد ريكين يعلق أول تجربة سريرية تتضمن خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات". مجلة نيتشر للتكنولوجيا الحيوية . 33 (9): 890-1 . doi : 10.1038/nbt0915-890 . PMID 26348942. S2CID 205271169 .  
  100. ↑ توبيتا م، كونومي ك، توراشيما ي، كيمورا ك، تاوكا م، كامينوتا م (يونيو 2016). "تحديات اليابان في الطب التجديدي الانتقالي: العمل على سلامة الطب التجديدي" . العلاج التجديدي . 4 : 78-81 . doi : 10.1016/j.reth.2016.04.001 . PMC 6581824. PMID 31245489 .  
  101. ↑ مركز ريكين لبيولوجيا النمو. "معلومات حول دراسة تجريبية مقترحة حول سلامة وجدوى زرع صفائح خلايا ظهارة الصباغ الشبكية (RPE) المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات الذاتية في المرضى المصابين بالتنكس البقعي المرتبط بالعمر الوعائي الجديد" . بحث . مؤرشف من الأصل في 26 يونيو 2013. تم الاسترجاع في 23 يوليو 2013 .
  102. 1 2 غالاغر ج (19 يوليو 2013). "اليابان توافق على تجربة رائدة للخلايا الجذعية البالغة" . بي بي سي نيوز . تم الاطلاع عليه بتاريخ 23 يوليو 2013 .
  103. ↑ "أول عملية زرع لخلايا ظهارة الشبكية الصبغية المشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات من متبرع في مريض مصاب بالتنكس البقعي المرتبط بالعمر" . مركز ريكين لبيولوجيا النمو. 4 أبريل 2017. مؤرشف من الأصل في 6 سبتمبر 2017. تم الاطلاع عليه في 6 سبتمبر 2017 .
  104. ↑ «تم الإبلاغ عن أول رد فعل سلبي خطير لزراعة خلايا شبكية مشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات» . صحيفة جابان تايمز الإلكترونية . ١٧ يناير ٢٠١٨. مؤرشف من الأصل في ٢٧ يناير ٢٠١٨. تم الاطلاع عليه في ٢٧ يناير ٢٠١٨ .
  105. ↑ دينسبيرجر ج، ريزينجر د، ويبر ب (11 سبتمبر 2020). "الاتجاهات العالمية في التجارب السريرية التي تتضمن الخلايا الجذعية متعددة القدرات: تحليل منهجي متعدد قواعد البيانات" . مجلة npj للطب التجديدي . 5 (1) 15. doi : 10.1038/s41536-020-00100-4 . PMC 7486930. PMID 32983575 .  
  106. ↑ كنوبفلر، ب. (25 يناير 2021). "ما هي الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات أو الخلايا الجذعية متعددة القدرات، وما هي آفاقها السريرية؟" . ذا نيتش . تم الاطلاع عليه في 7 فبراير 2021 .
  107. ↑ «لجنة تنظيمية يابانية توصي بتطوير أولى العلاجات القائمة على الخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات في العالم» . www.aabb.org . ٢٤ فبراير ٢٠٢٦. تاريخ الاطلاع: ١ مارس ٢٠٢٦ .
  108. 1 2 كوجا ك، وانغ ب، كانيكو س (2020). "الوضع الحالي والآفاق المستقبلية للخلايا الجذعية المحفزة متعددة القدرات المعدلة بواسطة HLA" . الالتهاب والتجديد . 40 23. doi : 10.1186/s41232-020-00132-9 . PMC 7528263. PMID 33014207 .   تتضمن هذه المقالة نصًا من هذا المصدر، وهو متاح بموجب ترخيص CC BY 4.0 .
  109. ↑ هاريدي ر (23 أكتوبر 2017). "علاج الخلايا الجذعية المضاد للشيخوخة يثبت نجاحه في التجارب البشرية المبكرة" . نيو أطلس .
  110. ↑ ساركار تي جيه، كوارتا إم، موخرجي إس، كولفيل إيه، باين بي، دوان إل، وآخرون (مارس 2020). "التعبير المؤقت غير التكاملي لعوامل إعادة برمجة النواة يعزز التحسين متعدد الأوجه للشيخوخة في الخلايا البشرية" . نيتشر كوميونيكيشنز . 11 (1) 1545. Bibcode : 2020NatCo..11.1545S . doi : 10.1038/ s41467-020-15174-3 . PMC 7093390. PMID 32210226 .   
  111. ^ أسدي سارابي، بيدرام. الرسماني، إلهام؛ شعبان بورمام، مهشيد؛ هندي، زهرة؛ نيكوبين، بهناز؛ زرابي، علي؛ فوسوغ، مسعود (2025). "الخلايا الجذعية متعددة القدرات ناقصة المناعة: تغيير قواعد اللعبة في الطب التجديدي القائم على الخلايا" . علم الأدوية المناعي الدولي . 162 115134: 115– 134. دوى : 10.1016/j.intimp.2025.115134 . بميد 40580745 .